Очень многие родители все чаще и чаще задаются вопросом, стоит ли сохранять стволовые клетки пуповинной крови младенца. Ведь ведущие акушеры-гинекологи и многие звездные мамочки советуют будущим родителям сохранить этот считающийся поистине уникальным естественный биоматериал в качестве дополнительной страховки для ребенка.

Пуповинная кровь — ценный биоматериал

Для начала разберемся, что же такое пуповинная кровь (ПК) и для чего ее нужно сохранять. Пуповинная кровь — это кровь, которая собирается из пуповины и плаценты сразу же после рождения ребенка.

Особенность этого биоматериала заключается в том, что в нем содержатся здоровые гемопоэтические стволовые клетки (СК). Они намного моложе и активнее однотипных клеток из костного мозга, т. к. сохранены в самом начале жизни. Подтверждение тому — множество научных исследований за последние тридцать лет. Этот ценный (точнее, бесценный, учитывая далеко не до конца изученные возможности его применения в медицине) биоматериал используется в лечении более 85 заболеваний, а именно — болезней крови, иммунной системы, аутизма, ДЦП, а также ряда наследственных заболеваний.

Стоит отметить, что сохраненная ПК подойдет не только самому ребенку, но и обеспечит вполне надежную биологическую страховку его близким, родителям, родным братьям и сестрам. Многие врачи сегодня настоятельно рекомендуют сохранять стволовые клетки тем семьям, у которых дети принадлежат к редким этническим группам и существует их генетическая предрасположенность к определенным заболеваниям. А также тем, у кого старшим детям показана трансплантация с использованием СК.

Сбор пуповинной крови

Пуповинная кровь собирается после того, как ребенок родился, а пуповина перерезана, поэтому процедура совершенно безболезненна и безопасна как для малыша, так и для его матери. Сбор крови занимает максимум 5 минут. Причем собирают ее как при естественных родах, так и при кесаревом сечении. Для этого врач помещает иглу в пупочную вену, по которой кровь переливается в специальный пакет с жидкостью, предотвращающей свертываемость. Обычно собирается от 80 до 120 мл крови.

Выделение стволовых клеток из пуповинной крови

После забора пуповинной крови следует этап сепарации и кровь подвергается поэтапной обработке. Кровь очищают от остатков плазмы, эритроцитов и большинства зрелых лейко­цитов и выделяют стволовые клетки. На сегодня существует три способа выделения: ручной, полуавтоматический и автоматический. Наиболее популярен второй способ. Пакет с кровью помещают в специальный прибор, к которому подключены три контейнера с трубочками. С помощью автоматического пресса по одной трубочке вверх перемещается плазма, по второй вниз спускаются эритроциты, а средний слой с образцом стволовых клеток остается в пакете, далее его запаивают и транспортируют в лабораторию. Стоит отметить, что содержание стволовых клеток в пуповинной крови относительно невелико - менее 1% от всех лейкоцитов. Обычно собирают 4-6% СК, но этого объема вполне достаточно для трансплантации взрослому человеку.

Хранение

Хранить пуповинную кровь допускается исключительно в специальных контейнерах и только в специализированных банках (не емкостях, разумеется, а медицинских организациях), с которыми семья заключает контракт еще до наступления родов. Пуповинная кровь собирается специально обученным персоналом родового отделения.

После того как биоматериал собран, контейнер в специальной упаковке в течение 36 часов доставляют автомобилем или самолетом в лабораторию, где его детально исследуют. ПК проходит тестирование на наличие инфекций, определение группы крови и резус-фактора. После этого она помещается в специальные криомешки или криопробирки и отправляется на бессрочное хранение в криохранилища. Точнее, в резервуар объемом 240 литров, заполненный жидким азотом для поддержания постоянной температуры (от -170ºС до -196ºС) хранящихся образцов. Такой формат хранения позволяет сберечь изначальные полезные свойства образца на неограниченный период времени.

Насколько популярны в России банки стволовых клеток

Но так ли эта услуга востребована в России? По данным Института стволовых клеток, на начало 2016 года на территории нашей страны работало 14 персональных банков пуповинной крови, в которых хранилось 55576 персональных образцов стволовых клеток. Причем самые крупные банки — Гемабанк и Криоцентр — функционируют на рынке медицинских услуг уже около 15 лет. Также Институт приводит динамику количества поступающих образцов ПК с 2009 по 2015 гг. Судя по этим данным, ежегодно в банки в среднем обращается 5600 человек. И только в 2012 году наблюдался рост продаж, когда было сохранено 7486 образцов СК. Многие связывают эти показатели с высоким ростом рождаемости в том году и активной PR-кампанией.

По сути, 55 тысяч — не такая уж большая цифра. Так почему же за 15 лет существования подобных банков нет большого спроса на эту услугу? Как показывают опросы, многие родители считают такую биостраховку слишком дорогой и неэффективной. “Зачем здоровому ребенку нужно сохранять пуповинную кровь? К тому же, медицина не стоит на месте, а прогрессирует, и в случае заболевания вылечить ребенка можно без использования стволовых клеток”, — вот наиболее распространенная формулировка среди сомневающихся.

Другие родители, услышав про сбор денег за хранение СК, сразу вспоминают финансовую пирамиду МММ, которая закончилась громким крахом с тысячами пострадавших людей. Есть и те, кто просто не доверяет условиям хранения стволовых клеток в России. Обратимся вновь к аналитическим данным Института и посмотрим, сколько людей вложили свои сбережения в здоровье ребенка и своих родственников и, как выяснилось, сделали это не зря. Согласно данным на 2016 год, было выдано 106 образцов ПК для лечения пациентов с диагнозами: нейробластома, анемия Фанкони, ювенильный миелолейкоз, ДЦП, синдром Швахмана-Даймонда.

