Τι σημαίνει ανάλυση αχάτη HIV 1 2. Σύγχρονες μέθοδοι διάγνωσης της HIV λοίμωξης. Χαρακτηριστικά και αρχή λειτουργίας του σετ

Έγκαιρη διάγνωσηΗ HIV λοίμωξη γίνεται ένα εξαιρετικά σημαντικό μέτρο, καθώς η έγκαιρη έναρξη της θεραπείας μπορεί να καθορίσει σε μεγάλο βαθμό την περαιτέρω εξέλιξη της νόσου και να παρατείνει τη ζωή του ασθενούς. Τα τελευταία χρόνια έχει σημειωθεί σημαντική πρόοδος στον εντοπισμό αυτού τρομερή αρρώστια: Τα παλιά συστήματα δοκιμών αντικαθίστανται από πιο προηγμένα, οι μέθοδοι εξέτασης γίνονται πιο προσιτές και η ακρίβειά τους αυξάνεται σημαντικά.

Σε αυτό το άρθρο θα μιλήσουμε για σύγχρονες μεθόδους διάγνωσης της λοίμωξης HIV, η γνώση των οποίων είναι χρήσιμη έγκαιρη θεραπείααυτό το πρόβλημα και τη διατήρηση της φυσιολογικής ποιότητας ζωής του ασθενούς.

Διαγνωστικές μέθοδοι HIV

Στη Ρωσία, πραγματοποιείται μια τυπική διαδικασία για τη διάγνωση της λοίμωξης HIV, η οποία περιλαμβάνει δύο επίπεδα:

• ELISA σύστημα δοκιμής(ανάλυση προσυμπτωματικού ελέγχου)
• ανοσοστύπωμα (IB).

Άλλες μέθοδοι μπορούν επίσης να χρησιμοποιηθούν για τη διάγνωση:

• γρήγορες δοκιμές.

Συστήματα δοκιμών ELISA

Στο πρώτο στάδιο της διάγνωσης, χρησιμοποιείται ένα τεστ προσυμπτωματικού ελέγχου (ELISA) για την ανίχνευση της λοίμωξης HIV, το οποίο βασίζεται σε πρωτεΐνες HIV που δημιουργούνται σε εργαστήρια και συλλαμβάνουν συγκεκριμένα αντισώματα που παράγονται στο σώμα ως απόκριση στη μόλυνση. Μετά την αλληλεπίδρασή τους με τα αντιδραστήρια (ένζυμα) του συστήματος δοκιμής, το χρώμα του δείκτη αλλάζει. Στη συνέχεια, αυτές οι αλλαγές χρώματος υποβάλλονται σε επεξεργασία χρησιμοποιώντας ειδικό εξοπλισμό, ο οποίος καθορίζει το αποτέλεσμα της ανάλυσης που πραγματοποιείται.

Τέτοιες δοκιμές ELISA μπορούν να δείξουν αποτελέσματα εντός λίγων εβδομάδων μετά την εισαγωγή της λοίμωξης HIV. Αυτή η εξέταση δεν προσδιορίζει την παρουσία του ιού, αλλά ανιχνεύει την παραγωγή αντισωμάτων σε αυτόν. Μερικές φορές, στο ανθρώπινο σώμα, η παραγωγή αντισωμάτων κατά του HIV ξεκινά μετά από 2 εβδομάδες μετά τη μόλυνση, αλλά στους περισσότερους ανθρώπους παράγονται σε μεταγενέστερη ημερομηνία, μετά από 3-6 εβδομάδες.

Υπάρχουν τέσσερις γενιές δοκιμών ELISA με διαφορετικές ευαισθησίες. Τα τελευταία χρόνια χρησιμοποιούνται όλο και περισσότερο συστήματα δοκιμής τρίτης και τέταρτης γενιάς, τα οποία βασίζονται σε συνθετικά πεπτίδια ή ανασυνδυασμένες πρωτεΐνες και έχουν μεγαλύτερη ειδικότητα και ακρίβεια. Μπορούν να χρησιμοποιηθούν για τη διάγνωση της λοίμωξης από τον ιό HIV, την παρακολούθηση του επιπολασμού του HIV και τη διασφάλιση της ασφάλειας κατά τον έλεγχο δωρεών αίματος. Η ακρίβεια των συστημάτων δοκιμών ELISA της γενιάς III και IV είναι 93-99% (τα τεστ που παράγονται στη Δυτική Ευρώπη είναι πιο ευαίσθητα - 99%).

Για να πραγματοποιηθεί μια εξέταση ELISA, λαμβάνονται 5 ml αίματος από τη φλέβα του ασθενούς. Πρέπει να περάσουν τουλάχιστον 8 ώρες μεταξύ του τελευταίου γεύματος και της ανάλυσης (συνήθως πραγματοποιείται το πρωί με άδειο στομάχι). Συνιστάται να κάνετε μια τέτοια εξέταση όχι νωρίτερα από 3 εβδομάδες μετά την ύποπτη μόλυνση (για παράδειγμα, μετά από σεξουαλική επαφή χωρίς προστασία με νέο σεξουαλικό σύντροφο).

Τα αποτελέσματα της δοκιμής ELISA λαμβάνονται σε 2-10 ημέρες:

• αρνητικό αποτέλεσμα: υποδηλώνει απουσία μόλυνσης από τον ιό HIV και δεν απαιτεί επικοινωνία με ειδικό.
• ψευδώς αρνητικό αποτέλεσμα: μπορεί να παρατηρηθεί στις πρώιμα στάδιαμόλυνση (έως 3 εβδομάδες), σε τελευταία στάδια του AIDS με σοβαρή ανοσοκαταστολή και ακατάλληλη προετοιμασία του αίματος.
• ψευδώς θετικό αποτέλεσμα: μπορεί να παρατηρηθεί σε ορισμένες ασθένειες και σε περίπτωση ακατάλληλης προετοιμασίας αίματος.
• θετικό αποτέλεσμα: υποδηλώνει μόλυνση HIV λοίμωξη, απαιτεί τη διενέργεια IB και ο ασθενής να επικοινωνήσει με έναν ειδικό στο κέντρο του AIDS.

Γιατί μπορεί ένα τεστ ELISA να δώσει ψευδώς θετικά αποτελέσματα;

Ψευδώς θετικά αποτελέσματα του τεστ HIV ELISA μπορεί να προκύψουν όταν ακατάλληλη επεξεργασίααίματος ή σε ασθενείς με τις ακόλουθες καταστάσεις και ασθένειες:

• πολλαπλό μυέλωμα?
• μολυσματικές ασθένειες που προκαλούνται από τον ιό Epstein-Barr.
• κατάσταση μετά ;
• αυτοάνοσα νοσήματα?
• στο πλαίσιο της εγκυμοσύνης.
• κατάσταση μετά τον εμβολιασμό.

Για τους λόγους που περιγράφονται παραπάνω, μπορεί να υπάρχουν στο αίμα μη ειδικά αντισώματα διασταυρούμενης αντίδρασης, η παραγωγή των οποίων δεν προκλήθηκε από λοίμωξη HIV.

Τα τελευταία χρόνια, η συχνότητα των ψευδώς θετικών αποτελεσμάτων έχει μειωθεί σημαντικά λόγω της χρήσης συστημάτων δοκιμής γενιάς III και IV, τα οποία περιέχουν πιο ευαίσθητα πεπτίδια και ανασυνδυασμένες πρωτεΐνες (συντίθενται με τη χρήση γενετική μηχανική in vitro). Μετά την εισαγωγή τέτοιων δοκιμών ELISA, η συχνότητα των ψευδώς θετικών αποτελεσμάτων μειώθηκε σημαντικά και είναι περίπου 0,02-0,5%.

