Ποιοτικός και ποσοτικός προσδιορισμός της βιταμίνης α. Βιταμίνες, μέταλλα και διαιτητικές ίνες. Προσδιορισμός της βιταμίνης Β1

Οι βασικές ουσίες τροφίμων, που ενώνονται με τη γενική ονομασία «βιταμίνες», ανήκουν σε διαφορετικές κατηγορίες χημικών ενώσεων, γεγονός που από μόνο του αποκλείει τη δυνατότητα χρήσης μιας και μόνο μεθόδου για τον ποσοτικό προσδιορισμό τους. Όλες οι αναλυτικές μέθοδοι που είναι γνωστές για τις βιταμίνες βασίζονται είτε στον προσδιορισμό των ειδικών βιολογικών ιδιοτήτων αυτών των ουσιών (βιολογικές, μικροβιολογικές, ενζυματικές), είτε στη χρήση των φυσικοχημικών χαρακτηριστικών τους (φθορισμού, χρωματογραφικές και φασματοφωτομετρικές μέθοδοι) είτε στην ικανότητα ορισμένες βιταμίνες για να αντιδράσουν με ορισμένα αντιδραστήρια για να σχηματίσουν έγχρωμες ενώσεις (χρωματομετρικές μέθοδοι).

Παρά την πρόοδο που σημειώθηκε στον τομέα της αναλυτικής και εφαρμοσμένης χημείας, μέθοδοι για τον προσδιορισμό των βιταμινών σε τρόφιμαεξακολουθεί να είναι εντατική και χρονοβόρα. Αυτό οφείλεται σε μια σειρά αντικειμενικών λόγων, οι κυριότεροι από τους οποίους είναι οι εξής.

1. Ο προσδιορισμός ενός αριθμού βιταμινών συχνά περιπλέκεται από το γεγονός ότι πολλές από αυτές βρίσκονται στη φύση σε δεσμευμένη κατάσταση με τη μορφή συμπλοκών με πρωτεΐνες ή πεπτίδια, καθώς και με τη μορφή φωσφορικών εστέρων. Για ποσοτικό προσδιορισμό, είναι απαραίτητο να καταστραφούν αυτά τα σύμπλοκα και να απομονωθούν οι βιταμίνες σε ελεύθερη μορφή, διαθέσιμη για φυσικοχημική ή μικροβιολογική ανάλυση. Αυτό συνήθως επιτυγχάνεται με τη χρήση ειδικών συνθηκών επεξεργασίας (όξινη, αλκαλική ή ενζυματική υδρόλυση, αποστείρωση σε αυτόκλειστο).

2. Σχεδόν όλες οι βιταμίνες είναι πολύ ασταθείς ενώσεις, που υπόκεινται εύκολα σε οξείδωση, ισομερισμό και πλήρη καταστροφή υπό την επίδραση υψηλή θερμοκρασία, το οξυγόνο του αέρα, το φως και άλλοι παράγοντες. Πρέπει να λαμβάνονται προφυλάξεις: ελαχιστοποιήστε το χρόνο για προκαταρκτική εκπαίδευσηπροϊόν, αποφύγετε την έντονη θερμότητα και την έκθεση στο φως, χρησιμοποιήστε αντιοξειδωτικά κ.λπ.

3. Στα προϊόντα διατροφής, κατά κανόνα, έχει κανείς να αντιμετωπίσει μια ομάδα ενώσεων που έχουν μεγάλη χημική ομοιότητα και ταυτόχρονα διαφέρουν σε βιολογική δραστηριότητα. Για παράδειγμα, η βιταμίνη Ε περιλαμβάνει 8 τοκοφερόλες, παρόμοιες σε Χημικές ιδιότητες, αλλά διαφέρει σε βιολογική δράση. Η ομάδα των καροτενίων και των καροτενοειδών χρωστικών περιλαμβάνει έως και 80 ενώσεις, από τις οποίες μόνο 10 έχουν ιδιότητες βιταμινών στον ένα ή τον άλλο βαθμό.

4. Οι βιταμίνες ανήκουν σε διαφορετικές κατηγορίες οργανικών ενώσεων. Επομένως, κοινές ομαδικές αντιδράσεις δεν μπορούν να υπάρξουν γι' αυτούς και κοινές μεθόδουςέρευνα.

5. Επιπλέον, η ανάλυση περιπλέκει την παρουσία συνοδών ουσιών στο δείγμα δοκιμής, η ποσότητα των οποίων μπορεί να υπερβαίνει πολλές φορές την περιεκτικότητα της καθορισμένης βιταμίνης (για παράδειγμα, στερόλες και βιταμίνη D). Για την εξάλειψη πιθανών σφαλμάτων στον προσδιορισμό των βιταμινών στα τρόφιμα, τα εκχυλίσματα συνήθως καθαρίζονται επιμελώς από σχετικές ενώσεις και η βιταμίνη συμπυκνώνεται. Για αυτό, χρησιμοποιούνται διάφορες μέθοδοι: καθίζηση ουσιών που παρεμβαίνουν στην ανάλυση, μέθοδοι προσρόφησης, χρωματογραφία ανταλλαγής ιόντων ή κατανομή, επιλεκτική εκχύλιση της αναλυόμενης ουσίας κ.λπ.

Τα τελευταία χρόνια, η HPLC έχει χρησιμοποιηθεί με επιτυχία για τον προσδιορισμό των βιταμινών σε προϊόντα διατροφής. Αυτή η μέθοδος είναι η πιο πολλά υποσχόμενη, καθώς σας επιτρέπει να διαχωρίζετε, να αναγνωρίζετε και να ποσοτικοποιείτε ταυτόχρονα διάφορες βιταμίνες και τις βιολογικά ενεργές τους μορφές, γεγονός που μειώνει τον χρόνο ανάλυσης.

Φυσικοχημικές μέθοδοι για τη μελέτη βιταμινών. Οι μέθοδοι βασίζονται στη χρήση των φυσικοχημικών χαρακτηριστικών των βιταμινών (ικανότητά τους να φθορίζουν, απορρόφηση φωτός, αντιδράσεις οξειδοαναγωγής κ.λπ.). Χάρη στην ανάπτυξη της αναλυτικής χημείας και των οργάνων, οι φυσικοχημικές μέθοδοι έχουν σχεδόν πλήρως αντικαταστήσει τις χρονοβόρες και δαπανηρές βιολογικές μεθόδους.

Προσδιορισμός της βιταμίνης C. Η βιταμίνη C (ασκορβικό οξύ) μπορεί να υπάρχει στα τρόφιμα τόσο σε ανηγμένη όσο και σε οξειδωμένη μορφή. Το δεϋδροασκορβικό οξύ (DAC) μπορεί να σχηματιστεί κατά την επεξεργασία και αποθήκευση των προϊόντων διατροφής ως αποτέλεσμα της οξείδωσης, γεγονός που καθιστά απαραίτητο τον προσδιορισμό του. Κατά τον προσδιορισμό της βιταμίνης C στα τρόφιμα, χρησιμοποιήστε διάφορες μεθόδους: χρωματομετρικές, φθορίζουσες, ογκομετρικές μέθοδοι ανάλυσης που βασίζονται στις ιδιότητες οξειδοαναγωγής του ΑΑ και HPLC.

Το κρίσιμο σημείο στον ποσοτικό προσδιορισμό του ΑΑ είναι η παρασκευή του εκχυλίσματος δείγματος. Η εξαγωγή πρέπει να είναι πλήρης. Το καλύτερο εκχυλιστικό είναι ένα διάλυμα 6% μεταφωσφορικού οξέος, το οποίο έχει την ικανότητα να κατακρημνίζει πρωτεΐνες. Χρησιμοποιούνται επίσης οξικό, οξαλικό και υδροχλωρικό οξύ, καθώς και τα μείγματά τους.

1. Για τον συνολικό και ξεχωριστό προσδιορισμό των οξειδωμένων και ανηγμένων μορφών ΑΑ, η μέθοδος Rohe χρησιμοποιείται συχνά χρησιμοποιώντας ένα αντιδραστήριο 2,4-δινιτροφαινυλυδραζίνης. Το AA (γουλονικό οξύ) υπό τη δράση οξειδωτικών παραγόντων περνά στο DAK και στη συνέχεια στο 2,3-δικετογουλονικό οξύ, το οποίο σχηματίζει ενώσεις με πορτοκαλί χρώμα με 2,4-δινιτροφαινυλυδραζίνη. Η ίδια η 2,4-δινιτροφαινυλυδραζίνη είναι μια βάση που δεν μπορεί να υπάρχει σε μορφή οξύ. Ωστόσο, οι αντίστοιχες υδραζόνες υπό την επίδραση αλκαλίων μετατρέπονται σε έντονα χρωματισμένα οξέα άλατα. Κατά τον προσδιορισμό της βιταμίνης C, αυτή η μέθοδος παρεμβαίνει στην παρουσία αναγωγικών παραγόντων (γλυκόζη, φρουκτόζη κ.λπ.). Επομένως, με υψηλή περιεκτικότητα σε σάκχαρα στο υπό δοκιμή προϊόν, χρησιμοποιείται χρωματογραφία, η οποία περιπλέκει τον προσδιορισμό.

2. Πρόσφατα, έχει αναγνωριστεί μια πολύ ευαίσθητη και ακριβής μέθοδος φθορισμού για τον προσδιορισμό της συνολικής περιεκτικότητας σε βιταμίνη C (το άθροισμα των AA και DAA). Το DAK, συμπυκνούμενο με ο-φαινυλενοδιαμίνη, σχηματίζει μια φθορίζουσα ένωση, την κινοξαλίνη, η οποία έχει μέγιστο φθορισμό σε μήκος κύματος διέγερσης 350 nm.

Η ένταση φθορισμού της κινοξαλίνης σε ένα ουδέτερο μέσο σε θερμοκρασία δωματίου είναι ευθέως ανάλογη με τη συγκέντρωση DAA. Για ποσοτικό προσδιορισμό του ΑΑ, οξειδώνεται προκαταρκτικά σε DAA. Το μειονέκτημα αυτής της μεθόδου είναι ο μάλλον ακριβός εξοπλισμός.

Μέθοδοι που βασίζονται στις οξειδοαναγωγικές ιδιότητες του ΑΑ.