Сколько стоит сбор пуповинной крови

За сбор, транспортировку и хранение биоматериала сроком на 5 лет Гемабанк берет от 84 тыс. рублей, за 10 лет сумма расходов составит 104 тыс. рублей, за 20 лет — 134 тыс. рублей.

В Криоцентре при заключении договора стоимость услуг обойдется в сумму от 59 до 69 тыс. рублей (в зависимости от того, в чем будет храниться биоматериал — в криомешке или в криопробирке), плюс 5,5/6 тыс. рублей за ежегодное хранение. К примеру, за 5 лет клиент необычного банка заплатит 86,5/99 тыс. рублей.

Список криобанков в России

По информации Института стволовых клеток человека в России работает 14 банков, которые оказывают услугу по персональному хранению пуповинной крови. Эти данные были опубликованы на сайте компании в июне 2016 года.

• Гемабанк
• ООО «Криоцентр»
• ГУП Самарской области «Поволжский Банк гемопоэтических клеток»
• Банк стволовых клеток пуповинной крови Перинатального медицинского центра
• ООО «Покровский банк стволовых клеток»
• Оренбургский банк стволовых клеток
• Банк Стволовых клеток пуповинной крови при Центральной клинической больнице управления делами президента (ЦКБ)
• ООО «Транс-Технологии»
• Банк стволовых клеток «СМ-Клиника»
• Ижевский Банк стволовых клеток
• Уфимский Банк стволовых клеток при клинике «Мать и Дитя»
• Банк стволовых клеток при Казанском государственном медицинском университете
• Казанский банк ПК при ФГУ
• Банк при ООО «НЕО-клиник» (г. Тюмень)

Донорство пуповинной крови – это процедура сбора, заморозки и хранения крови из пуповины и плаценты после рождения вашего ребенка для будущего использования в медицине. Пуповинная кровь очень высоко ценится, потому что является богатым источником стволовых клеток, то есть строительных блоков крови и иммунной системы человека.

Стволовые клетки обладают уникальной способностью дифференцироваться в другие ткани; поэтому она может лечить огромное множество болезней, в том числе лейкемию и серповидно-клеточную анемию. Здесь все решаете только вы и ваша семья: сдавать пуповинную кровь своего будущего ребенка или нет.

1. Действительно ли пуповинная кровь показывает перспективные результаты?

Многочисленные исследования по всему миру позволяют с оптимизмом смотреть в будущее данного вопроса. Эксперты утверждают, что в один прекрасный день больные раком смогут извлечь выгоду из стволовых клеток, которые были сданы на хранение еще при рождении. Следовательно, есть надежда на то, что стволовые клетки могут быть использованы для лечения рака, не обусловленного генетически.

В свете последних экспериментов, проведенных на животных, появилось предположение, что в ближайшем будущем пуповинная кровь будет использоваться для лечения диабета, травмы спинного мозга, сердечной недостаточности, инсульта и серьезных неврологических заболеваний. Однако пока что возможности стволовых клеток находятся на стадии разработок и захватывающих обещаний.

2. Сколько стоит?

Частные банки пуповинной крови, как правило, взимают регистрационный сбор в размере 60 тысяч рублей или около того, плюс ежегодные взносы за хранение – около 6000 руб.

3. Может ли мой будущий ребенок лечится своей собственной пуповинной кровью?

Если у вашего ребенка есть или развивается заболевание на генетической основе – это как раз те случаи, в которых можно только выиграть от трансплантации пуповинной крови – т.к. она уже содержит все генетические инструкции для этого заболевания, и поэтому это не подходящее лечение. Большинство стволовых банков рассчитаны на лечение братьев и сестер.

4. Значит, у нас больше шансов найти донора стволовых клеток в системе общественного банка пуповинной крови, а не в своей собственной семье?

Вероятность точного соответствия ткани у брата и сестры составляет всего лишь 30%, по словам авторитетных врачей, участвующих в национальных программах донорской трансплантации костного мозга. Если говорить о таком соответствии в общественных базах, то речь идет 1%.

Некоторые специалисты выражают сомнения по поводу донорства пуповинной крови для широкой общественности, по аналогии с банками крови. С другой стороны, такие действия рекомендуются для семей, в которых есть человек с поставленным диагнозом, лечащимся при помощи трансплантации пуповинной крови. В этой ситуации, вы можете претендовать на участие в донорской программе «родственных связей», предполагающей сбор, обработку и хранение материала в течение 6 лет без каких-либо затрат.

5. Вывод?

Словом, если вы решили сдать пуповинную кровь своего будущего ребенка, обсудите это со своим наблюдающим врачом и приступайте к выбору государственного или частного банка прямо сейчас. Дело в том, что большинство частных банков отдают предпочтение женщинам на сроке второго триместра беременности. Если вы будете оттягивать дальше, тогда вам придется платить за просрочку платежа регистрации.

Девочки, сегодня прочитала статью про забор пуповинной крови на стволовые клетки.

Сохранение пуповинной крови: зачем и как?

Среди множества мероприятий, которые предлагают беременным, особняком стоит забор и хранение пуповинной крови. Суть процедуры в следующем: сразу после родов из пуповины получают кровь, которая принадлежала плоду. Выделенные из неё клетки замораживают и хранят в специальном банке до тех пор, пока они не потребуются.

Ценность пуповинной крови заключается в том, что она содержит биологически активные стволовые клетки, и поэтому хорошо подходит для нужд клеточной терапии и трансплантологии.