Η ανίχνευση είναι ψευδής θετικό αποτέλεσμαδεν σημαίνει ότι ένα άτομο έχει μολυνθεί από τον ιό HIV. Σε τέτοιες περιπτώσεις, ο ΠΟΥ συνιστά τη διεξαγωγή άλλης εξέτασης ELISA (απαραίτητα IV γενιά).

Το αίμα του ασθενούς αποστέλλεται σε εργαστήριο αναφοράς ή διαιτησίας με την ένδειξη «repeat» και ελέγχεται χρησιμοποιώντας ένα σύστημα δοκιμής ELISA IV γενιάς. Εάν το αποτέλεσμα της νέας ανάλυσης είναι αρνητικό, τότε το πρώτο αποτέλεσμα θεωρείται λανθασμένο (ψευδώς θετικό) και το IS δεν πραγματοποιείται. Εάν το αποτέλεσμα είναι θετικό ή αμφισβητήσιμο κατά τη διάρκεια της δεύτερης εξέτασης, ο ασθενής πρέπει να υποβληθεί σε IB μετά από 4-6 εβδομάδες για να επιβεβαιώσει ή να αντικρούσει τη μόλυνση από τον HIV.

Immune blotting

Η οριστική διάγνωση της HIV λοίμωξης μπορεί να γίνει μόνο αφού ληφθεί ένα θετικό αποτέλεσμα ανοσοστύπωσης (IB). Για τη διεξαγωγή του, χρησιμοποιείται μια λωρίδα νιτροκυτταρίνης, στην οποία εφαρμόζονται ιικές πρωτεΐνες.

Η αιμοληψία για IB πραγματοποιείται από φλέβα. Στη συνέχεια, υποβάλλεται σε ειδική επεξεργασία και οι πρωτεΐνες που περιέχονται στον ορό του διαχωρίζονται σε ειδικό τζελ ανάλογα με τη φόρτισή τους και μοριακό βάρος(ο χειρισμός πραγματοποιείται με τη χρήση ειδικού εξοπλισμού υπό την επίδραση ηλεκτρικού πεδίου). Μια λωρίδα νιτροκυτταρίνης εφαρμόζεται στο πήκτωμα ορού αίματος και η στύπωση («blotting») πραγματοποιείται σε ειδικό θάλαμο. Η λωρίδα υποβάλλεται σε επεξεργασία και εάν τα υλικά που χρησιμοποιούνται περιέχουν αντισώματα κατά του HIV, συνδέονται με τις αντιγονικές ζώνες στο IB και εμφανίζονται ως γραμμές.

Το IB θεωρείται θετικό εάν:

• σύμφωνα με τα αμερικανικά κριτήρια CDC - υπάρχουν δύο ή τρεις γραμμές gp41, p24, gp120/gp160 στην ταινία.
• Σύμφωνα με τα αμερικανικά κριτήρια FDA, η ταινία έχει δύο γραμμές p24, p31 και μια γραμμή gp41 ή gp120/gp160.

Στο 99,9% των περιπτώσεων, ένα θετικό αποτέλεσμα ΙΒ υποδηλώνει μόλυνση από τον ιό HIV.

Εάν δεν υπάρχουν γραμμές, το IB είναι αρνητικό.

Κατά την αναγνώριση γραμμών με gr160, gr120 και gr41, το IB είναι αμφίβολο. Αυτό το αποτέλεσμα μπορεί να προκύψει όταν:

• ογκολογικές ασθένειες?
• εγκυμοσύνη;
• συχνές μεταγγίσεις αίματος.

Σε τέτοιες περιπτώσεις, συνιστάται η επανάληψη της μελέτης χρησιμοποιώντας κιτ από άλλη εταιρεία. Εάν μετά από επιπλέον IB το αποτέλεσμα παραμένει αμφίβολο, τότε η παρατήρηση είναι απαραίτητη για έξι μήνες (το IB πραγματοποιείται κάθε 3 μήνες).

Αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης

Μια εξέταση PCR μπορεί να ανιχνεύσει το RNA του ιού. Η ευαισθησία του είναι αρκετά υψηλή και επιτρέπει την ανίχνευση μόλυνσης από τον ιό HIV εντός 10 ημερών μετά τη μόλυνση. Σε ορισμένες περιπτώσεις, η PCR μπορεί να δώσει ψευδώς θετικά αποτελέσματα, καθώς η υψηλή ευαισθησία της μπορεί επίσης να ανταποκρίνεται σε αντισώματα σε άλλες λοιμώξεις.

Αυτή η διαγνωστική τεχνική είναι ακριβή και απαιτεί ειδικό εξοπλισμόκαι υψηλά καταρτισμένους ειδικούς. Αυτοί οι λόγοι δεν καθιστούν δυνατή τη διεξαγωγή μαζικών δοκιμών του πληθυσμού.

Η PCR χρησιμοποιείται στις ακόλουθες περιπτώσεις:

• για την ανίχνευση του HIV σε νεογέννητα που γεννήθηκαν από μητέρες μολυσμένες με HIV·
• για την ανίχνευση του HIV στην «περίοδο του παραθύρου» ή σε περίπτωση αμφίβολης IB·
• για τον έλεγχο της συγκέντρωσης του HIV στο αίμα.
• για τη μελέτη του αίματος του δότη.

Το τεστ PCR από μόνο του δεν θέτει τη διάγνωση του HIV, αλλά πραγματοποιείται ως πρόσθετη διαγνωστική μέθοδος για την επίλυση αμφιλεγόμενων καταστάσεων.

Μέθοδοι εξπρές

Μία από τις καινοτομίες στη διάγνωση του HIV είναι οι ταχείες εξετάσεις, τα αποτελέσματα των οποίων μπορούν να αξιολογηθούν μέσα σε 10-15 λεπτά. Τα πιο αποτελεσματικά και ακριβή αποτελέσματα λαμβάνονται με τη χρήση ανοσοχρωματογραφικών δοκιμών που βασίζονται στην αρχή της τριχοειδούς ροής. Είναι ειδικές ταινίες στις οποίες εφαρμόζεται αίμα ή άλλα υγρά εξέτασης (σάλιο, ούρα). Εάν υπάρχουν αντισώματα κατά του HIV, μετά από 10-15 λεπτά εμφανίζεται μια έγχρωμη και λωρίδα ελέγχου στη δοκιμή - ένα θετικό αποτέλεσμα. Εάν το αποτέλεσμα είναι αρνητικό, εμφανίζεται μόνο η ταινία ελέγχου.

Όπως και με τις δοκιμές ELISA, τα αποτελέσματα των ταχέων δοκιμών πρέπει να επιβεβαιώνονται με ανάλυση IB. Μόνο μετά από αυτό μπορεί να γίνει διάγνωση μόλυνσης από τον ιό HIV.

Υπάρχουν διαθέσιμα κιτ ταχείας δοκιμής στο σπίτι. Το τεστ OraSure Technologies1 (ΗΠΑ) είναι εγκεκριμένο από τον FDA, διατίθεται χωρίς ιατρική συνταγή και μπορεί να χρησιμοποιηθεί για την ανίχνευση του HIV. Μετά την εξέταση, εάν το αποτέλεσμα είναι θετικό, συνιστάται στον ασθενή να υποβληθεί σε εξέταση σε εξειδικευμένο κέντρο για επιβεβαίωση της διάγνωσης.