3. Από τις μεθόδους που βασίζονται στις οξειδοαναγωγικές ιδιότητες του ΑΑ, τη μεγαλύτερη εφαρμογή έχει βρει η μέθοδος της τιτλοδότησης με διάλυμα 2,6-διχλωροφαινολινδοφαινόλης, που έχει μπλε χρώμα. Το προϊόν της αλληλεπίδρασης του ΑΑ με το αντιδραστήριο είναι άχρωμο. Η μέθοδος μπορεί να χρησιμοποιηθεί στην ανάλυση όλων των τύπων προϊόντων. Κατά την ανάλυση προϊόντων που δεν περιέχουν φυσικές χρωστικές σε πατάτες, γάλα, χρησιμοποιείται οπτική τιτλοδότηση. Σε περίπτωση παρουσίας φυσικών χρωστικών, χρησιμοποιήστε ποτενσιομετρική τιτλοδότηση ή τη μέθοδο εκχύλισης ινδοφαινόλης-ξυλενίου. Η τελευταία μέθοδος βασίζεται στον ποσοτικό αποχρωματισμό της 2,6-διχλωροφαινολινοφαινόλης με ασκορβικό οξύ. Η περίσσεια χρωστικής εκχυλίζεται με ξυλόλιο και η οπτική πυκνότητα του εκχυλίσματος μετράται στα 500 nm.

Μόνο η Α.Κ. αντιδρά. Το DAK μειώνεται εκ των προτέρων με κυστεΐνη. Για να διαχωριστεί η ΑΑ από τους αναγωγικούς παράγοντες που υπάρχουν σε θερμικά επεξεργασμένα τρόφιμα ή μακροχρόνια αποθηκευμένα εκχυλίσματα, υποβάλλονται σε επεξεργασία με φορμαλδεΰδη. Η φορμαλδεΰδη, ανάλογα με το pH του μέσου, αλληλεπιδρά επιλεκτικά με ΑΑ και ξένες προσμίξεις αναγωγικών παραγόντων (pH = 0). Η καθορισμένη μέθοδος καθορίζει την ποσότητα AK και DAK.

Η 2,6-διχλωροφαινολινοφαινόλη μπορεί επίσης να χρησιμοποιηθεί για τον φωτομετρικό προσδιορισμό της ΑΑ. Το διάλυμα αντιδραστηρίου έχει μπλε χρώμα και το προϊόν αλληλεπίδρασης με το ΑΑ είναι άχρωμο, δηλ. ως αποτέλεσμα της αντίδρασης, η ένταση του μπλε χρώματος μειώνεται. Η οπτική πυκνότητα μετριέται στα 605 nm (ρΗ = 3,6).

4. Μια άλλη μέθοδος που βασίζεται στις αναγωγικές ιδιότητες του ΑΑ είναι η χρωματομετρική μέθοδος, η οποία χρησιμοποιεί την ικανότητα του ΑΑ να μειώνει τον Fe(3+) σε Fe(2+) και την ικανότητα του τελευταίου να σχηματίζει έντονα κόκκινα άλατα με 2,2'-. διπυριδυλ. Η αντίδραση διεξάγεται σε pH 3,6 και θερμοκρασία 70ºС. Η απορρόφηση του διαλύματος μετράται στα 510 nm.

5. Φωτομετρική μέθοδος βασισμένη στην αλληλεπίδραση του ΑΑ με το αντιδραστήριο Folin. Το αντιδραστήριο Folin είναι ένα μείγμα φωσφομολυβδικών και φωσφοβολφραμικών οξέων, δηλ. Αυτή είναι μια γνωστή μέθοδος που βασίζεται στον σχηματισμό μπλε του μολυβδαινίου που απορροφάται στα 640–700 nm.

6. Η εξαιρετικά ευαίσθητη και ειδική μέθοδος HPLC μπορεί να χρησιμοποιηθεί με επιτυχία για τον προσδιορισμό της βιταμίνης C σε όλα τα προϊόντα διατροφής. Η ανάλυση είναι αρκετά απλή, μόνο όταν αναλύετε προϊόντα πλούσια σε πρωτεΐνες, πρέπει πρώτα να τα αφαιρέσετε. Η ανίχνευση πραγματοποιείται με φθορισμό.

Εκτός από τις παραπάνω μεθόδους για τον προσδιορισμό της βιταμίνης C, υπάρχει ένας αριθμός μεθόδων, για παράδειγμα, οξείδωση με χλωριούχο χρυσό και σχηματισμός υδροξαμικών οξέων, αλλά αυτές οι μέθοδοι δεν έχουν πρακτική σημασία.

Προσδιορισμός της θειαμίνης (Β 1 ). Στα περισσότερα φυσικά προϊόντα, η θειαμίνη εμφανίζεται με τη μορφή διφωσφορικού εστέρα - κοκαρβοξυλάσης. Το τελευταίο, όντας η ενεργή ομάδα ενός αριθμού ενζύμων του μεταβολισμού των υδατανθράκων, είναι σε ορισμένους δεσμούς με την πρωτεΐνη. Για τον ποσοτικό προσδιορισμό της θειαμίνης, είναι απαραίτητο να καταστραφούν τα σύμπλοκα και να απομονωθεί η υπό μελέτη βιταμίνη σε ελεύθερη μορφή, διαθέσιμη για φυσικοχημική ανάλυση. Για το σκοπό αυτό, πραγματοποιείται όξινη υδρόλυση ή υδρόλυση υπό την επίδραση ενζύμων. Τα πλούσια σε πρωτεΐνες αντικείμενα επεξεργάζονται με πρωτεολυτικά ένζυμα (πεψίνη) σε μέσο υδροχλωρικού οξέος. Αντικείμενα με υψηλή περιεκτικότητα σε λιπαρά (χοιρινό κρέας, τυριά) υποβάλλονται σε επεξεργασία με αιθέρα για να αφαιρεθεί (η θειαμίνη είναι πρακτικά αδιάλυτη στον αιθέρα).

1. Για τον προσδιορισμό της θειαμίνης στα προϊόντα διατροφής, κατά κανόνα, χρησιμοποιείται μια μέθοδος φθορισμού, που βασίζεται στην οξείδωση της θειαμίνης σε αλκαλικό μέσο με εξακυανοφερρικό κάλιο (3+) για να σχηματιστεί μια θειοχρωμική ένωση που είναι πολύ φθορίζουσα στο υπεριώδες φως. Η ένταση του φθορισμού του είναι ευθέως ανάλογη με την περιεκτικότητα σε θειαμίνη (το μήκος κύματος του συναρπαστικού φωτός είναι 365 nm, το μήκος κύματος του εκπεμπόμενου φωτός είναι 460-470 nm (μπλε φθορισμός)). Κατά τη χρήση αυτής της μεθόδου, προκύπτουν δυσκολίες λόγω της παρουσίας φθοριζουσών ενώσεων σε έναν αριθμό αντικειμένων. Αφαιρούνται με καθαρισμό σε στήλες με ρητίνες ανταλλαγής ιόντων. Κατά την ανάλυση του κρέατος, του γάλακτος, των πατατών, του ψωμιού σίτου και ορισμένων λαχανικών, δεν απαιτείται καθαρισμός.

2. Η θειαμίνη χαρακτηρίζεται από τη δική της απορρόφηση στην περιοχή UV (240 nm σε υδατικό διάλυμα, 235 nm σε αιθανόλη), πράγμα που σημαίνει ότι μπορεί να προσδιοριστεί με άμεση φασματοφωτομετρία.

3. Για τον ταυτόχρονο προσδιορισμό θειαμίνης και ριβοφλαβίνης, χρησιμοποιείται HPLC.

Προσδιορισμός ριβοφλαβίνης (Β 2 ). Στα τρόφιμα, η ριβοφλαβίνη υπάρχει κυρίως ως εστέρες φωσφόρου που συνδέονται με τις πρωτεΐνες και επομένως δεν μπορεί να προσδιοριστεί χωρίς προηγούμενη πρωτεολυτική πέψη. Η ελεύθερη ριβοφλαβίνη βρίσκεται σε σημαντικές ποσότητες στο γάλα.

Κατά τον προσδιορισμό της ριβοφλαβίνης, οι μικροβιολογικές και φυσικοχημικές (φθορισμού) μέθοδοι ανάλυσης χρησιμοποιούνται ευρέως. Η μικροβιολογική μέθοδος είναι συγκεκριμένη, ιδιαίτερα ευαίσθητη και ακριβής. ισχύει για όλα τα προϊόντα, αλλά είναι χρονοβόρο και απαιτεί ειδικούς όρους.

Η φυσικοχημική μέθοδος έχει αναπτυχθεί σε δύο εκδόσεις, οι οποίες διαφέρουν ως προς τη μέθοδο αξιολόγησης των φθοριζόντων ουσιών:

παραλλαγή του άμεσου φθορισμού (προσδιορισμός της έντασης του φθορισμού της ριβοφλαβίνης) και

Παραλλαγή Lumiflavin.

1. Η ελεύθερη ριβοφλαβίνη και οι φωσφορικοί εστέρες της παρουσιάζουν έναν χαρακτηριστικό κιτρινοπράσινο φθορισμό σε μήκος κύματος διέγερσης 440-500 nm. Αυτή η ιδιότητα είναι η βάση της πιο ευρέως χρησιμοποιούμενης μεθόδου φθορισμού για τον προσδιορισμό της ριβοφλαβίνης. Η ριβοφλαβίνη και οι εστέρες της δίνουν πολύ παρόμοια φάσματα φθορισμού με μέγιστο στα 530 nm. Η θέση του μέγιστου δεν εξαρτάται από το pH. Η ένταση του φθορισμού εξαρτάται σημαντικά από το pH και από τον διαλύτη (διαφορετικό για τη ριβοφλαβίνη και τους εστέρες της), επομένως οι εστέρες καταστρέφονται προκαταρκτικά και αναλύεται η ελεύθερη ριβοφλαβίνη. Για αυτό, χρησιμοποιούνται υδρόλυση με υδροχλωρικό και τριχλωροξικό οξύ, αποστείρωση σε αυτόκλειστο και επεξεργασία με ενζυμικά παρασκευάσματα.