Банки пуповинной крови делятся на именные - в них хранят кровь тех детей, родители которых заключили соответствующий контракт, и банки-регистры, создаваемые на основе безвозмездного донорства. Любой человек, которому для лечения требуется пуповинная кровь, может обратиться в банк-регистр. Однако проблема заключается в том, что подобрать подходящую кровь бывает очень трудно: необходимо соответствие по основным антигенным системам, иначе чужеродные клетки вызовут у пациента реакцию отторжения. К сожалению, в России коллекция у банков-регистров достаточно скудна, поэтому приходится искать кровь часто за рубежом, на что требуются время (от 6 месяцев до года) и немалые деньги (от 15000 Евро). Возможный выход из сложившейся ситуации - запасать собственную кровь ещё при рождении: она будет всегда доступна и в случае необходимости идеально подойдёт для трансплантации.

Чем ценна пуповинная кровь?

Пуповинная кровь богата кроветворными стволовыми клетками, т.е. клетками-родоначальниками элементов крови. Их используют для трансплантации, когда собственное кроветворение нарушается: при лейкозах, тяжелых нарушениях иммунной системы и других заболеваниях. Противники хранения пуповинной крови резонно замечают, что такие патологии, хоть и являются жизнеугрожающими, встречаются редко. Однако, с другой стороны, в перспективе предполагается, что стволовые клетки будут использоваться по более широким показаниям. В любом случае, уже сейчас успешно проведены тысячи трансплантаций пуповинной крови, спасшие жизнь больным с ранее считавшимися неизлечимыми заболеваниями.

Пуповинная кровь - не единственный источник кроветворных клеток, но у неё есть ряд преимуществ: лёгкое и безопасное получение, молодость, а потому высокая функциональная активность стволовых клеток и иммунологическая совместимость. Для того же, чтобы воспользоваться заранее заготовленной кровью, требуется от нескольких дней до нескольких недель.

Пуповинную кровь новорожденного можно использовать для лечения других членов семьи. Документированы успешные случаи пересадки родителям, бабушкам и дедушкам и даже двоюродным братьям и сестрам. Однако наибольшие шансы оказаться совместимыми имеют дети одних многодетных родителей.

Сохранять или не сохранять пуповинную кровь, каждые родители решают в зависимости от своего материального положения и от того, насколько нужной они считают эту процедуру. Следует учитывать, что забор пуповинной крови особенно показан для тех детей, в чьих семьях встречались тяжелые заболевания кроветворной системы или уже есть больные дети, которых можно вылечить пуповинной кровью брата или сестры, а также этническим меньшинствам, которым трудно найти совместимого донора в международных банках-регистрах.

Как проводится забор пуповинной крови?

После рождения ребёнка акушерка перевязывает и пересекает пуповину. Затем материнский конец пуповины обрабатывают стерильным раствором и с помощью иглы забирают из пупочной вены кровь в специальный стерильный контейнер с антикоагулянтом. Пуповинной крови обычно немного, около 80 мл, поэтому целесообразно дополнительно извлекать из плаценты всю имеющуюся в ней кровь.

Процедура абсолютно безболезненна и занимает несколько минут. Её можно провести как при нормальных родах, так и в ходе кесарева сечения. Более того, при многоплодной беременности технологически возможно собрать пуповинную кровь каждого из детей.

Как выделяют стволовые клетки?

Не позднее чем через сутки после забора образец попадает в банк. Прежде чем отправлять кровь на хранение, её нужно тщательно обработать. Вначале образец проверяют на инфекции, определяют группу крови и резус-фактор, затем «процессируют», то есть получают концентрат стволовых клеток. С помощью специального прибора удаляют избыток плазмы и практически все эритроциты. Полученный концентрат анализируют под микроскопом для определения жизнеспособности клеток. Следующий этап – заморозка клеток, которая не должна привести к их гибели. С этой целью добавляют криопротектор, предотвращающий образование «острых, рвущих клетки» кристаллов льда. Затем концентрат плавно замораживают до -90°С и помещают на карантинное хранение (пары жидкого азота, -150°С), где они находятся до того момента, пока не будут готовы результаты всех анализов. Наконец, приблизительно через 20 дней образцы переносят в постоянное хранилище (жидкий азот, -196°С).

На выходе получается от 5 до 7 пробирок концентрата. Помимо основных пробирок, заготавливают несколько пробирок-спутников - они содержат минимальный объём плазмы и клеток, достаточный для проведения анализа. Например, если владелец крови захочет использовать её для своего родственника и потребуется сделать проверку на совместимость, не надо будет размораживать основной образец - достаточно будет извлечь пробирку-спутник.

Как хранят стволовые клетки?

Клетки пуповинной крови хранятся в особых ёмкостях с жидким азотом в отдельной комнате, расположенной глубоко под землёй. Низкую температуру поддерживает специальная автоматизированная система, непрерывно контролирующая уровень жидкого азота. Она будет работать даже в случае отключения центрального электроснабжения. Банк пуповинной крови круглосуточно охраняется.

Исследования показывают, что в таком состоянии клетки остаются практически сохранными на протяжении многих лет. Уже сейчас не вызывает сомнения, что они не теряют своих свойств за 15-17 лет. Теоретически замороженные клетки могут храниться бесконечно долго.

Кому принадлежат стволовые клетки?

До совершеннолетия ребенка запас клеток пуповинной крови принадлежит его родителю или тому, кто указан в договоре хранения. После совершеннолетия сам ребёнок становится владельцем.

Сколько стоит договор?

За то, чтобы забрать, выделить и заморозить клетки пуповинной крови, придётся однократно заплатить около в 2000 Евро. В дальнейшем хранение образца обойдется в 3000 рублей в год (сумма прописывается в договоре и в последующем не меняется).

Что нужно сделать, если Вы хотите сохранить пуповинную кровь?

На любом сроке беременности нужно сдать анализы на инфекции и заключить договор. Затем сотрудники банка заранее доставят в роддом именной комплект с уникальным штрих-кодом, договорятся с врачом и акушеркой, обеспечат забор и доставку крови в банк, где из неё будут выделены стволовые клетки.