Άλλες εξετάσεις για οικιακή χρήσηδεν έχουν ακόμη εγκριθεί από τον FDA και τα αποτελέσματά τους μπορεί να είναι πολύ αμφισβητήσιμα.

Παρά το γεγονός ότι οι ταχείες δοκιμές είναι κατώτερες σε ακρίβεια από τις δοκιμές ELISA IV γενιάς, χρησιμοποιούνται ευρέως για πρόσθετες δοκιμές του πληθυσμού.

Μπορείτε να κάνετε εξετάσεις για την ανίχνευση μόλυνσης από τον ιό HIV σε οποιαδήποτε κλινική, κεντρικό περιφερειακό νοσοκομείο ή εξειδικευμένα κέντρα AIDS. Στο έδαφος της Ρωσίας πραγματοποιούνται απολύτως εμπιστευτικά ή ανώνυμα. Κάθε ασθενής μπορεί να αναμένει να λάβει ιατρική ή ψυχολογική συμβουλή πριν ή μετά την εξέταση. Θα πρέπει να πληρώσετε μόνο για τεστ HIV σε εμπορική χρήση ιατρικά ιδρύματα, και σε δημόσια ιατρεία και νοσοκομεία πραγματοποιούνται δωρεάν.

Διαβάστε σχετικά με τους τρόπους με τους οποίους μπορείτε να μολυνθείτε από τον ιό HIV και ποιοι μύθοι υπάρχουν σχετικά με τις πιθανότητες να μολυνθείτε.

1 Σκοπός κλήσης

1.1 Το κιτ προορίζεται για την ταυτόχρονη ανίχνευση αντισωμάτων στους ιούς της ανθρώπινης ανοσοανεπάρκειας τύπους 1 και 2 (HIV-1 και HIV-2) και του αντιγόνου HIV-1 p24 στον ανθρώπινο ορό και στο πλάσμα αίματος "in vitro" με τη μέθοδο του έμμεσου ενζύμου -συνδεδεμένη ανοσοπροσροφητική δοκιμασία.

2 Χαρακτηριστικά και αρχή λειτουργίας του σετ

2.1 Σετ περιεχομένων:

Όνομα στοιχείου	Ποσότητα
Ανοσορροφητικό	2 ταμπλέτες
Δείγμα θετικού ελέγχου ΑΤ (K + AT)	1 φιάλη, 3 ml
Θετικό δείγμα ελέγχου AG (K + AG)	3 μπουκάλια, λυοφιλοποιημένο σκεύασμα
Αρνητικό δείγμα ελέγχου (ΠΡΟΣ -)	2 μπουκάλια των 3 ml
Συζυγές διάλυμα Νο. 1 (RK-1)	1 φιάλη, 12 ml
Σύζευγμα Νο 2 (Kg-2)	1 φιάλη, 1 ml
Διάλυμα αραίωσης συζυγούς Νο. 2 (RR-K2)	2 μπουκάλια των 18 ml
Ρυθμιστικό διάλυμα για υπόστρωμα ( BRS)	2 μπουκάλια των 18 ml
Χρωμογόνο TMB	1 φιάλη, 1 ml
Φωσφορικό Ρυθμιστικό Αλατούχο Συμπύκνωμα με Tween (FSB-T×25)	2 μπουκάλια των 50 ml
Σταματήστε το αντιδραστήριο	1 φιάλη, 12 ml
Σετ λουτρού αντιδραστηρίου με μύτες πιπέτας πολλαπλών καναλιών	1 σετ
Αυτοκόλλητη μεμβράνη

2.2 Τα κύρια συστατικά του κιτ "ELISA-HIV 1,2 AGAT" είναι το ανοσορροφητικό, συζυγές διάλυμα Νο. 1 και το συζυγές Νο. 2.

Ανοσοροφητικόείναι μια πλάκα πολυστυρενίου στα φρεάτια της οποίας προσροφάται ένα μίγμα ανασυνδυασμένων αντιγόνων HIV-1 (gp41) και HIV-2 (gp36) και μονοκλωνικών αντισωμάτων στο αντιγόνο HIV-1 p24.

Συζυγές διάλυμα Νο. 1είναι ένα μείγμα σημασμένων με βιοτίνη ανθρώπινων μονοκλωνικών αντισωμάτων έναντι του αντιγόνου HIV-1 p24 και σημασμένων με βιοτίνη ανασυνδυασμένων πρωτεϊνών HIV-1 και HIV-2.

Σύζευγμα Νο 2είναι στρεπταβιδίνη συζευγμένη με υπεροξειδάση χρένου.

Δείγμα θετικού ελέγχου ΑΤ– ορός ανθρώπινου αίματος που περιέχει αντισώματα κατά του HIV-1 και του HIV-2, που δεν περιέχει αντισώματα κατά του ιού της ηπατίτιδας C και του Treponema pallidum, αντιγόνο HIV-1 p24 και αντιγόνο HBs, αδρανοποιημένο με θέρμανση για 3 ώρες σε θερμοκρασία 56 ºC.

Θετικό δείγμα ελέγχου AG– ορός ανθρώπινου αίματος που περιέχει το εγγενές αντιγόνο HIV-1 p24, που δεν περιέχει αντισώματα κατά του HIV-1, του HIV-2, του ιού της ηπατίτιδας C και του Treponema pallidum και του αντιγόνου HBs, αδρανοποιημένος με θέρμανση για 3 ώρες σε θερμοκρασία 56 ºC.

Αρνητικό δείγμα ελέγχου– ορός ανθρώπινου αίματος που δεν περιέχει αντισώματα έναντι του HIV-1, του HIV-2, του HCV, του αντιγόνου HIV-1 p24 και του αντιγόνου HBs, αδρανοποιημένος με θέρμανση για 3 ώρες σε θερμοκρασία 56 ºC.

Η αρχή λειτουργίας του σετ.Όταν ένα διάλυμα συζυγούς Νο. 1 και δείγματα μολυσμένου ορού αίματος προστίθενται στα φρεάτια μιας πλάκας, το αντιγόνο p24 συνδέεται τόσο με συγκεκριμένα αντισώματα στη στερεά φάση όσο και με μονοκλωνικά βιοτινυλιωμένα αντισώματα αντι-ρ24 που αποτελούν μέρος του διαλύματος σύζευγμα Νο. 1; Τα ειδικά για τον HIV αντισώματα συνδέονται τόσο με ανασυνδυασμένα αντιγόνα HIV-1 και HIV-2 που έχουν προσροφηθεί στη στερεά φάση, όσο και με αντιγόνα που περιλαμβάνονται στο συζυγές διάλυμα Νο. 1, σχηματίζοντας σύμπλοκα αντιγόνου-αντισώματος. Ανοσολογικά σύμπλοκα αντισωμάτων αντι-ρ24 και αντιγόνου ρ24 ανιχνεύονται από το συζυγές Νο. 2. Μετά την έκπλυση των μη δεσμευμένων συστατικών, ένα διάλυμα υποστρώματος υπεροξειδάσης (υπεροξείδιο του υδρογόνου) και χρωμογόνο TMB προστίθεται στα φρεάτια της πλάκας.

Η αντίδραση υπεροξειδάσης διακόπτεται με την προσθήκη ενός αντιδραστηρίου διακοπής (διάλυμα θειικού οξέος 0,9 Μ) και η ένταση χρώματος του διαλύματος στα φρεάτια μετράται σε φασματοφωτόμετρο ως τιμή οπτικής πυκνότητας (OD) σε μήκος κύματος 450 nm.