Η ένταση του κιτρινοπράσινου φθορισμού της ριβοφλαβίνης στο υπεριώδες φως εξαρτάται όχι μόνο από τη συγκέντρωσή της, αλλά και από την τιμή του pH του διαλύματος. Η μέγιστη ένταση επιτυγχάνεται σε pH=6-7. Ωστόσο, η μέτρηση πραγματοποιείται σε pH από 3 έως 5, καθώς σε αυτό το εύρος η ένταση φθορισμού καθορίζεται μόνο από τη συγκέντρωση της ριβοφλαβίνης και δεν εξαρτάται από άλλους παράγοντες - την τιμή του pH, τη συγκέντρωση αλάτων, σίδηρο, οργανικές ακαθαρσίες , και τα λοιπά.

Η ριβοφλαβίνη καταστρέφεται εύκολα στο φως, ο προσδιορισμός πραγματοποιείται σε χώρο προστατευμένο από το φως και σε pH όχι μεγαλύτερο από 7. Πρέπει να σημειωθεί ότι η μέθοδος άμεσου φθορισμού δεν εφαρμόζεται σε προϊόντα με χαμηλή περιεκτικότητα σε ριβοφλαβίνη.

2. Η παραλλαγή της λουμφλαβίνης βασίζεται στη χρήση της ιδιότητας της ριβοφλαβίνης κατά την ακτινοβόληση σε αλκαλικό μέσο, ​​να μετατρέπεται σε λουμιφλαβίνη, η ένταση φθορισμού της οποίας μετράται μετά την εκχύλισή της με χλωροφόρμιο (μπλε φθορισμός, 460–470 nm). Δεδομένου ότι υπό ορισμένες συνθήκες το 60-70% της συνολικής ριβοφλαβίνης περνά στη λουμιφλαβίνη, κατά την ανάλυση είναι απαραίτητο να τηρούνται σταθερές συνθήκες ακτινοβόλησης, το ίδιο για το δοκιμαστικό και το πρότυπο διάλυμα.

Προσδιορισμός της βιταμίνης Β 6 . Οι ακόλουθες μέθοδοι μπορούν να χρησιμοποιηθούν για τον προσδιορισμό της βιταμίνης:

1. Άμεση φασματοφωτομετρία. Η υδροχλωρική πυριδοξίνη χαρακτηρίζεται από τη δική της απορρόφηση στα 292 nm (e = 4,4 10 3) σε pH = 5.

2. Μέθοδος Kjeldahl. Ο προσδιορισμός πραγματοποιείται από την αμμωνία, η οποία σχηματίζεται κατά την οξείδωση της βιταμίνης.

3. Φωτομετρική μέθοδος που βασίζεται στην αντίδραση με χλωριμίνη 2,6-διχλωροκινόνης (αντιδραστήριο Gibbs) σε pH 8-10, που έχει ως αποτέλεσμα τον σχηματισμό μπλε ινδοφαινολών. Οι ινδοφαινόλες εκχυλίζονται με μεθυλαιθυλοκετόνη και η οπτική πυκνότητα του εκχυλίσματος μετράται στα 660–690 nm (η αντίδραση Gibbs δίνει φαινόλες με ελεύθερη θέση παρα).

4. Μια μέθοδος φθορισμού που βασίζεται στο γεγονός ότι όταν ακτινοβολείται με πυριδοξίνη και πυριδοξαμίνη, παρατηρείται μπλε φθορισμός και με την πυριδοξάλη, μπλε φθορισμός.

Προσδιορισμός της βιταμίνης Β 9 . Ο προσδιορισμός των φολικών στα τρόφιμα στους ιστούς και τα σωματικά υγρά παρουσιάζει σημαντικές δυσκολίες, γιατί Σε αυτά τα αντικείμενα υπάρχουν συνήθως σε δεσμευμένη μορφή (ως πολυγλουταμινικά). Επιπλέον, οι περισσότερες μορφές είναι ευαίσθητες στις επιδράσεις του ατμοσφαιρικού οξυγόνου, του φωτός και της θερμοκρασίας. Για την προστασία των φολικών από την υδρόλυση, συνιστάται η υδρόλυση παρουσία ασκορβικού οξέος.

Στα τρόφιμα, τα φολικά μπορούν να προσδιοριστούν με φυσικές, χημικές και μικροβιολογικές μεθόδους. Η χρωματομετρική μέθοδος βασίζεται στη διάσπαση του πτεροϋλγλουταμινικού οξέος με το σχηματισμό του π-αμινοβενζοϊκού οξέος και των σχετικών ουσιών και την περαιτέρω μετατροπή τους σε έγχρωμες ενώσεις. Ωστόσο, λόγω έλλειψης ειδικότητας, αυτή η μέθοδος χρησιμοποιείται κυρίως για την ανάλυση των φαρμακευτικών προϊόντων.

Για τον διαχωρισμό, τον καθαρισμό και την ταυτοποίηση των φολικών, έχουν επίσης αναπτυχθεί μέθοδοι χρωματογραφίας σε στήλες, χαρτί και σε ένα λεπτό στρώμα προσροφητικού.

Προσδιορισμός βιταμίνης ΡΡ. Στο φαγητό ένα νικοτινικό οξύκαι το αμίδιο του είναι τόσο σε ελεύθερη όσο και σε δεσμευμένη μορφή, αποτελώντας μέρος των συνενζύμων. Οι χημικές και μικροβιολογικές μέθοδοι για τον ποσοτικό προσδιορισμό της νιασίνης περιλαμβάνουν την πληρέστερη απομόνωση και μετατροπή των δεσμευμένων μορφών της, που αποτελούν μέρος της σύνθετης οργανικής ύλης των κυττάρων, σε ελεύθερο νικοτινικό οξύ. Οι δεσμευμένες μορφές νιασίνης απελευθερώνονται με έκθεση σε όξινα διαλύματα ή υδροξείδιο του ασβεστίου όταν θερμαίνονται. Η υδρόλυση με διάλυμα θειικού οξέος 1 Μ σε αυτόκλειστο για 30 λεπτά σε πίεση 0,1 MPa οδηγεί στην πλήρη απελευθέρωση δεσμευμένων μορφών νιασίνης και στη μετατροπή του νικοτιναμιδίου σε νικοτινικό οξύ. Έχει διαπιστωθεί ότι αυτή η μέθοδος επεξεργασίας δίνει λιγότερα έγχρωμα υδρολύματα και μπορεί να χρησιμοποιηθεί στην ανάλυση κρέατος και προϊόντων ψαριού. Η υδρόλυση με υδροξείδιο του ασβεστίου προτιμάται στον προσδιορισμό της νιασίνης σε αλεύρι, δημητριακά, αρτοσκευάσματα, τυριά, συμπυκνώματα τροφίμων, λαχανικά, μούρα και φρούτα. Το Ca(OH) 2 σχηματίζει ενώσεις με σάκχαρα και πολυσακχαρίτες, πεπτίδια και γλυκοπεπτίδια που είναι σχεδόν εντελώς αδιάλυτα σε ψυχμένα διαλύματα. Ως αποτέλεσμα, το υδρόλυμα που λαμβάνεται με επεξεργασία με Ca(OH) 2 περιέχει λιγότερες ουσίες που παρεμβαίνουν στον χημικό προσδιορισμό από το προϊόν υδρόλυσης οξέος.

1. Η βάση της χημικής μεθόδου για τον προσδιορισμό της νιασίνης είναι η αντίδραση Koenig, η οποία εξελίσσεται σε δύο στάδια. Το πρώτο στάδιο είναι η αντίδραση της αλληλεπίδρασης του δακτυλίου πυριδίνης του νικοτινικού οξέος με το βρωμιούχο κυανογόνο, το δεύτερο είναι ο σχηματισμός ενός έγχρωμου παραγώγου γλουτακονικής αλδεΰδης ως αποτέλεσμα της αλληλεπίδρασης με αρωματικές αμίνες. (Αμέσως μετά την προσθήκη βρωμιούχου κυανογόνου στο νικοτινικό οξύ, εμφανίζεται ένα κίτρινο χρώμα γλουτακοναλδεΰδης. Ως αποτέλεσμα της αλληλεπίδρασής της με αρωματικές αμίνες που εισάγονται στο μείγμα αντίδρασης, σχηματίζονται διανύλια, τα οποία έχουν έντονο χρώμα κίτρινο, πορτοκαλί ή κόκκινο, ανάλογα με η αμίνη (βενζιδίνη - κόκκινο, σουλφανιλικό οξύ - κίτρινο) Η αντίδραση Koenig χρησιμοποιείται για τον φωτομετρικό προσδιορισμό της πυριδίνης και των παραγώγων της με ελεύθερη θέση α. Το μειονέκτημα της μεθόδου είναι η διάρκειά της, αφού ο ρυθμός αντίδρασης είναι χαμηλός.

Η λήψη CNBr είναι δυνατή με δύο τρόπους:

1. CN - + Br 2 = CNBr + Br -

2. SCN – + Br 2 + 4H 2 O = CNBr + SO 4 2– + 8H + + Br –

Υπάρχουν πολλές τροποποιήσεις αυτής της αντίδρασης, ανάλογα με τη θερμοκρασία, το pH, την πηγή των αρωματικών αμινών. Το pH και η αμίνη επηρεάζουν σημαντικά την ένταση και τη σταθερότητα του αναπτυσσόμενου χρώματος. Το πιο σταθερό χρώμα δίνεται από τα προϊόντα αντίδρασης του νικοτινικού οξέος με αντιδραστήριο βρωμοδάνιο (βρωμοκυανό) και σουλφανιλικό οξύ ή μετόλη (θειική παρα-μεθυλαμινοφαινόλη).

2. Το νικοτινικό οξύ και το αμίδιο του μπορούν επίσης να προσδιοριστούν φασματοφωτομετρικά λόγω της δικής τους απορρόφησης στην περιοχή UV. Το νικοτινικό οξύ χαρακτηρίζεται από μέγιστη απορρόφηση στα 262 nm (Ε = 4,4 10 3), και νικοτιναμίδιο στα 215 nm, (Ε = 9 10 3).