Не важно, предполагаются ли платные или бесплатные роды либо же кесарево сечение. Если женщина доставлена скорой помощью со схватками в ближайший роддом, следует позвонить по круглосуточному телефону и сообщить своё местонахождение - сотрудники банка договорятся с врачами.

Кто-нибудь пользовался данной услугой? Стоит она того или нет? Кто рожал в ЦПСиРе, вам предлагали данную услугу?

Радикальным методом лечения многих тяжелых гематологических болезней является , которые выделяют из ткани костного мозга или крови. Осуществить его возможно путем поиска подходящего донора, что довольно не просто. Вероятность существования неродственного донора, совместимого по HLA-антигенному составу, составляет 1:100000. Для этого необходимы целые регистры типированных доноров, исчисляемые несколькими сотнями тысяч человек. Частично решить эту проблему помогает заготовка пуповинной крови.

Клиническое использование

В пуповинной крови содержится большое количество стволовых клеток, которые могут быть использованы в будущем для лечения ряда серьезных заболеваний.

Кровь, полученная из плаценты, является богатым источником гемопоэтических клеток. Концентрация колониеобразующих единиц в ней значительно превышает их количество в крови взрослого человека даже после стимуляции факторами роста. Она приближается по своему составу к костномозговой ткани. Поэтому стволовые клетки, содержащиеся в пуповинной крови, могут успешно применяться в гематологии для лечения следующих заболеваний:

• миелодиспластические синдромы;
• некоторые врожденные заболевания ( , наследственные гемоглобинопатии, синдром Барра и др.).

Трансплантация гемопоэтических клеток, полученных из плацентарной крови, является перспективным направлением в медицине, которое уже применяется в неврологии (последствия травм, дегенеративные заболевания нервной системы), ревматологии (диффузные ), онкологии и других отраслях.

Эффективность такого лечения определяется:

• своевременностью диагностики и лечения заболевания;
• степенью гистосовместимости (по системе HLA) донора и реципиента;
• возрастом больного (дает хорошие результаты у детей младше 5 лет);
• количеством пересаженных стволовых клеток (если их мало, то повышается риск рецидива патологического процесса или несостоятельности трансплантата).

Заготовка

Пуповинную кровь получают во время родов через естественные родовые пути или путем кесарева сечения. На этапе планирования процедуры беременную женщину всесторонне обследуют и исключают у нее заболевания инфекционной природы ( , и др.).

Готовясь к родам, в асептических условиях подготавливают систему для забора крови. Она состоит из специального контейнера с гемоконсервантом и устройством для взятия крови.

При нормальных родах через естественные родовые пути забор крови может осуществляться в двух вариантах:

• Если плацента находится в полости матки и еще не отделилась, то эксфузия крови выполняется после наложения зажима на пупочный канатик и отделения новорожденного от плодного места. Для этого пуповину тщательно обрабатывают растворами антисептиков, после чего производят пункцию пупочной вены, располагая емкость для сбора материала на 50-70 см ниже живота роженицы, чтобы кровь стекала в нее самопроизвольно.
• Если плацента уже выделена из полости матки, то ее располагают на специальной рамке плодной частью книзу, затем также обрабатывают и пунктируют вену пупочного канатика, после чего получают кровь в контейнер.

Из артерии пупочного канатика дополнительно берется 10 мл крови для первичного этапа обследования на принадлежность к группе крови и скрытые инфекции.

После окончания процедуры контейнер отсоединяют и транспортируют в банк пуповинной крови в специальном холодильнике или дополнительном контейнере, защищенном от перепада температур. При этом длительность хранения крови с гемоконсервантом до ее фракционирования не должна превышать 24 часов. Иначе стволовые клетки гибнут.

Хранение стволовых клеток

В емкости с жидким азотом стволовые клетки хранятся до 25 лет.

Выделение гемопоэтических клеток из пуповинной крови проводится в асептических условиях.

• Для этого кровь подвергается центрифугированию на высоких оборотах, в результате чего от нее отделяется плазма.
• После этого приступают к осаждению эритроцитов путем добавления седиментирующего вещества (желатин, гидроксиэтилкрахмал).
• Полученную клеточную взвесь смешивают с физиологическим раствором и дважды центрифугируют.
• Затем с помощью шприца отделяют клеточный осадок и подготавливают его к заморозке и длительному хранению.

Полученные из пуповинной крови стволовые клетки хранятся при низких температурах в замороженном состоянии:

• в холодильных камерах с температурой -80 градусов (до 6 месяцев);
• в парах жидкого азота при температуре -150 градусов (несколько лет);
• в емкостях с жидким азотом и температурой -196 градусов (более 20 лет).

Для замораживания клеточной взвеси ее предварительно охлаждают до +4 градусов на ледяной бане или в условиях холодильника. Затем шприцом набирают эту взвесь и переносят ее в мешок для консервирования, добавляя по каплям ограждающий раствор, после чего мешок запаивается и помещается в специальный аппарат для программного замораживания. При этом сам процесс осуществляется по четырехступенчатой программе, что позволяет сохранить жизнеспособность клеток в течение длительного времени.

Для использования замороженных образцов стволовых клеток непосредственно перед трансфузией производится медленное размораживание клеточной взвеси на водяной бане с температурой +40 градусов. После тщательного перемешивания выполняется исследование на сохранность клеток и их жизнеспособность.

Лабораторное тестирование

Применение в клинической практике крови, полученной из пуповины, требует специального тестирования в условиях лаборатории. Это позволяет определить принадлежность по HLA-системе, оценить качество препарата и выявить потенциальную возможность заражения инфекционными заболеваниями.