Η τιμή OD είναι ευθέως ανάλογη με τη συγκέντρωση ειδικών αντισωμάτων ή/και αντιγόνου p24 στο δείγμα ορού ή πλάσματος. Όσο υψηλότερη είναι η περιεκτικότητα σε αντίσωμα και/ή αντιγόνο p24 στο δείγμα ορού, τόσο μεγαλύτερη είναι η ένταση της χρώσης.

2.3 Το σετ έχει σχεδιαστεί για εκτέλεση 24 παραγωγές ELISA: 1 σετ – 1 λωρίδα (8 τρύπες). Σύνολο – 192 ορισμούς, συμπεριλαμβανομένων δειγμάτων ελέγχου.

3 Προφυλάξεις κατά την εργασία με το κιτ

3.1 Όλα τα συστατικά του κιτ είναι μη τοξικά στις χρησιμοποιούμενες συγκεντρώσεις. Ωστόσο, εργαστείτε με όλα τα δείγματα δοκιμής ανθρώπινου ορού αίματος (πλάσμα), τα οποία θα πρέπει να θεωρούνται ως δυνητικά μολυσμένα, ικανά να αποθηκεύουν και να μεταδίδουν τον ιό HIV, τον ιό της ηπατίτιδας Β ή οποιοδήποτε άλλο παθογόνο ιογενής λοίμωξη, με απορρίμματα διαλύματα και υγρά, διάφορος εξοπλισμός που μπορεί να μολυνθεί κατά τη διαδικασία ανάλυσης, απαιτεί ορισμένα μέτρα ασφαλείας κατά τη χρήση του κιτ:

Η εργασία πρέπει να εκτελείται σε ειδικά εξοπλισμένο δωμάτιο.

Είναι απαραίτητο να εργαστείτε χρησιμοποιώντας μέσα προσωπική προστασίακαι λαμβάνοντας προφυλάξεις σύμφωνα με τις απαιτήσεις των , και .

3.2 Το αντιδραστήριο παύσης που περιέχει θειικό οξύ είναι ερεθιστικό. Σε περίπτωση επαφής με το δέρμα και τους βλεννογόνους, ξεπλύνετε αμέσως ένας μεγάλος αριθμόςνερό.

3.3 Όταν εργάζεστε με το κιτ, οι χώροι εργασίας πρέπει να διαθέτουν εξαερισμό τροφοδοσίας και εξαγωγής.

3.4 Όλα τα άτομα που εργάζονται στο εργαστήριο με κιτ πρέπει να υποβάλλονται σε υποχρεωτική ιατρική εξέταση σύμφωνα με τις απαιτήσεις.

3.5 Απόρριψη ιατρικών απορριμμάτων και/ή αχρησιμοποίητων κιτ από έχει λήξειη εγκυρότητα πρέπει να πραγματοποιείται σύμφωνα με τις απαιτήσεις.

4 Κανόνες εργασίας με το σετ

4.1 Για την αποφυγή ψευδών αποτελεσμάτων, τα δείγματα δοκιμής πρέπει να προετοιμάζονται και να φυλάσσονται υπό συνθήκες που εμποδίζουν την ανάπτυξη βακτηρίων. Τα δείγματα ορού που περιέχουν συσσωματωμένα συστατικά ορού ή ίζημα θα πρέπει να διαυγαστούν με φυγοκέντρηση για (5-10) λεπτά στις 3000 rpm. Τα δείγματα ορού μπορούν να αποθηκευτούν σε θερμοκρασία (2-8) °C για όχι περισσότερο από 5 ημέρες. Τα κατεψυγμένα δείγματα (κατά προτίμηση σε θερμοκρασία τουλάχιστον μείον 20 °C) μπορούν να αποθηκευτούν για όχι περισσότερο από 1 έτος. Οι επαναλαμβανόμενοι κύκλοι κατάψυξης-απόψυξης των δειγμάτων θα πρέπει να αποφεύγονται.

Πρέπει να θυμόμαστε ότι δείγματα με αιμόλυση, υπερλιπιδαιμία, βακτηριακή ανάπτυξη, καθώς και εκείνα που αποθηκεύονται για μεγάλο χρονικό διάστημα χωρίς κατάψυξη δεν είναι κατάλληλα για ανάλυση.

Η αξιοπιστία των αποτελεσμάτων εξαρτάται από τους ακόλουθους κανόνες:

Δεν επιτρέπεται η χρήση του κιτ μετά την ημερομηνία λήξης, καθώς και η ανάμειξη εξαρτημάτων κιτ από διαφορετικές σειρές.

Για την παρασκευή κάθε αντιδραστηρίου πρέπει να χρησιμοποιείται ξεχωριστό δοχείο.

Μην επεξεργάζεστε όλα τα σκεύη που χρησιμοποιούνται για την παρασκευή αντιδραστηρίων με απολυμαντικά και απορρυπαντικά. Εάν είναι απαραίτητο, ξεπλύνετε με τρεχούμενο νερό και στη συνέχεια ξεπλύνετε πέντε φορές με απεσταγμένο νερό.

Για να δουλέψετε με χρωμογόνο TMB και PX, είναι απαραίτητο να χρησιμοποιείτε ξεχωριστά δοχεία για διαλύματα, άκρες πιπέτας και πιάτα.

Είναι απαραίτητο να δοθεί προσοχή στην σχολαστική ανάμειξη των αντιδραστηρίων.

Ο χρόνος μεταξύ πλήρωσης και εκκένωσης των πηγαδιών της πλάκας με διαλύματα και αντιδραστήρια πρέπει να είναι τουλάχιστον 30 δευτερόλεπτα. Η ξήρανση των φρεατίων δεν επιτρέπεται σε όλα τα στάδια της ELISA.

Όταν χρησιμοποιείτε το πλυντήριο, παρακολουθήστε την κατάσταση του δοχείου για το διάλυμα για το πλύσιμο του δισκίου και των εύκαμπτων σωλήνων σύνδεσης: δεν πρέπει να παρουσιάζουν σημάδια ανάπτυξης βακτηρίων ή μυκήτων.

Είναι απαραίτητο να χρησιμοποιηθούν αυτόματες πιπέτες με αντικαταστάσιμες μύτες, πιστοποιημένες για τη μέση δόση και τη συνέπεια των αποτελεσμάτων της πιπέτας (σφάλμα όχι περισσότερο από 3%).

Επεξεργαστείτε τους διανομείς και τις επιφάνειες εργασίας με διάλυμα που περιέχει 70% κατ' όγκο αιθυλική αλκοόλη. Μην χρησιμοποιείτε χλωραμίνη ή άλλες ουσίες που περιέχουν χλώριο.

Συνιστάται η χρήση άκρων πιπέτας μιας χρήσης για την εργασία με δείγματα δοκιμής και ελέγχου. Κάθε δείγμα ορού, καθώς και αντιδραστήρια κιτ, πρέπει να συλλέγονται με ξεχωριστό άκρο.

Όταν προσθέτετε το RK-1 στα φρεάτια, μην αγγίζετε την επιφάνεια της πλάκας και το διάλυμα στα φρεάτια με το άκρο της πιπέτας.

Κατά τη διάρκεια της ανάλυσης, θα πρέπει να αποφεύγεται η άμεση επαφή. ακτίνες του ήλιουστην επιφάνεια εργασίας.