3. Η μικροβιολογική μέθοδος χρησιμοποιείται ευρέως για τον ποσοτικό προσδιορισμό της νιασίνης. Είναι απλό, συγκεκριμένο, αλλά μεγαλύτερο από το χημικό. Η μικροβιολογική μέθοδος σας επιτρέπει να προσδιορίσετε την περιεκτικότητα σε νιασίνη σε αντικείμενα στα οποία είναι αδύνατο να γίνει αυτό χημικά (τροφές με υψηλή περιεκτικότητα σε ζάχαρη και χαμηλό επίπεδο νιασίνης).

Προσδιορισμός β-καροτίνης. Σε μια σειρά από τρόφιμα, ιδιαίτερα φυτικής προέλευσης, υπάρχουν τα λεγόμενα καροτενοειδή. Καροτενοειδή (από λατ. καρότα- καρότα) - φυσικές χρωστικές από κίτρινο έως κόκκινο-πορτοκαλί. πολυακόρεστες ενώσεις που περιέχουν δακτυλίους κυκλοεξανίου. Στις περισσότερες περιπτώσεις περιέχουν 40 άτομα άνθρακα στο μόριο.) Κάποια από αυτά (α, β-καροτίνη, κρυπτοξανθίνη κ.λπ.) είναι προβιταμίνες (πρόδρομες ουσίες) της βιταμίνης Α, αφού σε ανθρώπους και ζώα μπορούν να μετατραπούν σε βιταμίνη Α. Περίπου δέκα είναι γνωστές η προβιταμίνη Α, αλλά η πιο δραστική από αυτές είναι η β-καροτίνη.

Κατά την ανάλυση των προϊόντων διατροφής, είναι απαραίτητη η προεπεξεργασία του δείγματος για την εκχύλιση, τη συμπύκνωση της καροτίνης και τον καθαρισμό του από σχετικές ενώσεις. Για το σκοπό αυτό χρησιμοποιούνται ευρέως η εκχύλιση (πετρελαϊκός αιθέρας, εξάνιο, ακετόνη και μείγματα αυτών), η σαπωνοποίηση και η χρωματογραφία. Κατά τον προσδιορισμό της β-καροτίνης, θα πρέπει να αποφεύγεται η θέρμανση. Αλλά σε ορισμένες περιπτώσεις, η θερμή σαπωνοποίηση είναι απαραίτητη, για παράδειγμα, όταν η αναλογία λίπους προς β-καροτίνη είναι μεγαλύτερη από 1000:1 (γαλακτοκομικά προϊόντα, ζωικά λίπη, μαργαρίνη, αυγά, συκώτι). Η σαπωνοποίηση πραγματοποιείται παρουσία αντιοξειδωτικού. Η περίσσεια αλκαλίων οδηγεί στην καταστροφή της β-καροτίνης. Για να διαχωριστεί το β-καροτένιο από τις συνοδευτικές χρωστικές, χρησιμοποιείται ευρέως η χρωματογραφία προσρόφησης σε στήλες με οξείδιο αλουμινίου, οξείδιο του μαγνησίου.

1. Οι περισσότερες από τις φυσικοχημικές μεθόδους που χρησιμοποιούνται σήμερα για τον προσδιορισμό της β-καροτίνης στα τρόφιμα βασίζονται στη μέτρηση της έντασης απορρόφησης φωτός των διαλυμάτων του. Ως ενώσεις με συζευγμένους διπλούς δεσμούς, τα καροτενοειδή έχουν χαρακτηριστικά UV και ορατά φάσματα απορρόφησης. Η θέση της ζώνης απορρόφησης εξαρτάται από τον αριθμό των συζευγμένων διπλών δεσμών στο μόριο καροτενοειδούς και από τον χρησιμοποιούμενο διαλύτη. Η μέγιστη απορρόφηση της β-καροτίνης παρατηρείται στο βενζόλιο στα 464–465 nm, στο εξάνιο και στον πετρελαϊκό αιθέρα στα 450–451 nm.

2. Πρόσφατα, η μέθοδος HPLC χρησιμοποιείται συχνότερα για τον προσδιορισμό της β-καροτίνης και άλλων καροτενοειδών. Η μέθοδος επιτρέπει τη μείωση του χρόνου ανάλυσης και ως εκ τούτου της πιθανότητας καταστροφής τους υπό τη δράση του φωτός και του ατμοσφαιρικού οξυγόνου. Η μέθοδος HPLC των καροτενοειδών είναι ένα κλασικό παράδειγμα απόδειξης της ικανότητας της μεθόδου να διαχωρίζει και να ποσοτικοποιεί τα χωρικά ισομερή του α- και του β-καροτενίου στα λαχανικά.

Μπορούν επίσης να χρησιμοποιηθούν χημικές μέθοδοι για τον προσδιορισμό της β-καροτίνης, για παράδειγμα, με βάση την αντίδραση με χλωριούχο αντιμόνιο (3+) σε χλωροφόρμιο (μπλε, 590 nm), παρόμοιο με τη βιταμίνη Α, και με αντιδραστήριο Folin (μπλε, 640–700 nm). Ωστόσο, λόγω της μη εξειδίκευσης αυτών των αντιδράσεων, δεν έχουν βρει ευρεία εφαρμογή.

Προσδιορισμός της βιταμίνης Α. Οι πιο σημαντικοί εκπρόσωποι της βιταμίνης είναι, όπως ήδη αναφέρθηκε, η ρετινόλη (Α 1 - αλκοόλη), η ρεντινάλη (Α 1 - αλδεΰδη), το ρετινοϊκό οξύ (Α 2).

Στον ποσοτικό προσδιορισμό της βιταμίνης Α στα τρόφιμα χρησιμοποιούνται διάφορες μέθοδοι: χρωματομετρική, φθορίζουσα, άμεση φασματοσκοπία και HPLC. Η επιλογή της μεθόδου καθορίζεται από τη διαθεσιμότητα του ενός ή του άλλου εξοπλισμού, τον σκοπό της μελέτης, τις ιδιότητες του αναλυόμενου υλικού, την αναμενόμενη περιεκτικότητα σε βιταμίνη Α και τη φύση των συνοδευτικών ακαθαρσιών.

Η απομόνωση της βιταμίνης πραγματοποιείται με βρασμό με αλκοολούχο διάλυμα ΚΟΗ σε περιβάλλον αζώτου. και επακόλουθη εκχύλιση με πετρελαϊκό αιθέρα.

1. Για τον ποσοτικό προσδιορισμό ουσιών με δράση βιταμίνης Α, μπορεί να χρησιμοποιηθεί άμεση φασματοφωτομετρία, με βάση την ικανότητα αυτών των ενώσεων να απορροφούν επιλεκτικά φως σε διαφορετικά μήκη κύματος στην περιοχή UV του φάσματος. Η απορρόφηση είναι ανάλογη με τη συγκέντρωση μιας ουσίας όταν μετράται σε εκείνα τα μήκη κύματος όπου το μέγιστο χαρακτηριστικό απορρόφησης μιας δεδομένης ένωσης παρατηρείται στον χρησιμοποιούμενο διαλύτη. Η μέθοδος είναι η πιο απλή, γρήγορη και αρκετά συγκεκριμένη. Δίνει αξιόπιστα αποτελέσματα στον προσδιορισμό της βιταμίνης Α σε αντικείμενα που δεν περιέχουν ακαθαρσίες με απορρόφηση στην ίδια φασματική περιοχή. Παρουσία τέτοιων ακαθαρσιών, η μέθοδος μπορεί να χρησιμοποιηθεί σε συνδυασμό με ένα στάδιο χρωματογραφικού διαχωρισμού.

2. Μια πολλά υποσχόμενη μέθοδος είναι η μέθοδος φθορισμού που βασίζεται στην ικανότητα της ρετινόλης να φθορίζει υπό τη δράση των ακτίνων UV (συναρπαστικό μήκος κύματος φωτός 330–360 nm). Το μέγιστο φθορισμού παρατηρείται στην περιοχή των 480 nm. Ο προσδιορισμός της βιταμίνης Α με αυτή τη μέθοδο παρεμποδίζεται από τα καροτενοειδή και τη βιταμίνη D. Για την εξάλειψη της παρεμβολής, χρησιμοποιείται χρωματογραφία στην αλουμίνα. Το μειονέκτημα της μεθόδου φθορισμού είναι ο ακριβός εξοπλισμός.

3. Παλαιότερα, η πιο κοινή ήταν η χρωματομετρική μέθοδος για τον προσδιορισμό της βιταμίνης Α με αντίδραση με χλωριούχο αντιμόνιο. Χρησιμοποιήστε ένα διάλυμα χλωριούχου αντιμονίου σε χλωροφόρμιο (αντιδραστήριο Carr-Price). Ο μηχανισμός της αντίδρασης δεν έχει καθοριστεί με ακρίβεια και θεωρείται ότι μια ακαθαρσία SbCL 5 σε SbCl 3 εισέρχεται στην αντίδραση. Η ένωση που σχηματίζεται στην αντίδραση έχει μπλε χρώμα. Η μέτρηση οπτικής πυκνότητας πραγματοποιείται σε μήκος κύματος 620 nm για 3-5 δευτερόλεπτα. Ένα σημαντικό μειονέκτημα της μεθόδου είναι η αστάθεια του αναπτυσσόμενου χρώματος, καθώς και η υψηλή υδρολυσιμότητα του SbCl 3 . Η αντίδραση αναμένεται να έχει ως εξής:

Αυτή η αντίδραση δεν είναι ειδική για τη βιταμίνη Α· τα καροτενοειδή δίνουν παρόμοιο χρώμα, αλλά ο χρωματογραφικός διαχωρισμός αυτών των ενώσεων καθιστά δυνατή την εξάλειψη της παρεμβολής τους.

Ο προσδιορισμός της βιταμίνης Α με τις αναφερόμενες μεθόδους, κατά κανόνα, προηγείται από ένα προπαρασκευαστικό στάδιο, συμπεριλαμβανομένης της αλκαλικής υδρόλυσης ουσιών που μοιάζουν με λίπος και της εκχύλισης του ασαπωνοποιήσιμου υπολείμματος με οργανικό διαλύτη. Συχνά είναι απαραίτητο να πραγματοποιηθεί ένας χρωματογραφικός διαχωρισμός του εκχυλίσματος.