Перечень необходимых лабораторных анализов включает:

• определение объема пуповинной крови и содержания в нем клеточных элементов (стволовых клеток, лейкоцитов, эритроцитов);
• анализ крови на маркеры вирусных гепатитов;
• биохимическое исследование крови ();
• выявление антител к ВИЧ, бледной трепонеме, ;
• посев крови на стерильность;
• определение HLA-генотипа, группы крови по системе АВ0 и резус-фактору.

Для проведения всех исследований в полном объеме необходимо около 10 мл крови. Из них 4 мл сразу берут для тестирования, а остальные 6 мл центрифугируют и замораживают, после чего снова исследуют. Это дает возможность оценить качество трансплантата и прогнозировать время приживления кроветворных клеток в организме больного.

Пуповинную кровь для исследований используют очень экономно с целью минимизации потерь гемопоэтических клеток.

• Определение групповой принадлежности, HLA-фенотипа, биохимических показателей производится в порции крови, взятой из артерии пуповины.
• Бактериологическое исследование осуществляется в оставшейся после центрифугирования эритроцитарной массе.
• Серологические исследования сыворотки крови с целью выявления инфекций проводят с использованием плазмы, полученной в процессе фракционирования.
• Оценка концентрации клеток-предшественников гемопоэза производится в клеточном осадке, полученном путем разделения крови на фракции.

Преимущества и недостатки использования пуповинной крови

В настоящее время многие родители задумываются о том, стоит ли заготавливать пуповинную кровь ребенка, важно это или нет? Для того чтобы ответить на эти вопросы, рассмотрим преимущества этого метода лечения.

1. Процедура является абсолютно безопасной (не наносит вред здоровью матери и ребенка).
2. Не требует дополнительного обезболивания.
3. Имеет низкий риск заражения инфекционными заболеваниями.
4. Предоставляет возможность длительного хранения гемопоэтических клеток.
5. Обеспечивает биологическое страхование жизни ребенка при развитии у него тяжелых заболеваний (особенно кроветворной системы).

Однако существуют и недостатки применения пуповинной крови как источника стволовых клеток.

1. Основным из них является относительно небольшой объем получаемого материала и потери его при заготовке и лабораторном тестировании.
2. Еще одним недостатком этой процедуры является ее высокая стоимость при небольшой вероятности применения у ребенка. Однако она малосопоставима со стоимостью пересадки костного мозга, которая исчисляется десятками тысяч долларов.

В настоящее время в России и других странах существуют специальные банки пуповинной крови. Это могут быть частные и государственные структуры. Последние преследуют цели создать определенный запас биологического материала, который может использоваться для научных исследований и лечения больных.

Частные банки занимаются хранением именных образцов, которыми можно воспользоваться в случае болезни. Они предлагают своим клиентам различные тарифы:

• Средняя стоимость забора и хранения пуповинной крови в Гемабанке составляет 65000 рублей, отдельно оплачивается каждый год хранения (7000 рублей).
• В банке стволовых клеток «Криоцентр» пакет хранения стволовых клеток (25 лет) имеет общую стоимость около 230 000 рублей.

«Использование стволовых клеток можно считать естесственной формой «биологического» медицинского страхования жизни»

- Владимир Иванович, давайте сразу начнем с центрально­го вопроса: что такое стволовые клетки, чем они отличаются от других клеток организма?

Это уникальная группа клеток организма, способных размно­жаться и давать начало основным клеточным компонентам крови, кост­ного мозга и иммунной системы. Они способны к самовоспроизводству и выполнению необходимых функций, т.е. они могут формировать клетки практически всех известных тканей человека.

- Что является источником стволовых клеток для воз­можной трансплантации?

Во-первых, костный мозг (донорский или аутологичный 2), во-вторых, кровь пациента после проведения процедуры стимуляции кост­ного мозга, в-третьих, кровь, получаемая во время родов из пуповины и плаценты.

- Почему наиболее перспективным, по сравнению с другими источниками, считается использование клеток пуповинной крови?

Получение стволовых клеток из костного мозга и периферичес­кой крови связано с применением инвазивных (хирургических) методов или введением высокоактивных фармакологических препаратов и может проводиться только в условиях специализированных стационаров. Это направление сегодня также развивается.

- В чем же преимущество клеток пуповинной крови?

Это клетки уже сформированного организма - ребенка, кото­рый родился. В мире уже накоплен огромный опыт по их транспланта­ции: имеется более 3 тысяч случаев, из них примерно 90% удачных, в том числе удалось вылечить пациентов со злокачественными заболева­ниями. Стволовые клетки пуповинной крови обладают целым рядом пре­имуществ по сравнению с клетками из других источников: во-первых, они «молоды», т.е. обладают наибольшим потенциалом к делению и дифференцировке. Во-вторых, вероятность инфицирования пуповинной крови в процессе внутриутробного развития ребенка минимальна. По статистике, вирусы герпеса или цитомегаловирус обнаруживаются в крови пуповины менее чем в 1 % случаев (в крови взрослых людей - бо­лее 25%). В-третьих, стволовые клетки пуповинной крови обладают меньшей иммуногенностью 1 при аллогенных 2 трансплантациях. Успеш­ная трансплантация клеток пуповинной крови может быть выполнена даже при частичной несовместимости донора и реципиента, что недостижимо в случае использования костного мозга. В-четвертых, если срав­нивать трансплантацию клеток костного мозга и клеток пуповинной кро­ви, используемая доза стволовых клеток «молодой» пуповинной крови в несколько раз ниже аналогичной по эффекту дозы клеток из костного мозга взрослого человека.

Главное достоинство этих клеток (при «именном» хранении) - абсо­лютная генетическая идентичность тканям ребенка, из пуповинной крови которого они были получены, и частичная - в отношении организма матери и близких родственников. В этом случае современные клеточные технологии и прежде всего - использование стволовых клеток пуповин­ной крови можно считать естественной формой «биологического» меди­цинского страхования жизни и здоровья человека и членов его семьи.