4.2 Κατά το άνοιγμα και τη διάλυση λυοφιλοποιημένων συστατικών, είναι απαραίτητο να διασφαλίζεται ότι δεν παραμένει ξηρή ύλη στο καπάκι και στα τοιχώματα των φιαλών.

5 Εξοπλισμός και υλικά που απαιτούνται για την ανάλυση

5.1 Φασματοφωτόμετρο κάθετης σάρωσης, που επιτρέπει μετρήσεις της οπτικής πυκνότητας των διαλυμάτων στα φρεάτια μιας πλάκας σε μήκος κύματος 450 nm.

Ημιαυτόματη συσκευή για το πλύσιμο των δισκίων (πλυντήριο).

Θερμοστάτης ξηρού αέρα τύπου TS-80 M2, με διατήρηση θερμοκρασίας (37±1) °C ή παρόμοια χαρακτηριστικά.

Αυτόματες πιπέτες μονού καναλιού με αντικαταστάσιμες μύτες, που σας επιτρέπουν να αποσύρετε όγκους υγρού από 0,01 έως 5,0 ml.

Αυτόματες πιπέτες 8 καναλιών με αντικαταστάσιμες μύτες, που σας επιτρέπουν να αποσύρετε όγκους υγρού έως 0,5 ml.

Κύλινδρος μέτρησης χωρητικότητας 2000 ml.

Εργαστηριακή φιάλη χωρητικότητας 2000 ml.

Γυάλινες φιάλες χωρητικότητας 20 ml.

Δίσκοι για αντιδραστήρια ή τρυβλία Petri (διάμετρος 100 mm).

Ιατρικό υγροσκοπικό βαμβάκι.

Διηθητικό χαρτί?

Χειρουργικά γάντια από καουτσούκ.

Διάλυμα κλάσματος όγκου αιθυλικό οινόπνευμα 70 %;

Διάλυμα με κλάσμα μάζας υπεροξειδίου του υδρογόνου 6%.

Απιονισμένο ή απεσταγμένο νερό.

Δοχείο συλλογής στερεών απορριμμάτων.

Δοχείο αποστράγγισης υγρών απορριμμάτων.

6 Προετοιμασία για ανάλυση

6.1 Πριν εκτελέσετε την ανάλυση, αφαιρέστε το κιτ αντιδραστηρίων από το ψυγείο, ανοίξτε το καπάκι του κουτιού και διατηρήστε τα εξαρτήματα του κιτ σε θερμοκρασία (18-25) °C για 30 λεπτά.

Αναμίξτε όλα τα δείγματα ορού (πλάσμα) και τα αντιδραστήρια καλά πριν από τη δοκιμή.

Η κατανάλωση αντιδραστηρίων στο κιτ δοκιμής, η οποία καθορίζεται από τον αριθμό των ταινιών που χρησιμοποιούνται, δίνεται στον Πίνακα Α.1 του Παραρτήματος Α.

6.2 Παρασκευή διαλύματος για το πλύσιμο της πλάκας

Προσοχή!Προετοιμάστε το διάλυμα για το πλύσιμο της πλάκας 15 λεπτά πριν την έναρξη της ανάλυσης!

Εάν ένα μπουκάλι με FSB-T×25 περιέχει ίζημα, πρέπει να θερμανθεί πριν από τη χρήση σε θερμοκρασία (37±1) °C μέχρι να διαλυθεί πλήρως το ίζημα. Προσθέστε το περιεχόμενο της φιάλης με FSB-T×25 σε έναν δοσομετρικό κύλινδρο χωρητικότητας 2000 ml και στη συνέχεια προσθέστε απεσταγμένο νερό στην ένδειξη 1250 mlκαι ανακατεύουμε προσεκτικά το διάλυμα. Το διάλυμα μπορεί να αποθηκευτεί στους (2-8) °C για 72 ώρες.

Εάν χρησιμοποιείτε μία ή περισσότερες ταινίες, ανακινήστε δυνατά το περιεχόμενο της φιάλης με FSB-T×25 για (20-30) δευτερόλεπτα, πάρτε τον απαιτούμενο όγκο διαλύματος (Πίνακας A.1) σε ένα μεζούρα ή κύλινδρο, προσθέστε το απαιτούμενη ποσότητα απεσταγμένου νερού και αναμείξτε το διάλυμα. Το αχρησιμοποίητο FSB-T×25 μπορεί να αποθηκευτεί σε κλειστή φιάλη σε θερμοκρασία (2-8) °C κατά τη διάρκεια ζωής του κιτ.

6.3 Παρασκευή ανοσοπροσροφητικού

Το ανοσοπροσροφητικό είναι έτοιμο για χρήση.

Ανοίξτε τη συσκευασία και τοποθετήστε τον απαιτούμενο αριθμό λωρίδων στο πλαίσιο. Αποθηκεύστε τις υπόλοιπες λωρίδες σε ερμητικά κλεισμένη σακούλα με ξηραντικό σε θερμοκρασία (2-8) °C για 3 μήνες.

6.4 Παρασκευή K + AT, K –, RK-1, RR-K2, BRS και αντιδραστηρίου διακοπής

Τα K + AT, K – , RK-1, RR-K2, BRS και το αντιδραστήριο διακοπής είναι έτοιμα για χρήση.

Προσοχή!Μπορεί να σχηματιστεί υετό στη φιάλη με RK-1. Για ανάλυση πρέπει να χρησιμοποιείται υπερκείμενο υγρό.

Το μη χρησιμοποιημένο αντιδραστήριο RK-1, RR-K2, BRS και το αντιδραστήριο διακοπής μετά το άνοιγμα των φιαλιδίων μπορούν να αποθηκευτούν σε κλειστά φιαλίδια σε θερμοκρασία (2-8) °C κατά τη διάρκεια ζωής του κιτ.

Το υπόλοιπο K + AT και K - μετά το άνοιγμα του φιαλιδίου μπορεί να αποθηκευτεί σε κλειστά φιαλίδια σε θερμοκρασία (2-8) °C κατά τη διάρκεια ζωής του κιτ.

6.5 Παρασκευή διαλύματος K + AG

Προσοχή!Ετοιμάστε το διάλυμα K + AG 15 λεπτά πριν την έναρξη της ανάλυσης!

Για να αποκαταστήσετε το λυοφιλισμένο K + AG, πριν ανοίξετε τη φιάλη, χτυπήστε ελαφρά για να απομακρυνθούν τυχόν σωματίδια που προσκολλώνται στα τοιχώματα της φιάλης ή του πώματος. Ανοίξτε τη φιάλη και τοποθετήστε το πώμα ανάποδα σε στεγνή επιφάνεια. Προσθέστε 0,8 ml απεσταγμένου νερού στη φιάλη. Κλείστε τη φιάλη με πώμα, κρατήστε τη για 10 λεπτά σε θερμοκρασία (18-25) °C και γείρετε προσεκτικά και περιστρέψτε τη φιάλη, ανακατέψτε το περιεχόμενό της μέχρι να διαλυθεί τελείως, αποφεύγοντας το σχηματισμό αφρού.

Το μειωμένο K + AG μπορεί να αποθηκευτεί σε κλειστή φιάλη σε θερμοκρασία (2-8) °C για ένα μήνα, σε θερμοκρασία μείον 20 °C για έξι μήνες. Επιτρέπεται εφάπαξ κατάψυξη-απόψυξη μειωμένου K + AG.