4. Πρόσφατα, αντί για χρωματογραφία στήλης, χρησιμοποιείται όλο και περισσότερο η HPLC, η οποία σας επιτρέπει να διαχωρίζετε τις λιποδιαλυτές βιταμίνες (A, D, E, K), που συνήθως υπάρχουν ταυτόχρονα στα τρόφιμα, και να τις ποσοτικοποιείτε με μεγάλη ακρίβεια. Η HPLC διευκολύνει τον προσδιορισμό διαφόρων μορφών βιταμινών (βιταμίνη Α-αλκοόλη, ισομερή της, εστέρες ρετινόλης), κάτι που είναι ιδιαίτερα απαραίτητο κατά τον έλεγχο της εισαγωγής βιταμινών στα τρόφιμα.

Προσδιορισμός της βιταμίνης Ε. Η ομάδα ουσιών που ενώνεται με την κοινή ονομασία «βιταμίνη Ε» περιλαμβάνει παράγωγα της τοκόλης και της τριενόλης, τα οποία έχουν τη βιολογική δράση της α-τοκοφερόλης. Εκτός από την α-τοκοφερόλη, είναι γνωστές επτά ακόμη σχετικές ενώσεις με βιολογική δράση. Όλα αυτά βρίσκονται σε προϊόντα. Συνεπώς, η κύρια δυσκολία στην ανάλυση της βιταμίνης Ε είναι ότι σε πολλές περιπτώσεις είναι απαραίτητο να ληφθεί υπόψη μια ομάδα ενώσεων που έχουν μεγάλη χημική ομοιότητα, αλλά ταυτόχρονα διαφέρουν στη βιολογική δραστηριότητα, η οποία μπορεί να εκτιμηθεί μόνο με βιολογική μέθοδο. . Είναι δύσκολο και ακριβό, επομένως οι φυσικοχημικές μέθοδοι έχουν σχεδόν αντικαταστήσει πλήρως τις βιολογικές μεθόδους.

Τα κύρια στάδια στον προσδιορισμό της βιταμίνης Ε: προετοιμασία δείγματος, αλκαλική υδρόλυση (σαπωνοποίηση), εκχύλιση του ασαπωνοποιήσιμου υπολείμματος με οργανικό διαλύτη, διαχωρισμός βιταμίνης Ε από παρεμβαλλόμενες ουσίες και διαχωρισμός τοκοφερολών με χρήση διαφόρων τύπων χρωματογραφίας, ποσοτικός προσδιορισμός. Οι τοκοφερόλες είναι πολύ ευαίσθητες στην οξείδωση σε αλκαλικό περιβάλλον, επομένως, η σαπωνοποίηση και η εκχύλιση πραγματοποιούνται σε ατμόσφαιρα αζώτου και παρουσία ενός αντιοξειδωτικού (ασκορβικό οξύ). Όταν σαπωνοποιηθούν, οι ακόρεστες μορφές (τοκοτριενόλες) μπορούν να καταστραφούν. Επομένως, εάν είναι απαραίτητο να προσδιοριστούν όλες οι μορφές βιταμίνης Ε που περιέχονται στο προϊόν, η σαπωνοποίηση αντικαθίσταται από άλλους τύπους επεξεργασίας, για παράδειγμα, κρυστάλλωση σε χαμηλές θερμοκρασίες.

1. Οι περισσότερες φυσικοχημικές μέθοδοι για τον προσδιορισμό της βιταμίνης Ε βασίζονται στη χρήση των οξειδοαναγωγικών ιδιοτήτων των τοκοφερολών. Για τον προσδιορισμό της ποσότητας τοκοφερολών στα τρόφιμα, η αντίδραση αναγωγής του σιδήρου σιδήρου σε σίδηρο με τοκοφερόλες χρησιμοποιείται συχνότερα για να σχηματιστεί ένα έγχρωμο σύμπλοκο Fe(2+) με οργανικά αντιδραστήρια. Το πιο συχνά χρησιμοποιούμενο είναι το 2,2'-διπυριδύλιο, με το οποίο ο Fe(2+) δίνει ένα σύμπλοκο κόκκινου χρώματος (λ max = 500 nm). Η αντίδραση δεν είναι συγκεκριμένη. Μπαίνουν επίσης καροτίνες, στυρένια, βιταμίνη Α κλπ. Επιπλέον, η ένταση του χρώματος εξαρτάται σημαντικά από τον χρόνο, τη θερμοκρασία και το φωτισμό. Επομένως, για να βελτιωθεί η ακρίβεια της ανάλυσης, οι τοκοφερόλες διαχωρίζονται προκαταρκτικά από ενώσεις που παρεμβαίνουν στον προσδιορισμό με στήλη, χρωματογραφία αερίου-υγρού, HPLC. Κατά τον προσδιορισμό της τιμής της βιταμίνης Ε προϊόντων στα οποία η α-τοκοφερόλη αποτελεί περισσότερο από το 80% της συνολικής περιεκτικότητας σε τοκοφερόλη (κρέας, γαλακτοκομικά προϊόντα, ψάρια κ.λπ.), συχνά περιορίζεται στον προσδιορισμό της ποσότητας τοκοφερολών. Όταν άλλες τοκοφερόλες (φυτικά έλαια, δημητριακά, αρτοσκευάσματα, ξηροί καρποί) υπάρχουν σε σημαντικές ποσότητες, χρησιμοποιείται χρωματογραφία στήλης για τον διαχωρισμό τους.

2. Η μέθοδος φθορισμού μπορεί επίσης να χρησιμοποιηθεί για τον προσδιορισμό της ποσότητας των τοκοφερολών. Τα εκχυλίσματα εξανίου έχουν μέγιστο φθορισμό στα 325 nm σε μήκος κύματος διέγερσης 292 nm.

3. Για τον προσδιορισμό μεμονωμένων τοκοφερολών, η μέθοδος HPLC έχει αναμφισβήτητο ενδιαφέρον, παρέχοντας τόσο διαχωρισμό όσο και ποσοτική ανάλυση σε μία διαδικασία. Η μέθοδος χαρακτηρίζεται επίσης από υψηλή ευαισθησία και ακρίβεια. Η ανίχνευση πραγματοποιείται με απορρόφηση ή με φθορισμό.

Προσδιορισμός της βιταμίνης D. Η ποσοτικοποίηση της βιταμίνης στα τρόφιμα είναι εξαιρετικά δύσκολη λόγω της χαμηλής περιεκτικότητάς της, της έλλειψης ευαίσθητων ειδικών αντιδράσεων στη βιταμίνη D και της δυσκολίας διαχωρισμού της από τις σχετικές ουσίες. Μέχρι πρόσφατα, χρησιμοποιήθηκαν βιολογικές μελέτες σε αρουραίους ή κοτόπουλα. Οι βιολογικές μέθοδοι βασίζονται στον καθορισμό της ελάχιστης ποσότητας του προϊόντος δοκιμής που θεραπεύει ή προλαμβάνει τη ραχίτιδα σε αρουραίους (κοτόπουλα) σε ραχιτογονική δίαιτα. Ο βαθμός της ραχίτιδας εκτιμάται ακτινογραφικά. Είναι αρκετά συγκεκριμένο και ακριβής μέθοδος, το οποίο σας επιτρέπει να προσδιορίσετε τη βιταμίνη D σε συγκέντρωση 0,01–0,2 μg%.

1. Στη μελέτη προϊόντων με περιεκτικότητα σε βιταμίνη D μεγαλύτερη από 1 μg%, μπορεί να χρησιμοποιηθεί μια φωτομετρική μέθοδος που βασίζεται στην αντίδραση των καλσιφερολών με το χλωριούχο αντιμόνιο (σχηματίζεται ένα προϊόν ροζ χρώματος). Η μέθοδος επιτρέπει τον προσδιορισμό τόσο της χοληκαλσιφερόλης (D 3) όσο και της εργοκαλσιφερόλης (D 2). Η ανάλυση αποτελείται από τις ακόλουθες λειτουργίες: σαπωνοποίηση (αλκαλική υδρόλυση), καθίζηση στερολών, χρωματογραφία (στήλη ή διαχωρισμός) και φωτομετρική αντίδραση με χλωριούχο αντιμόνιο. Η μέθοδος είναι κατάλληλη για τον προσδιορισμό της περιεκτικότητας σε βιταμίνη D ιχθυέλαιο, αυγά, συκώτι μπακαλιάρου, χαβιάρι, βούτυρο, τροφές εμπλουτισμένες με βιταμίνη. Η περιγραφόμενη μέθοδος είναι επίπονη και χρονοβόρα.

Η βιταμίνη D 2 πρέπει να προστατεύεται από το φως και τον αέρα, διαφορετικά συμβαίνει ισομερισμός. D 3 - πιο σταθερό.

2. Ταχύτερη, πιο αξιόπιστη και ακριβέστερη είναι η ολοένα και περισσότερο χρησιμοποιούμενη μέθοδος HPLC, η οποία χρησιμοποιείται με επιτυχία στην ανάλυση παιδικών και διαιτητικών προϊόντων εμπλουτισμένων με βιταμίνη D.

3. Οι καλσιφερόλες χαρακτηρίζονται από ενδογενή απορρόφηση UV και μπορούν να προσδιοριστούν με άμεση φασματοφωτομετρία.

Τα τελευταία χρόνια, οι μέθοδοι χρωματογραφικού διαχωρισμού, ιδιαίτερα η χρωματογραφία λεπτής στιβάδας και η χρωματογραφία αερίου-υγρού, έχουν χρησιμοποιηθεί με επιτυχία για τον προσδιορισμό της βιταμίνης D. Σε πειραματικές μελέτες για τη μελέτη του μεταβολισμού της βιταμίνης D σε ζώα και ανθρώπους, χρησιμοποιούνται ευρέως ραδιοχημικές μέθοδοι σε συνδυασμό με χρωματογραφία λεπτής στιβάδας ή στήλης σε σιλικαζέλ ή οξείδιο του αργιλίου.

Προσδιορισμός της βιταμίνης Κ. Για τον προσδιορισμό της βιταμίνης Κ, χρησιμοποιούνται φυσικές, χημικές, βιολογικές μέθοδοι, καθώς και φασματοσκοπικές μέθοδοι που βασίζονται στην ευαισθησία της βιταμίνης Κ στην υπεριώδη ακτινοβολία.