Кроме того, замороженные стволовые клетки могут оказаться неза­менимой основой для новейших, пока неизвестных способов лечения многих заболеваний. Однажды полученные клетки могут храниться деся­тилетиями, и в случае необходимости их останется только извлечь из криогенного хранилища и разморозить, без потери времени на поиск (не всегда успешный) совместимого донора. Так что временной фактор здесь является еще одним преимуществом.

- Владимир Иванович, во всем мире клеточные технологии уже достаточно давно являются сферой научных и практичес­ких интересов. А какова степень исследованности проблемы стволовых клеток в российской науке?Какие научные центры занимаются этой проблемой?

В нашей стране изучением стволовых клеток занимаются многие НИИ, в том числе в Гематологическом научном центре академика А.И.Воробьева. Там очень сильная команда в отделении трансплантации костного мозга, которая занимается и прикладным аспектом стволовых клеток, фактически спасая людей.

Наш Центр акушерства, гинекологии и перинатологии является ро­доначальником клеточной терапии в российской медицине: еще в 80-90-е годы XXвека по заданию Минздрава мы разрабатывали эту проблему и получили хороший эффект, исследуя эмбриональные клетки, то есть клетки, забираемые у эмбриона после аборта. Сейчас идут активные ре­зультативные исследования стволовых клеток пуповинной крови.

- В вашем Центре создан один из первых российских банков стволовых клеток пуповинной крови. Что способствовало его созданию?

Дело в том, что этой деятельностью в мире занимаются уже более 15 лет. По данным зарубежных медиков, трансплантацию стволовых клеток пуповинной крови там используют достаточно широко для лече­ния около 100 заболеваний. У нас в России еще нет такого большого опыта, мы начинаем его создавать и накапливать. При создании нашего банка был учтен опыт аналогичных учреждений, существующих в США, Англии и Германии.

- Созданный вами «КриоЦентр» - это целиком коммер­ческая структура?

Да, сейчас на нашей базе создан первый в России коммерческий банк стволовых клеток, мы его организовали на средства спонсоров. В скором вре­мени планируется создание еще двух банков - в Москве и Петербурге. Но в дальнейшем мы предполагаем создание аналогичного государственного банка, как на Западе, где государство дает деньги на забор и хранение стволовых клеток, а если у кого-то возникла необходимость использовать их для лечения, в частности при злокачест­венных новообразованиях, то больница заказывает эту пуповинную кровь в банке: ее подбирают так же, как подбирают донорские сердце или печень. За это больница платит банку и получает нужный образец.

- Чем регламентирована деятельность «КриоЦентра»?

Все процедуры и процессы по забору и хранению пуповинной крови регламентированы Минздравом, а также соответствуют международным стандартам таких организаций, как Международная Ассоциация стволовых клеток и Международная Ас­социация клеточной терапии. Это организации, ко­торые существуют уже порядка 10 лет и выдают практически все регламентирующие документы, ка­сающиеся работы со стволовыми клетками.

- От каких болезней страхуют челове­ка и во многом - его семью стволовые клетки?

Эти клетки могут быть использованы при лечении большого количества как наследствен­ных, так и приобретенных заболеваний. Напри­мер, при серьезных заболеваниях крови они необ­ходимы для замены кроветворной ткани пациента. Они могут быть применены для лечения острых и хронических заболеваний сердечно-сосудистой, эндокринной, центральной нервной системы (ин­фаркт миокарда, инсульт, сахарный диабет), при генетических нарушениях, злокачественных обра­зованиях, болезнях опорно-двигательного аппа­рата, при тяжелых травмах. Причем возможно, что в недалеком будущем, с развитием новых клеточных технологий, сфера применения стволовых клеток может очень расшириться.

- А за этот срок работы со стволовыми клетками уже вы­явлены негативные тенденции при их использовании для лече­ния?

Пока мы не сталкивались с этим, видели только положительный результат, исследования продолжаются. Некоторые ученые говорят, что может пойти не та дифференциация трансплантируемой стволовой клет­ки в организме: стволовая клетка дифференцируется на 200 видов кле­ток, которые существуют в нашем организме. Это и костные, и сердеч­ные, и нервные, и мышечные, и все другие. Эта клетка настолько уни­кальна, что позволяет сформировать из себя все что угодно. Наша зада­ча - добиться того, чтобы давать этим стволовым клеткам определен­ный импульс, который бы позволял дифференцироваться в ту ткань, ко­торую мы хотим. Пока мы это не можем, пока мы их только вводим в ор­ганизм, и организм сам дает импульс для дифференциации. Если, напри­мер, случился инсульт, то мы вводим клетки в область мозга, где и прои­зошло кровоизлияние, и уже там эти клетки начинают преобразовывать­ся в нервные клетки. Если случился инфаркт, то мы вводим их или внут­ривенно, или непосредственно в сердце - они начинают формировать­ся и заменять кардиомиоциты 3 .

- А что вы можете сказать об исследовании эмбриональ­ных клеток, которые тоже относят к стволовым?

Эмбриональные клетки - это благодатный объект для науки, их потенциал огромен. Но вопрос их применения сегодня даже не стоит. И дело здесь даже не столько в морально-этическом аспекте, связанном с использованием абортивного материала, о котором много говорят, особенно на Западе. Дело в том, что ме­ханизм их дифференциации еще четко не выявлен, по­этому сначала их надо хорошо изучить, а потом думать о применении: эмбриональными клетками занимаются очень серьезно, но использовать их можно будет, может быть, через 30-40 лет, когда научатся ими управлять, а эта проблема настолько же глобальна, как и пробле­ма роста раковых клеток. В принципе, механизмы функ­ционирования у них практически одинаковы.