6.6 Παρασκευή διαλύματος Kg-2 σε αραίωση εργασίας

Από τη φιάλη με Kg-2, πάρτε τον όγκο που υποδεικνύεται στον Πίνακα A.1 και μεταφέρετέ τον στη φιάλη με PP-K2. Ανακατέψτε καλά το περιεχόμενο της φιάλης, αποφεύγοντας το σχηματισμό αφρού.

Εάν χρησιμοποιείτε μία ή περισσότερες λωρίδες, πάρτε την απαιτούμενη ποσότητα PP-K2 σε ένα καθαρό μπουκάλι, προσθέστε Kg-2 σύμφωνα με τον Πίνακα A.1 και ανακατέψτε το διάλυμα, αποφεύγοντας το σχηματισμό αφρού.

Προσοχή!Το διάλυμα Kg-2 σε αραίωση εργασίας παρασκευάζεται αμέσως πριν τη χρήση! Το διάλυμα Kg-2 σε αραίωση εργασίας μπορεί να αποθηκευτεί για 15 λεπτά σε θερμοκρασία (18-25) °C. Χρησιμοποιήστε μόνο ένα νέο λουτρό αντιδραστηρίου και νέες συμβουλές!

Το υπόλοιπο Kg-2 μπορεί να αποθηκευτεί σε κλειστό φιαλίδιο σε θερμοκρασία (2-8) °C κατά τη διάρκεια ζωής του κιτ.

6.7 Παρασκευή διαλύματος υποστρώματος εργασίας

Η φιάλη με χρωμογόνο TMB πρέπει να ζεσταθεί πριν τη χρήση σε θερμοκρασία (37±1)° Μέχρι να διαλυθούν τελείως οι κρύσταλλοι.

Από τη φιάλη με χρωμογόνο TMB, πάρτε τον όγκο που υποδεικνύεται στον Πίνακα Α.1 και μεταφέρετέ τον στη φιάλη με BRS. Ανακατέψτε καλά το περιεχόμενο της φιάλης, αποφεύγοντας το σχηματισμό αφρού.

Εάν χρησιμοποιείτε μία ή περισσότερες λωρίδες, πάρτε την απαιτούμενη ποσότητα BRS σε μια καθαρή φιάλη, προσθέστε χρωμογόνο TMB σύμφωνα με τον Πίνακα Α.1 και αναμείξτε το διάλυμα, αποφεύγοντας το σχηματισμό αφρού.

Προσοχή!Το διάλυμα εργασίας του υποστρώματος παρασκευάζεται αμέσως πριν τη χρήση σε χώρο προστατευμένο από το φως! Το διάλυμα μπορεί να αποθηκευτεί για 20 λεπτά σε θερμοκρασία (18-25) °C σε μέρος προστατευμένο από το φως.

Το διάλυμα πρέπει να προστατεύεται από το φως και την επαφή με μέταλλα ή μεταλλικά ιόντα. Το διάλυμα του υποστρώματος πρέπει να είναι άχρωμο πριν από τη χρήση. Τα πιάτα που θα έρθουν σε επαφή με το διάλυμα του υποστρώματος κατά τη διάρκεια της αντίδρασης πρέπει να πλένονται χωρίς τη χρήση συνθετικών απορρυπαντικών. απορρυπαντικά. Χρησιμοποιήστε μόνο ένα νέο λουτρό αντιδραστηρίου και νέες συμβουλές!

Το υπόλοιπο του χρωμογόνου TMB μπορεί να αποθηκευτεί σε κλειστό φιαλίδιο στους (2-8) °C μέχρι την ημερομηνία λήξης του κιτ.

7 Απαιτήσεις για το πλύσιμο της πλάκας

Σε όλα τα στάδια της πλύσης είναι απαραίτητο να ελέγχεται η πλήρωση όλων των φρεατίων και πλήρης αφαίρεση(αναρρόφηση) υγρού από αυτά.

Κατά τη διάρκεια κάθε πλύσης, είναι απαραίτητο να γεμίζετε όλα τα φρεάτια με το διάλυμα μέχρι το χείλος (0,30-0,35 ml ανά φρεάτιο), χωρίς να ξεχειλίζει ή να διαρρέει υγρό από γειτονικά φρεάτια.

Είναι απαραίτητο να διατηρηθούν τα φρεάτια γεμάτα με διάλυμα για το πλύσιμο της πλάκας για 30 δευτερόλεπτα.

Κατά τη διάρκεια κάθε αναρρόφησης, αφαιρέστε προσεκτικά το υπολειμματικό υγρό από τα φρεάτια χτυπώντας το πλαίσιο με λωρίδες σε ανεστραμμένη θέση σε διηθητικό χαρτί διπλωμένο πολλές φορές, τοποθετημένο σε ένα φύλλο πολυαιθυλενίου.

Το κακό πλύσιμο της πλάκας οδηγεί σε λανθασμένα αποτελέσματα.

8 Διεξαγωγή ανάλυσης

8.1 Ρίξτε σε οποιαδήποτε δύο φρεάτια του πιάτου 0,07 ml(70 µl) Κ + ΑΤ, στις άλλες δύο τρύπες - το καθένα 0,07 ml(70 µl) Κ + ΑΓ, στις άλλες τρεις τρύπες - το καθένα 0,07 ml(70 µl) ΠΡΟΣ - .

Προσοχή!Κατά την εκτέλεση ELISA σε μία λωρίδα, επιτρέπεται η χρήση δύο φρεατίων για το K – -, ένα φρεάτιο για το K + AT και ένα φρεάτιο για το K + AG.

Αδειάζουμε στα υπόλοιπα φρεάτια του πιάτου 0,07 ml(70 µl) των μελετηθέντων δειγμάτων ορού ανθρώπινου αίματος (πλάσμα).

Προσοχή!Κάθε δείγμα πρέπει να συλλέγεται με ένα άκρο μιας χρήσης!

8.2 Σε όλα τα φρεάτια της πλάκας πάνω από δείγματα ελέγχου και δείγματα δοκιμής ορού αίματος (πλάσμα) αμέσωςκατάθεση από 0,05 ml(50 µl) RK-1. Ανακατέψτε τα περιεχόμενα των πηγαδιών χτυπώντας απαλά τις άκρες της πλάκας.

8.3 (37 ± 1) ° Από μέσα 60 λεπτά.

Προσοχή!(1-2) λεπτά πριν από το τέλος της επώασης, παρασκευάστε ένα διάλυμα Kg-2 σε αραίωση εργασίας (ενότητα 6.6).

8.4 Αφαιρέστε τα περιεχόμενα των πηγαδιών χρησιμοποιώντας μια ροδέλα και, στη συνέχεια, πλύνετε τα φρεάτια της πλάκας με διάλυμα για το πλύσιμο της πλάκας (ενότητα 6.2) επτά φορές.

8.5 Ρίξτε σε όλα τα πηγάδια του πιάτου 0,15 ml(150 μl) διαλύματος Kg-2σε αραίωση εργασίας (ρήτρα 6.6).

8.6 Σφραγίστε την πλάκα με μεμβράνη ή κλείστε με ένα καπάκι και επωάστε σε θερμοστάτη σε θερμοκρασία (37 ± 1) ° Από μέσα 10 λεπτά.

8.7 Αφαιρέστε τα περιεχόμενα των πηγαδιών των πλακών χρησιμοποιώντας μια ροδέλα και, στη συνέχεια, πλύνετε τα φρεάτια της πλάκας με διάλυμα πλυσίματος πλακών (ενότητα 6.2) επτά φορές.