Για τον προσδιορισμό των 2-μεθυλο-1,4-ναφθοκινονών, έχουν προταθεί πολλές χρωματομετρικές μέθοδοι που βασίζονται σε χρωματικές αντιδράσεις που δίνουν με έναν αριθμό αντιδραστηρίων: 2,4-δινιτροφαινυλυδραζίνη, Ν,Ν-διαιθυλοδιθειοκαρβαμικό νάτριο, άλατα τετραζολίου κ.λπ. Αλλά όλες αυτές οι μέθοδοι και μια σειρά από άλλες φυσικές και χημικές μεθόδους δεν είναι αρκετά συγκεκριμένες και τα αποτελέσματα που λαμβάνονται με τη βοήθειά τους είναι πολύ σχετικής αξίας για τον προσδιορισμό της περιεκτικότητας σε βιταμίνη Κ σε προϊόντα διατροφής, όργανα και ιστούς ανθρώπων και ζώων. Ικανοποιητικά αποτελέσματα λαμβάνονται με χρωματομετρικές και φασματοφωτομετρικές μεθόδους σε συνδυασμό με χρωματογραφία, καθαρισμό και διαχωρισμό βιταμινών Κ σε στήλες, σε χαρτί ή σε λεπτή στρώση προσροφητικού.



Ο όρος "Βιταμίνες" στη μετάφραση σημαίνει "αμίνες της ζωής". Τώρα υπάρχουν περισσότερες από 30 τέτοιες ουσίες και όλες είναι ζωτικής σημασίας για το ανθρώπινο σώμα, καθώς αποτελούν μέρος όλων των ιστών και κυττάρων, ενεργοποιώντας και καθορίζοντας την πορεία πολλών διεργασιών.

Η ανάγκη για βιταμίνες δεν είναι η ίδια και ποικίλλει ανάλογα με την ηλικιακή περίοδο της ζωής ενός ατόμου, την ασθένεια, τις καιρικές συνθήκες. Η ανάγκη για βιταμίνες αυξάνεται κατά τη διάρκεια της εγκυμοσύνης, κατά τη διάρκεια σωματικού και ψυχικού στρες, με υπερλειτουργία θυρεοειδής αδένας, επινεφριδιακή ανεπάρκεια, στρεσογόνες καταστάσεις.

Πρέπει να σημειωθεί ότι η υπερβιταμίνη, δηλαδή η αυξημένη πρόσληψη βιταμινών στον ανθρώπινο οργανισμό, είναι επίσης δυσμενής για τις μεταβολικές λειτουργίες. Υπερδοσολογία βιταμινών συμβαίνει κυρίως όταν χρησιμοποιούνται συμπυκνωμένα σκευάσματα. Οι περισσότερες βιταμίνες έρχονται στο ανθρώπινο σώμα από φυτά και ένα μικρό μέρος - από ζωικά προϊόντα. Περισσότερες από 20 βιταμίνες δεν μπορούν να συντεθούν στον ανθρώπινο οργανισμό, ενώ άλλες συντίθενται κατά τη διάρκεια εσωτερικά όργανα, και το συκώτι παίζει κυρίαρχο ρόλο σε τέτοιες διαδικασίες.

Επομένως, επιλέγουμε αυτό το θέμα για την έρευνά μας.

Πράγματι, στην εποχή μας, η ανθρώπινη υγεία γίνεται όλο και περισσότερο προτεραιότητα, υγιεινός τρόπος ζωήςΖΩΗ. Τώρα υπάρχουν πολλά διαφορετικά βιολογικά πρόσθετα(BAA), διεγερτικά και φάρμακα που βοηθούν στην προαγωγή της υγείας.

Όμως, δυστυχώς, πρέπει να παραδεχτούμε ότι πολλά παραποιημένα προϊόντα χαμηλής ποιότητας μπαίνουν επίσης στο δίκτυο των φαρμακείων. Μετά το εμπόριο όπλων, ναρκωτικών, η παραποίηση φαρμάκων καταλαμβάνει μια επαίσχυντη τρίτη θέση. Πρέπει να σημειωθεί ότι τα σκευάσματα βιταμινών και σύμπλοκα βιταμινώνΣε καμία περίπτωση φθηνά προϊόντα, είναι ακριβά. Είχε ενδιαφέρον να μάθουμε τι κρύβεται πίσω από τις ετικέτες των φαρμάκων που πωλούνται στα φαρμακεία της πόλης μας. Δεν μπορούμε να κάνουμε ποιοτική ανάλυση όλων των απολύτως φαρμάκων, χρειαζόμαστε συγκεκριμένα αντιδραστήρια, εργαλεία, μεθόδους. Στις ερευνητικές μας δραστηριότητες χρησιμοποιήσαμε τις μεθόδους ποιοτική ανάλυση Kucherenko N. E., Severina S. E. σχετικά με τον ορισμό των βιταμινών.

Υπόθεση: υποθέτουμε ότι πίσω από τις ετικέτες των φαρμακευτικών βιταμινών δεν υπάρχουν παραποιημένες βιταμίνες, αλλά φυσικά παρασκευάσματα, αφού η υγεία ενός ατόμου και των κατοίκων του Αμούρ είναι η υψηλότερη αξία.

Αντικείμενο μελέτης: σκευάσματα βιταμινών που αγοράζονται σε φαρμακεία της πόλης.

Ο σκοπός της εργασίας μας: να διεξαγάγουμε μια ποιοτική ανάλυση βιταμινών που αγοράζονται σε φαρμακεία στο Amursk και στο Komsomolsk-on-Amur.

Ως εκ τούτου, τέθηκαν τα ακόλουθα καθήκοντα:

1. Εξοικειωθείτε με τα χαρακτηριστικά των κύριων βιταμινών.

2. Διεξαγωγή ποιοτικής ανάλυσης φαρμάκων.

3. Συγκρίνετε τα αποτελέσματα που προέκυψαν με την πορεία της μελέτης.

4. Εξάγετε συμπεράσματα.

Υλικά και εξοπλισμός: ένα σύνολο βιταμινών, χημικά αντιδραστήρια, μέθοδοι ποιοτικής ανάλυσης Kucherenko N. E., Severina S. E. για τον προσδιορισμό των βιταμινών.

1. Χαρακτηριστικά βιταμινών.

Για να είναι ένα άτομο δυνατό και υγιές, χρειάζεται βιταμίνες. Όλοι το ξέρουμε αυτό από την παιδική ηλικία. Αλλά σπάνια σκεφτόμαστε τι είδους ουσίες είναι αυτές - βιταμίνες. Και όταν μιλάμε για αυτά, φανταζόμαστε απλώς ένα κουτί με χρωματιστά κουφέτα ή ένα μπολ με φρούτα. Ένα άτομο μακριά από την ιατρική χρειάζεται να γνωρίζει περισσότερα για τις βιταμίνες; Ναι, είναι απαραίτητο - τουλάχιστον για να γίνει

Για άλλη μια φορά, συνειδητοποιήστε πόσο σημαντική είναι μια ποικίλη διατροφή. Σήμερα, ακόμη και οι γιατροί ζητούν να στοιχηματίσουν όχι σε σκευάσματα βιταμινών φαρμακείου, αλλά σε πλούσια σε βιταμίνες. φυσικά προϊόντα(πρώτα απ 'όλα, αυτά είναι λαχανικά και φρούτα, αλλά όχι μόνο). Λοιπόν, τι είναι οι βιταμίνες και πού τις λαμβάνετε για τις ανάγκες του οργανισμού;

Οι βιταμίνες σχηματίζονται με βιοσύνθεση σε φυτικά κύτταρα και ιστούς. Τα περισσότερα από αυτά συνδέονται με πρωτεϊνικούς φορείς. Συνήθως στα φυτά δεν είναι σε ενεργή, αλλά ιδιαίτερα οργανωμένη μορφή και, σύμφωνα με έρευνες, σε πολύ κατάλληλη μορφήγια χρήση από τον οργανισμό, συγκεκριμένα με τη μορφή προβιταμινών.

Οι βιταμίνες παρέχουν μια οικονομική και βέλτιστη χρήση των απαραίτητων θρεπτικών συστατικών από τον οργανισμό.

Η έλλειψη βιταμινών προκαλεί σοβαρές διαταραχές. Οι λανθάνουσες μορφές ανεπάρκειας βιταμινών δεν έχουν έντονες εξωτερικές εκδηλώσεις και συμπτώματα. Συχνά, το μόνο για το οποίο παραπονιέται ένα άτομο είναι η κούραση, η μειωμένη απόδοση και η γενική αδυναμία. Επίσης με υποβιταμίνωση

Το σώμα είναι λιγότερο ανθεκτικό σε κάθε είδους δυσμενείς παράγοντες. Χρειάζεται περισσότερος χρόνος για την αποκατάσταση των φυσιολογικών λειτουργιών μετά από ασθένειες και είναι πιο επιρρεπής σε διάφορες επιπλοκές.

Όλες οι βιταμίνες χωρίζονται σε δύο μεγάλες ομάδες: τις υδατοδιαλυτές και τις λιποδιαλυτές. Οι υδατοδιαλυτές βιταμίνες περιλαμβάνουν όλες τις βιταμίνες Β, τις βιταμίνες PP, H, C, P και τις λιποδιαλυτές βιταμίνες A, E, K, D.

Τώρα ας ρίξουμε μια πιο προσεκτική ματιά στις πιο διάσημες βιταμίνες.

Ριβοφλαβίνη (Β2)

Η ριβοφλαβίνη είναι μια βιταμίνη του δέρματος. Είναι υπεύθυνο για τη διατήρηση του δέρματος υγιές, απαλό και λείο. Επιπλέον, αυτή η βιταμίνη είναι απαραίτητη για τα μάτια (για παράδειγμα, για φλεγμονή των ματιών, συνιστάται η λήψη 3 mg ριβοφλαβίνης 3 φορές την ημέρα πριν από τα γεύματα).

Η ανεπάρκεια ριβοφλαβίνης δεν προκαλεί μόνο δερματικές ασθένειες, αλλά και πεπτικές διαταραχές, χρόνια κολίτιδα και γαστρίτιδα, παθήσεις νευρικό σύστημακαι γενική αδυναμία, οδηγεί σε μείωση της αντίστασης του οργανισμού στις λοιμώξεις.

Πυριδοξίνη (Β6)

Αυτή η βιταμίνη είναι πολύ σημαντική για τον οργανισμό, καθώς συμβάλλει καλύτερη αφομοίωσηακόρεστα λιπαρά οξέα.