- Давайте вернемся к вопросу об использо­вании замороженных стволовых клеток други­ми членами семьи. Какова вероятность того, что хранящиеся в банке стволовые клетки мо­гут им пригодиться?

Высокий шанс оказаться иммунологически совместимыми есть у кровных родственников, т.е. у матери, братьев, сестер ребенка, чьи клетки хранятся в банке стволовых клеток. Тогда ребенок выступает донором 4 , а иммунологически совместимые с ним родственни­ки - реципиентами 5 . Наибольшие шансы оказаться совместимыми имеют близнецы и дети одних многодетных родителей.

- Эта вероятность имеет статистическое подтвержде­ние?

Статистически она относительно невысока: в случае злокачест­венных заболеваний - от 1 случая на 500 человек до 1 на 5000.

- На чем основана совместимость клеток донора и реципи­ента? Что может произойти, если стволовые клетки не по­дойдут пациенту?

Успех трансплантации определяется точностью подбора совмес­тимой пары «донор-реципиент» по определенным антигенам (белкам) так называемого комплекса гистосовместимости, т.е. свойством органа, ткани или клеток донора не отторгаться организмом реципиента. Преж­де чем производить трансплантацию, нужно провести так называемое HLA-типирование - по нему определяется степень совместимости. В идеальном варианте - это 6 совпадений из 6 возможных (3 гена ребе­нок наследует от матери, 3 - от отца). Если несовпадений - больше трех, то трансплантация не будет успешной ни при каких условиях. Либо трансплантат будет отторгнут иммунной системой реципиента, либо, что еще хуже, разовьется болезнь «трансплантант против хозяина» 6 .

- На Западе активно обсуждается возникшая в связи с развитием новых клеточных технологий проблема - выращи­вание детей «по заказу», т.е. когда в семье есть больной ребе­нок, родители рожают другого, чтобы использовать стволо­вые клетки для лечения больного. Как вы можете прокоммен­тировать эту проблему?

Это пока единичные случаи. Но они оправданы. Потому что в пер­вый раз, когда мать рожала, не было возможности сохранить клетки, а теперь ее ребенку нужна помощь.

- Итак, давайте теперь обратимся к насущному вопросу о том, когда и как именно происходит забор и хранение стволо­вых клеток из пуповины?

Процедура забора пуповинной крови занимает всего несколько минут и абсолютно безопасна как для матери, так и для ребенка. Она никак не влияет на течение родов и может проводиться как в ходе нормальных родов, так и при кесаревом сечении.

Происходит это так: рождается ребенок, пересекается пу­повина, и пуповинная кровь собирается специально обученным персоналом родового отделения в стерильный контейнер, со­держащий раствор антикоагулянта 3 . Далее собранная пупо­винная кровь незамедлительно доставляется в специализиро­ванную лабораторию, где из нее выделяются стволовые клет­ки. С момента получения пуповинной крови до начала выделе­ния стволовых клеток может пройти не более 12-24 часов (при условии правильного хранения). В последующие 24 часа количество жизнеспособных стволовых клеток значительно уменьшается.

- Какая доза крови берется?

Все, что удается собрать при родах, - это от 40 до 150 мл. Средний объем пуповинной крови, который удается собрать, - примерно 80-85 мл. Бывает и больше: 120, 130, 140 мл. Это уже за­висит от особенностей мамы, от срока беременности, от веса ребенка - такие чисто биологические параметры. Чем больше крови, тем больше клеток будет выделено, соответственно, трансплантация может быть вы­полнена более результативно. Дело в том, что трансплантация проводит­ся из расчета числа клеток к весу пациента. Соответственно, чем боль­ше клеток мы сохраним, тем старше будет возраст и больше вес паци­ента, которому они могут быть успешно трансплантированы. Если мы собрали 100-120 мл, то этих клеток заведомо достаточно для тран­сплантации взрослому.

- Можно ли оговорить с роженицей, что представитель «КриоЦентра» выедет с контейнером в выбранный ею роддом?

Заготовка пуповинной крови происходит пока только в родовом отделении Научного центра акушерства, гинекологии и перинатологии РАМН, но в ближайшее время с нашим банком будет сотрудничать еще несколько родильных домов. На первых порах мы готовы направлять для забора крови наших обученных сотрудников, но лучше, если это будут уметь делать акушеры и медсестры на местах.

- Где и как происходит выделение из пуповинной крови стволовых клеток? Зачем их выделять и почему просто нельзя хранить собранную кровь?

Дело в том, что содержание стволовых клеток в пуповинной крови относительно невелико - менее 1% от всех лейкоцитов. Эрит­роциты и прочие элементы крови являются ненужным балластом. В процессе выделения стволовых клеток кровь подвергается поэтапной обработке, в результате чего происходит освобождение от избытка плазмы, практически всех эритроцитов и большинства зрелых лейко­цитов. Выделенные стволовые клетки находятся в аутологичной 8 плазме, так что нет никаких чужеродных для человеческого организма компонентов. Данный способ является дорогим, но наиболее эффек­тивным.

Выделение стволовых клеток и их анализ проводятся с применени­ем только одноразовых расходных материалов, в специальном «чис­том» помещении, оснащенном подачей стерильного воздуха. Это единственное место, где образец крови контактирует с внешней сре­дой. Во всех остальных случаях он находится в герметично закрытой посуде. В лабораториях соблюдены все так называемые технические условия международного стандарта GMP.

- Какие делаются анализы?