8.8 Ρίξτε σε όλα τα πηγάδια του πιάτου 0,15 ml(150 µl) διάλυμα εργασίας υποστρώματος(ρήτρα 6.7).

Κατά την προετοιμασία ενός διαλύματος εργασίας του υποστρώματος (ρήτρα 6.7)φά Η λάκα με χρωμογόνο TMB πρέπει να ζεσταθεί πριν τη χρήση για (3-5) λεπτά σε θερμοκρασία (37± 1) ° C μέχρι να διαλυθούν πλήρως οι κρύσταλλοι.

8.9 Σφραγίστε την πλάκα με μεμβράνη ή κλείστε με ένα καπάκι και επωάστε σε θερμοστάτη σε θερμοκρασία (37 ± 1) ° ΜΕ σε μέρος προστατευμένο από το φως για 15 λεπτά.

Προσοχή!Στο τέλος της επώασης σε φρεάτια με δείγματα ορού που περιέχουν αντισώματα κατά του HIV-1 και/ή του HIV-2 και/ή του αντιγόνου HIV-1 p24, το χρώμα του διαλύματος θα αλλάξει από άχρωμο σε μπλε ποικίλης έντασης ανάλογα με τη συγκέντρωση αντισωμάτων ή/και αντιγόνου στο δείγμα ορού που ελέγχεται.

8.10 Σταματήστε την αντίδραση υπεροξειδάσης προσθέτοντας 0,05 ml(50 µl) αντιδραστήριο διακοπής.

Προσοχή!Σε φρεάτια με δείγματα ορού που περιέχουν αντισώματα έναντι του HIV-1 και/ή του HIV-2, και/ή του αντιγόνου HIV-1 p24, το χρώμα του διαλύματος θα αλλάξει από μπλε σε κίτρινο ποικίλης έντασης.

8.11 Το αργότερο (1-2) λεπτά μετά τη διακοπή της αντίδρασης, προσδιορίστε την OD στα φρεάτια σε λειτουργία μονού κύματος στο μήκος κύματος 450 nm.

9 Επεξεργασία αποτελεσμάτων ανάλυσης

9.2 Τα αποτελέσματα λαμβάνονται υπόψη μόνο εάν:

Η τιμή του OPsr K - δεν υπερβαίνει το 0,2 OE.

Κάθε μεμονωμένη τιμή του OP K - δεν πρέπει να αποκλίνει από το OPsr K - περισσότερο από 30%. Εάν μία από τις τρεις τιμές του OP K- υπερβαίνει αυτό το όριο, θα πρέπει να εξαιρεθεί από τον υπολογισμό του OPsr K-. Εάν δύο από τις τρεις τιμές OD K - βρίσκονται εκτός αυτού του ορίου, η ανάλυση θα πρέπει να επαναληφθεί χρησιμοποιώντας τα αντιδραστήρια ενός νέου συνόλου.

Η τιμή του OPsr K + AT είναι μεγαλύτερη από 1,0 OE.

Η τιμή του OPsr K + AG είναι μεγαλύτερη από 1,0 OU.

9.3 Εάν πληρούνται οι παραπάνω προϋποθέσεις, υπολογίστε την κρίσιμη τιμή (OPcrit.), OE, χρησιμοποιώντας τον τύπο (1):

OPcrit. = OPsr K - + 0,14 (1).

10 Αναλυτικές και διαγνωστικά χαρακτηριστικά

Ευαισθησίασύνολο αντιδραστηρίων ELISA-HIV 1,2 AGATγια την ανίχνευση του αντιγόνου HIV-1 p24 –

Ιδιαιτερότητασύνολο αντιδραστηρίων ELISA-HIV 1,2 AGAT– Πρότυπο AT(-)HIV 100%. Τυπικό πάνελ ορών που δεν περιέχουν αντισώματα κατά του ιού της ανθρώπινης ανοσοανεπάρκειας τύπου 1 και 2 (HIV-1,2) και του αντιγόνου HIV-1 (p24) OCO42-28-214-02P. CJSC "MBS"

11 Ορίστε τη φόρμα απελευθέρωσης

11.1 Το σετ διατίθεται σε πέντε επιλογές διαμόρφωσης:

1 σετ 1P – χειροκίνητη ανάλυση. Το κιτ έχει σχεδιαστεί για να πραγματοποιεί 12 ρυθμίσεις ELISA σε πτυσσόμενη πλάκα: 1 τρέξιμο – 1 λωρίδα (8 φρεάτια). Σύνολο – 96 προσδιορισμοί, συμπεριλαμβανομένων δειγμάτων ελέγχου.

2 σετ 2M – χειροκίνητη ανάλυση. Το κιτ έχει σχεδιαστεί για να πραγματοποιεί 2 δοκιμές ELISA σε μονολιθικές πλάκες: 1 δοκιμή – 1 πλάκα. Σύνολο – 192 προσδιορισμοί, συμπεριλαμβανομένων δειγμάτων ελέγχου.

3 σετ 2P– χειροκίνητη διεξαγωγή ανάλυσης. Το σετ έχει σχεδιαστεί για εκτέλεση 24 παραγωγές ELISA για 2 αποσυναρμολογήσιμο x δισκία: 1 ρύθμιση – 1 λωρίδα (8 πηγαδάκια). Σύνολο – 192 ορισμοί, συμπεριλαμβανομένων δειγμάτων ελέγχου.

4 σετ A2M – ανάλυση σε αυτόματο αναλυτή. Το κιτ έχει σχεδιαστεί για να πραγματοποιεί 2 δοκιμές ELISA σε μονολιθικές πλάκες: 1 δοκιμή – 1 πλάκα. Σύνολο – 192 προσδιορισμοί, συμπεριλαμβανομένων δειγμάτων ελέγχου.

5 σετ A2P – ανάλυση σε αυτόματο αναλυτή. Το κιτ έχει σχεδιαστεί για να πραγματοποιεί 24 ρυθμίσεις ELISA σε 2 πτυσσόμενες πλάκες: 1 τρέξιμο – 1 λωρίδα (8 φρεάτια). Συνολικά 192 προσδιορισμοί, συμπεριλαμβανομένων δειγμάτων ελέγχου.

12 Συνθήκες αποθήκευσης και χρήσης του κιτ

12.1 Το κιτ πρέπει να φυλάσσεται σε καθαρό δωμάτιο, προστατευμένο από την υγρασία και το φως, σε θερμοκρασία (2-8) °C καθ' όλη τη διάρκεια ζωής του. Μην καταψύχετε τα εξαρτήματα του κιτ.

12.2 Για να έχετε αξιόπιστα αποτελέσματα, είναι απαραίτητη η αυστηρή τήρηση των οδηγιών χρήσης του κιτ.

12.3 Ημερομηνία λήξης του σετ – 12 μηνών.

Παράρτημα Α

Πίνακας A.1 - Κατανάλωση αντιδραστηρίων για το κιτ ELISA

αντιδραστήριο, ml

Αριθμός χρησιμοποιούμενων ταινιών, τεμ.