Επιπλέον, η πυριδοξίνη είναι απαραίτητη για τη λειτουργία των μυών: μαζί με το ασβέστιο, συμβάλλει στην αποτελεσματική λειτουργία τους και στην πλήρη χαλάρωση. Έχει διαπιστωθεί ότι η ανεπάρκεια πυριδοξίνης μπορεί να γίνει παράγοντας που προκαλεί την ανάπτυξη μέσης ωτίτιδας.

Ασκορβικό οξύ (βιταμίνη C)

Αυτή η βιταμίνη εκτελεί πολλές διαφορετικές λειτουργίες στο σώμα. Χωρίς τη συμμετοχή του, οι διεργασίες οξειδοαναγωγής δεν είναι ολοκληρωμένες, αυξάνει την ελαστικότητα και τη δύναμη αιμοφόρα αγγεία, μαζί με τη βιταμίνη Α, προστατεύει τον οργανισμό από μολύνσεις, μπλοκάρει τις τοξικές ουσίες στο αίμα και είναι απαραίτητο για την ενίσχυση των δοντιών και των ούλων.

Επιπλέον, επαρκής πρόσληψη ασκορβικού οξέος είναι επίσης απαραίτητη για την αύξηση του προσδόκιμου ζωής, καθώς εμπλέκεται στη δημιουργία και επούλωση των συνδετικών ιστών.

Δεν είναι δύσκολο να καταλάβει κανείς ότι η ανεπάρκεια βιταμίνης C είναι πολύ επικίνδυνη. Εν τω μεταξύ, το σώμα δεν έχει την ευκαιρία να τα αποθηκεύσει για το μέλλον, επομένως πρέπει να λαμβάνετε τακτικά ασκορβικό οξύ (ως μέρος της τροφής και ακόμη και με τη μορφή φαρμακευτικού σκευάσματος). Μην φοβάστε την υπερβολική δόση: η βιταμίνη δεν είναι τοξική και η περίσσεια της αποβάλλεται εύκολα από τους οργανισμούς.

Νικοτινικό οξύ (PP)

Αυτή η βιταμίνη εμπλέκεται σε πολλές οξειδωτικές αντιδράσεις. Η έλλειψή του, που συχνά συνδέεται με τη μονοτονία της διατροφής (για παράδειγμα, όταν τρώμε αποκλειστικά δημητριακά), συμβάλλει στην ανάπτυξη της πελλάγρας.

Ρετινόλη (Βιταμίνη Α)

Η βιταμίνη Α παρατείνει τη νεότητα, ομαλοποιεί το μεταβολισμό, συμμετέχει στη διαδικασία ανάπτυξης, προστατεύει το δέρμα και τους βλεννογόνους από βλάβες. Στο σώμα των ζώων και των ανθρώπων, σχηματίζεται από καροτίνη (τη λεγόμενη προβιταμίνη Α).

Με ανεπάρκεια αυτής της βιταμίνης, η όραση επιδεινώνεται, η κατάσταση του δέρματος αλλάζει (γίνεται ξηρό, μπορεί να εμφανιστεί μικρό εξάνθημα), αρχίζει η τριχόπτωση.

Καλσιφερόλη (βιταμίνη D)

Τα κύρια καθήκοντα της βιταμίνης D στον οργανισμό είναι η προώθηση της απορρόφησης του ασβεστίου και η ρύθμιση της ισορροπίας φωσφόρου-ασβεστίου. Συμμετέχει ενεργά στη διαδικασία σχηματισμού και ανάπτυξης του οστικού ιστού.

Επιπλέον, η βιταμίνη D είναι απαραίτητη για τη φυσιολογική πήξη του αίματος και τη λειτουργία της καρδιάς. Συμμετέχει επίσης στη ρύθμιση της διεγερσιμότητας του νευρικού συστήματος.

Παρά το γεγονός ότι ελάχιστες τροφές περιέχουν βιταμίνη D, και μάλιστα όχι σε μεγάλους αριθμούς, η έλλειψή του δεν είναι τόσο συχνή. Το γεγονός είναι ότι το σώμα μπορεί να το παράγει μόνο του υπό την επίδραση της υπεριώδους ακτινοβολίας (γι' αυτό η βιταμίνη D ονομάζεται επίσης «βιταμίνη του ήλιου»). Επιπλέον, για αυτό δεν χρειάζεται να κάνετε ηλιοθεραπεία για ώρες κάτω από τις καυτές ακτίνες του ήλιου, αρκεί μόνο για λίγα λεπτά την ημέρα να βγείτε στο δρόμο κατά τη διάρκεια της ημέρας.

Παρεμπιπτόντως, στο σώμα των ατόμων με ανοιχτόχρωμο δέρμα, η βιταμίνη D σχηματίζεται 2 φορές πιο γρήγορα από ό,τι σε άτομα με σκούρο δέρμα.

Τοκοφερόλη (Βιταμίνη Ε)

Η βιταμίνη Ε είναι γνωστή ως «βιταμίνη γονιμότητας» επειδή είναι απαραίτητη για την αναπαραγωγή των απογόνων. Επιπλέον, διασφαλίζει τη φυσιολογική λειτουργία του καρδιακού μυός και αποτρέπει το σχηματισμό θρόμβων αίματος στα αιμοφόρα αγγεία.

Πρόσφατα, η τοκοφερόλη έχει χρησιμοποιηθεί αποτελεσματικά στη θεραπεία του διαβήτη και του άσθματος.

Η βιταμίνη Ε είναι μη τοξική, αλλά η υπερβολική περιεκτικότητά της στο σώμα οδηγεί σε αύξηση της αρτηριακής πίεσης.

Η τοκοφερόλη πρέπει να λαμβάνεται μόνο σε συνδυασμό με ρετινόλη (βιταμίνη Α).

Ενισχύει τη διαπερατότητα των τοιχωμάτων των αιμοφόρων αγγείων, μειώνει την οξείδωση του ασκορβικού οξέος, συμβάλλει στην καλύτερη ανοχή σε στρεσογόνες καταστάσεις.

Τώρα που μάθαμε πολλά για τον ρόλο των βιταμινών και πόσο χρήσιμες είναι, έχουμε μια ερώτηση: «Από πού μπορείτε να τις προμηθευτείτε;» Αυτή η ερώτηση απέχει πολύ από το να είναι αδρανής. Μπορείτε να καταναλώνετε φαρμακευτικές συνθετικές βιταμίνες, αλλά οι ειδικοί προειδοποιούν ότι τέτοιες βιταμίνες δεν απορροφώνται πάντα. Και τότε, γιατί να καταφύγετε σε τεχνητά μέσα, εάν μπορείτε να πάρετε βιταμίνες απευθείας από τα τρόφιμα.

2. Περιγραφή φαρμάκων.

Οι βιταμίνες είναι ουσίες απαραίτητες για τον οργανισμό, η παρουσία των οποίων είναι θεμελιώδους σημασίας για τον φυσιολογικό μεταβολισμό και τη διατήρηση της ζωής γενικότερα. Πρόκειται για οργανικές ενώσεις χαμηλού μοριακού βάρους. Οι περισσότερες βιταμίνες δεν συντίθενται στον ανθρώπινο οργανισμό και ως εκ τούτου η πρόσληψή τους με την τροφή είναι εξαιρετικά σημαντική. (Εξαίρεση αποτελεί η βιταμίνη D). Σε σύγκριση με τα απαραίτητα θρεπτικά συστατικά, οι βιταμίνες πρέπει να παρέχονται σε αμελητέες ποσότητες. Ταυτόχρονα, η ανεπάρκεια ή η απουσία μιας ή άλλης βιταμίνης προκαλεί διάφορες ασθένειεςκαι φυσιολογικές διαταραχές.

Εισαγωγή

Κεφάλαιο 1. γενικά χαρακτηριστικάβιταμίνη C

1.1 Σύντομη ιστορική αναδρομή

2 Η θέση της βιταμίνης C στη σύγχρονη ταξινόμηση των βιταμινών

3 Χημική δομήκαι ιδιότητες της βιταμίνης C

4 Ο βιολογικός ρόλος της βιταμίνης C

1.4.2 Σημάδια υπο-, υπερ- και αβιταμίνωση

4.3 καθημερινή απαίτησησε βιταμίνη C

Κεφάλαιο 2. Πειραματικός προσδιορισμός της ποσοτικής περιεκτικότητας σε βιταμίνη C σε τρόφιμα και παρασκευάσματα βιταμινών

1 Γενικά χαρακτηριστικά των εφαρμοζόμενων ποσοτικών μεθόδων ανάλυσης

1.1 Μέθοδος Tillmans

1.2 Μέθοδος Ιωδομετρίας

2 Χημική ανάλυσηπεριεκτικότητα σε βιταμίνη C κατά τη μέθοδο Tillmans σε μήλα εγχώριων και εισαγόμενων ποικιλιών

3 Ιωδομετρικός προσδιορισμός της περιεκτικότητας σε βιταμίνη C

3.1 Ιωδομετρικός προσδιορισμός της περιεκτικότητας σε βιταμίνη C σε σκευάσματα βιταμινών

3.2 Ιωδομετρικός προσδιορισμός της περιεκτικότητας σε βιταμίνη C στους χυμούς φρούτων

συμπέρασμα

Βιβλιογραφία

Εφαρμογή

Εισαγωγή

«Είναι δύσκολο να βρεθεί ένα τέτοιο τμήμα της φυσιολογίας και της βιοχημείας που να μην έρχεται σε επαφή με το δόγμα των βιταμινών. ο μεταβολισμός, η δραστηριότητα των αισθητηρίων οργάνων, οι λειτουργίες του νευρικού συστήματος, τα φαινόμενα ανάπτυξης και αναπαραγωγής - όλα αυτά και πολλά άλλα διαφορετικά και θεμελιώδη στη σημασία τους τομείς της βιολογικής επιστήμης σχετίζονται στενά με τις βιταμίνες "

ΕΝΑ. Μπαχ

Συνάφεια του θέματος. Ισορροπημένη διατροφήΟ άνθρωπος αποτελείται από τρόφιμα ζωικής και φυτικής προέλευσης και μία από τις προϋποθέσεις του είναι η παρουσία επαρκούς ποσότητας βιταμινών.