Во-первых, определяется количество клеток (мы их считаем буквально поштучно); во-вторых, - группа крови, резус-фактор новорожденного, даже если это было сделано в родблоке - мы повто­ряем, чтобы не было ошибок. Здесь же происходит определение жиз­неспособности клеток перед замораживанием (мы должны убедиться, что после выделения они все живые), а также проверка на стериль­ность в плане бактериальной и грибковой инфекции. Ни один образец стволовых клеток не будет направлен на хранение вместе с остальны­ми, не будучи признанным «чистым» в отношении опасных инфекций. Время, необходимое для получения результатов тестирования, образ­цы стволовых клеток проводят на «карантинном» хранении, исклю­чающем контакт с другими пробами.

- Какова технология хранения выделенных клеток?

Стволовые клетки расфасованы в несколько ампул - в случае необходимости это позволит использовать нужное на данный момент количество клеток, а оставшиеся сохранить для будущих нужд, учи­тывая быстрое развитие новых клеточных технологий. Каждая ампу­ла с клетками помещается в герметично запаянный пластиковый пе­нал, обеспечивающий дополнительную защиту содержимого и марки­ровки. Вместе с основными хранятся маленькие ампулы-спутники, которые в случае необходимости извлекаются перед началом тран­сплантации; и по ним проверяются все нужные параметры. Клетки замораживаются в специальных установках - программных замораживателях, куда порционно подается жидкий азот и где температура плавно понижается с комнатной до -90 °С, по специальной програм­ме без колебания температуры. После этого их уже можно перекла­дывать в жидкий азот. Замораживатель параллельно рисует график снижения температуры, что является еще одним подтверждением правильности этой процедуры. Этот график впоследствии хранится в папке со всеми данными, характеризующими образец клеток. И потом клетки хранятся в сейфе-хранилище в жидком азоте при темпе­ратуре -196 °С - именно при такой температуре они сохраняют жиз­неспособность и биологическую активность на протяжении неограни­ченного времени.

- Сколько лет хранятся клетки?

Практически неограниченное время. Наш договор рассчитан на 15 лет - это срок, определенный большинством существующих в мире банков стволовых клеток, но при желании его можно продле­вать.

- Как отреагирует хранилище клеток на внезапное отк­лючение электроэнергии, разного рода аварии и техногенные катастрофы?

Чтобы построить такое помещение в нашем Центре, было затрачено очень много средств. Это сейф из металла, и если везде будет бушевать пожар, по техническим требованиям сейф и распо­ложенное в нем современное оборудование выдержат его в течение нескольких часов, образцам ничего не угрожает. При отключении электричества он автономно будет хранить образцы крови, так как здесь стоит электрогенератор.

- Проходит ли беременная женщина, решившая сохра­нить пуповинную кровь своего ребенка, какие-то обследования и зачем?

Если кровь ма­тери инфицирована, то она может инфициро­вать пуповинную кровь, поэтому при­мерно за 30 дней до предполагаемого вре­мени родов или непос­редственно перед ро­дами кровь матери должна быть дополнительно обследована на наличие возбудителей вирусных и бактериаль­ных инфекций, опасных для здоровья: ВИЧ, гепатитов, цитомегаловируса, токсоплазмоза, сифилиса, вируса Т-клеточного лейкоза челове­ка. Если анализы отрицательные, считается, что за месяц до родов мать уже практически не может инфицироваться СПИДом, гепати­том, но полученную во время родов пуповинную кровь мы проверяем, анализы повторяем, и, пока мы не убедимся в их чистоте, клетки у нас стоят на карантине.

- В каких случаях пуповинная кровь не может быть ис­пользована для трансплантации?

Есть абсолютные и относительные противопоказания. Абсо­лютными противопоказаниями являются: положительные результаты тестирования в отношении хотя бы одного из перечисленных заболе­ваний у матери; бактериальное или грибковое инфицирование пуповинной крови или выделенных стволовых клеток.

Относительные: низкое содержание стволовых клеток ввиду малого объема полученной пуповинной крови или её индивидуальных осо­бенностей.

- Во сколько обойдется процедура забора крови и ее хранение, а также предварительные анализы матери и тестирование полученного клеточного материала?

В формировании цены есть несколько составляющих: административные расходы (пакет документов, индивидуальный набор для забора пуповинной крови, получение пуповин­ной крови и т.п.), лабораторные анализы крови матери и пуповинной крови, выделение и хра­нение стволовых клеток, включая тесты и за­мораживание, всего получается 2350 евро. Хранение клеток в течение каждого последую­щего года - еще 100 евро. Если пуповинная кровь оказывается инфицированной и непри­годной для дальнейшего использования, удер­живается стоимость медицинских препаратов, и оговоренная сумма возвращается пациенту. Но все равно стоимость затрат на выделение и хранение аутологичных стволовых клеток из пуповинной крови в десятки раз меньше, чем поиск и приобретение аналогичных, но донорс­ких (аллогенных) - стоимость одного образца пуповинной крови, предоставляемого между­народными банками-регистрами для тран­сплантации, - от 18 000 до 25 000 долларов.

С Владимиром Кулаковым беседовала Ольга Молдавская.

1 Иммуногенность - способность вызывать некоторые осложнения, в т. ч. болезнь «трансплантат против хозяина»,

2 Алогенные - органы, ткани или клетки, происходящие из организма, отличного от организма пациента.

3 Кардиомиоциты - клетки сердечной мышцы, за счет которых сердце сокраща­ется.

4 Донор - пациент, предоставляющий свои органы, ткани или клетки для тран­сплантации.

5 Реципиент - пациент, которому производится трансплантация.

6 Болезнь «трансплантат против хозяина» - это тяжелое, иногда несовместимое с жизнью заболевание, являющееся осложнением трансплантации. Связано с имму­нологической несовместимостью тканей донора и реципиента. Клетки иммунной системы, образовавшиеся из трансплантированных стволовых клеток донора, восп­ринимают ослабленный организм реципиента в качестве «чужака» и начинают с ним бороться.