Προετοιμασία διαλύματος για το πλύσιμο του δισκίου

FSB-T×25

Αποσταγμένο νερό

Παρασκευή διαλύματος Kg-2 σε αραίωση εργασίας

RR-K2

Παρασκευή διαλύματος υποστρώματος εργασίας

Χρωμογόνο TMB

Βιβλιογραφία

	Υγειονομικοί κανόνες	Διάταγμα του Υπουργείου Υγείας της Δημοκρατίας της Λευκορωσίας με ημερομηνία 16 Δεκεμβρίου 1998 αριθ. 351 Σχετικά με την αναθεώρηση των νομοθετικών κανονισμών που ρυθμίζουν θέματα σχετικά με το HIV/AIDS
	Διάταγμα του Υπουργείου Υγείας της Δημοκρατίας της Λευκορωσίας με ημερομηνία 25 Νοεμβρίου 2002 αριθ. 165 Περί απολύμανσης και αποστείρωσης από ιδρύματα υγείας
	Ψήφισμα του Υπουργείου Υγείας της Δημοκρατίας της Λευκορωσίας με ημερομηνία 28 Απριλίου 2010 αριθ. 47 Περί έγκρισης των Οδηγιών για τη διαδικασία διενέργειας υποχρεωτικών ιατρικές εξετάσειςεργασία και ακύρωση ορισμένων ψηφισμάτων του Υπουργείου Υγείας της Δημοκρατίας της Λευκορωσίας

Μοναδικός αριθμός καταχώρισης μητρώου

Αριθμός εγγραφής ιατρική συσκευή

FSR 2011/10182

Ημερομηνία κρατικής εγγραφής της ιατρικής συσκευής

Ονομασία ιατρικού προϊόντος

Σετ αντιδραστηρίων "MilaLab-IFA-HIV-AGAT" σύστημα δοκιμής ενζυμικού ανοσοπροσδιορισμού για την ανίχνευση αντισωμάτων στους ιούς ανθρώπινης ανοσοανεπάρκειας τύπου 1 και 2 (HIV-1 και HIV-2), του HIV-1 της ομάδας Ο και του HIV-1 αντιγόνου p24 σύμφωνα με TU 9398 -187-05941003-2017
που αποτελείται από: - Ανοσορροφητικό - ένα αποσυναρμολογούμενο δισκίο πολυστυρενίου 96 φρεατίων σε λωρίδες (ή φρεάτια), στα πηγάδια των οποίων προσροφούνται τεχνητά αντιγόνα - gp160, gp41, p31 HIV-1, gp41 HIV-1 ομάδα Ο, gp36 HIV-2 και αντισώματα έναντι του αντιγόνου p24 HIV-1: σετ 1 (1 δισκίο), σετ 2 (2 δισκία), σετ 3 (5 δισκία), - Συζυγές-1: σετ 1 (1 φιαλίδιο 1,2 ml), σετ 2 (1 φιαλίδιο. 1,2 ml), σετ 3 (1 φιαλίδιο 3,6 ml ή 3 φιαλίδια 1,2 ml το καθένα), - Συζυγές-2: σετ 1 (1 φιαλίδιο 2,0 ml), σετ 2 (1 φιαλίδιο 2,0 ml), σετ 3 (1 φιαλίδιο 4,0 ml ή 2 φιαλίδια 2,0 ml το καθένα), - RRK-1 - διάλυμα για αραίωση Συζυγές-1: σετ 1 (1 φιαλίδιο 12,0 ml) , σετ 2 (1 φιαλίδιο 12,0 ml), σετ 3 (3 φιαλίδια των 12,0 ml το καθένα) , - RRK-2 - διάλυμα για αραίωση Σύζευξης-2: σετ 1 (1 φιαλίδιο 20,0 ml), σετ 2 (1 φιαλίδιο 20,0 ml), σετ 3 (2 φιαλίδια 20,0 ml), - K+AT - θετικό δείγμα ελέγχου που περιέχει αντισώματα σε HIV: σετ 1 (1 φιαλίδιο 2,0 ml), σετ 2 (1 φιαλίδιο 2,0 ml), σετ 3 (1 φιαλίδιο 4,0 ml ή 2 φιαλίδια 2,0 ml το καθένα), - K+AG - θετικό δείγμα ελέγχου που περιέχει τεχνητό HIV-1 p24 αντιγόνο : σύνολο 1 (1 φλ. 2,0 ml), σετ 2 (1 φιαλίδιο 2,0 ml), σετ 3 (1 φιαλίδιο 4,0 ml ή 2 φιαλίδια 2,0 ml το καθένα), - K- - αρνητικό δείγμα ελέγχου: σετ 1 (1 φιαλίδιο 2,5 ml), σετ 2 (1 φιάλη 2,5 ml), σετ 3 (1 φιάλη 5,0 ml ή 2 φιάλες των 2,5 ml το καθένα), - PR - διάλυμα πλύσης: σετ 1 (1 φιάλη 50,0 ml), σετ 2 (1 φιάλη 120,0 ml), σετ 3 (2 φιάλες 120,0 ml ), - Αντιδραστήριο διακοπής: σετ 1 (1 φιάλη 25,0 ml), σετ 2 (2 φιάλες των 25,0 ml), σετ 3 (2 φιάλες των 50,0 ml ή 4 φιάλες των 25,0 ml), - SB - ρυθμιστικό διάλυμα υποστρώματος: σετ 1 (1 φιάλη των 25,0 ml), σετ 2 (1 φιάλη 25,0 ml), σετ 3 (2 φιάλες 50,0 ml ή 3 φιάλες 25,0 ml), - TMB - διάλυμα που περιέχει 3,3", 5,5"-τετραμεθυλοβενζιδίνη: σετ 1 (1 μπουκάλι των 2,5 ml), σετ 2 (1 φιάλη των 2,5 ml), σετ 3 (2 φιάλες των 3,5 ml ή 3 φιάλες των 2,5 ml). Αξεσουάρ: - καλύμματα για πλάκες από πολυστυρένιο 96 πηγαδιών: σετ 1 (1 τεμ.), σετ 2 (2 τεμ.), σετ 3 (5 τεμ.) ή - προστατευτικές μεμβράνες για πλάκες ELISA: σετ 1 (2 τεμ.) σετ 2 (4 τεμ.), σετ 3 (10 τεμ.), - μύτες μιας χρήσης: σετ 1 (16 τεμ.), σετ 2 (32 τεμ.), σετ 3 (80 τεμ.), - πλαστικοί δίσκοι για υγρά αντιδραστήρια : σετ 1 (2 τεμ.), σετ 2 (4 τεμ.), σετ 3 (10 τεμ.), - πλαστικές σακούλες με φερμουάρ: σετ 1 (1 τεμ.), σετ 2 (2 τεμ.) , σετ 3 (3 τεμ.).

Επωνυμία φορέα - αιτών ιατροτεχνολογικού προϊόντος

Τοποθεσία του αιτούντος οργανισμού για το ιατροτεχνολογικό προϊόν

Νομική διεύθυνση του αιτούντος οργανισμού για το ιατροτεχνολογικό προϊόν

603014, Ρωσία, Nizhny Novgorod, st. Κομιντέρν, 47

Όνομα του κατασκευαστή ιατροτεχνολογικού προϊόντος ή του κατασκευαστή ιατροτεχνολογικού προϊόντος

LLC "NPO "Diagnostic Systems"

Τοποθεσία του οργανισμού-κατασκευαστή του ιατροτεχνολογικού προϊόντος ή του οργανισμού-κατασκευαστή του ιατροτεχνολογικού προϊόντος

603093, Ρωσία, Nizhny Novgorod, st. Yabloneva, 22, Τ.Θ. 69

Νομική διεύθυνση του οργανισμού-κατασκευαστή του ιατροτεχνολογικού προϊόντος ή του οργανισμού-κατασκευαστή του ιατροτεχνολογικού προϊόντος