Βιταμίνες - οργανικές ενώσεις μικρού μοριακού βάρους ποικίλης χημικής φύσης, οι οποίες είναι απαραίτητες για ένα άτομο για κανονική ζωή. Ένα από τα πιο σημαντικά φυσικά αντιοξειδωτικά είναι η βιταμίνη C (ασκορβικό οξύ), η οποία, επιπλέον, συμμετέχει σε μια σειρά βιοχημικών διεργασιών. Καθένας από εμάς χρειάζεται καθημερινά συμπληρώματα βιταμινών και μετάλλων για να διατηρήσει την κανονική λειτουργία του οργανισμού.

Πρώτον, το ανθρώπινο σώμα παράγει μόνο πολύ λίγες βιταμίνες και σε μικρές ποσότητες. Και μπορούμε να πάρουμε βιταμίνη C μόνο με φαγητό ή ως ειδικά σκευάσματα.

Δεύτερον, είναι δύσκολο να πάρεις βιταμίνη C στη φυσική της μορφή. Σύμφωνα με τους ειδικούς, ακόμη και στην πιο υγιεινή και ισορροπημένη διατροφή, είναι εύκολο να ανιχνευθεί ανεπάρκεια βιταμινών - περίπου το 20-30% της συνιστώμενης ποσότητας. Λίγοι άνθρωποι, και ειδικά τα παιδιά, τρώνε αρκετά φρούτα και λαχανικά, τα οποία είναι οι κύριες διατροφικές πηγές βιταμίνης C. Το μαγείρεμα, η αποθήκευση και η βιοχημική επεξεργασία καταστρέφουν μεγάλο μέρος της βιταμίνης C που διαφορετικά θα μπορούσαμε να λάβουμε από τα τρόφιμα. Ακόμη περισσότερο από αυτό καίγεται στο σώμα υπό την επίδραση του στρες, του καπνίσματος και άλλων πηγών κυτταρικής βλάβης, όπως ο καπνός και η αιθαλομίχλη. Φάρμακα που χρησιμοποιούνται συνήθως όπως η ασπιρίνη ή αντισυλληπτικά, στερούν σε μεγάλο βαθμό τον οργανισμό μας από εκείνες τις ποσότητες της βιταμίνης που καταφέραμε ακόμα να πάρουμε.

Τρίτον, στη Ρωσία μόνο το 20% του πληθυσμού παίρνει σκευάσματα βιταμινών. Το ποσοστό είναι απογοητευτικό, ειδικά αν ληφθεί υπόψη ότι η έλλειψη βιταμινών παρατηρείται στο 60-80% του πληθυσμού (σύμφωνα με το Ινστιτούτο Διατροφής της Ρωσικής Ακαδημίας Ιατρικών Επιστημών). Ποιες τροφές όμως περιέχουν βιταμίνη C και πόσο; Η απάντηση σε αυτό το ερώτημα βρίσκεται σε διάφορα βιβλία αναφοράς. Ωστόσο, μιλάει για φρούτα ή λαχανικά γενικά, αλλά πόση βιταμίνη C περιέχει αυτό το προϊόν; Η απάντηση σε αυτό το ερώτημα μπορεί να δοθεί μόνο με ποσοτικό προσδιορισμό χρησιμοποιώντας διάφορες μεθόδους οξειδοαναγωγής τιτλοδότησης.

Σκοπός της εργασίας: η μελέτη της βιοχημικής φύσης της βιταμίνης C και ο προσδιορισμός της ποσοτικής της περιεκτικότητας σε ορισμένα τρόφιμα και σκευάσματα βιταμινών.

Αντικείμενο της έρευνας είναι η χημική δομή και οι ιδιότητες της βιταμίνης C, οι βιολογικοί και βαλεολογικοί της ρόλοι.

Αντικείμενο της μελέτης είναι τα τρόφιμα που περιέχουν βιταμίνη C και ορισμένα σκευάσματα βιταμινών.

Διεξαγωγή ανάλυσης της δημοφιλούς επιστήμης και της εκπαιδευτικής βιβλιογραφίας σχετικά με το επιλεγμένο θέμα.

Εξετάστε τα γενικά χαρακτηριστικά, τη χημική δομή και τις ιδιότητες της βιταμίνης C.

Να μελετήσει τον βιολογικό και βαλεολογικό ρόλο της βιταμίνης C.

Κατακτήστε τις μεθόδους ποιοτικού και ποσοτικού προσδιορισμού της βιταμίνης C και προσδιορίστε πειραματικά την περιεκτικότητά της σε ορισμένα τρόφιμα και παρασκευάσματα βιταμινών.

Συνοψίστε τα αποτελέσματα της μελέτης και διατυπώστε συμπεράσματα για την εργασία.

Μέθοδοι έρευνας: θεωρητική (ανάλυση εκπαιδευτικής και λαϊκής επιστημονικής βιβλιογραφίας για το ερευνητικό θέμα, μεθοδολογική ανάλυση, σύγκριση, θεωρητική γενίκευση), πειραματική (χημικό πείραμα), στατιστική (στατιστική επεξεργασία των αποτελεσμάτων και ερμηνεία τους).

Θεωρητική σημασία: μελετήθηκαν τα γενικά χαρακτηριστικά, η χημική δομή, οι ιδιότητες της βιταμίνης C και ο βιολογικός της ρόλος, προσδιορίστηκε ο τόπος αυτή η βιταμίνηστη γενική κατάταξη.

Πρακτική σημασία: πραγματοποιήθηκε ποσοτική ανάλυση (ιωδομετρία, μέθοδος Tillmans) της περιεκτικότητας σε βιταμίνη C στα μήλα, στους χυμούς φρούτων και στα πιο κοινά σκευάσματα βιταμινών. τη δυνατότητα χρήσης του συλλεγόμενου υλικού και των δεδομένων που λαμβάνονται στη μελέτη βιολογικών και χημικών κλάδων στο σχολείο και στο πανεπιστήμιο.

Κεφάλαιο 1. Γενικά χαρακτηριστικά της βιταμίνης C

Σε αυτό το κεφάλαιο, θα επικεντρωθούμε στα θέματα της ιστορίας της μελέτης, της ταξινόμησης, της χημικής δομής, των ιδιοτήτων και του βιολογικού ρόλου της βιταμίνης C.

1 Σύντομη ιστορική αναδρομή

Το δόγμα των βιταμινών άρχισε να αναπτύσσεται σχετικά πρόσφατα και αναφέρεται στα τέλη του 19ου αιώνα και στις αρχές του 20ου αιώνα. Ωστόσο, οι ασθένειες, που αργότερα ονομάστηκαν αβιταμίνωση, είναι γνωστές εδώ και πολύ καιρό. Έτσι, πριν από 2500 χρόνια, οι Κινέζοι περιέγραψαν την ασθένεια beriberi (αβιταμίνωση Β 1). Η αναφορά της αιμερολωπίας (αβιταμίνωση Α) βρίσκεται στα χειρόγραφα των αρχαίων Ελλήνων. Οι πρώτες πληροφορίες για το σκορβούτο (αβιταμίνωση C) χρονολογούνται από τον 13ο αιώνα. Όταν οι ρωμαϊκές λεγεώνες εισέβαλαν στις κτήσεις των βόρειων γειτόνων τους και παρέμειναν για μεγάλο χρονικό διάστημα πέρα ​​από τον Ρήνο, έπρεπε να εξοικειωθούν με μια ασθένεια που έπληξε πολλούς στρατιώτες και, αν κρίνουμε από την περιγραφή του αρχαίου Ρωμαίου ιστορικού Πλίνιου, πολύ παρόμοια με το σκορβούτο . Είναι ενδιαφέρον ότι οι γιατροί, μη έχοντας πραγματική κατανόηση της φύσης της καταστροφής που έπληξε τον στρατό υπό τη φροντίδα τους, βρήκαν γρήγορα μια σωτήρια θεραπεία. Αποδείχθηκε ότι ήταν κάποιο είδος φυτού, που οι Ρωμαίοι το αποκαλούσαν "Βρετανικό γρασίδι". Δυστυχώς, η ιστορία δεν έχει διατηρήσει πιο σαφείς πληροφορίες για αυτό το φαρμακευτικό φυτό και δεν μπορούμε τώρα να αναφέρουμε ακριβώς ποιος εκπρόσωπος της ευρωπαϊκής χλωρίδας παρείχε μια τόσο πολύτιμη υπηρεσία στην αρχαία Ρώμη. Έτσι οι Ρωμαίοι, ίσως για πρώτη φορά, συναντήθηκαν με μπέρι-μπέρι. Ο Cartier το 1953 περιέγραψε πολύ παραστατικά αυτή την ασθένεια που έπληξε τους συντρόφους του κατά τη διάρκεια ενός ταξιδιού κατά μήκος του ποταμού St. , τα γόνατα, οι μηροί, οι γλουτοί, οι ώμοι, τα μπράτσα, μια δυσάρεστη μυρωδιά άρχισε να βγαίνει από το στόμα, τα ούλα ήταν τόσο σάπια που όλο το κρέας ήταν ορατό στις ρίζες των δοντιών και τα ίδια τα δόντια έπεσαν σχεδόν όλα έξω.

Στο μέλλον, το σκορβούτο, ή το πένθος, έγινε αρκετά συχνός επισκέπτης στις ευρωπαϊκές χώρες. Έτσι, για παράδειγμα, σύμφωνα με τους υπολογισμούς ορισμένων ιστορικών, από το 1556 έως το 1856 στην Ευρώπη υπήρχαν 114 επιδημίες που οδήγησαν πολλές χιλιάδες στον τάφο. ανθρώπινες ζωές. Στη Ρωσία καταγράφηκαν 101 χιλιάδες κρούσματα σκορβούτου. Το σκορβούτο προκάλεσε μεγάλη ζημιά στα πληρώματα των στόλων των ευρωπαϊκών χωρών, ιδιαίτερα κατά το άνοιγμα των θαλάσσιων δρόμων προς την Ινδία και την Αμερική. Το 1848, ο Βάσκο ντα Γκάμα, ανοίγοντας το δρόμο για τη χώρα του μπαχάρι και της κανέλας, έχασε 100 από τα 160 μέλη της ομάδας του από σκορβούτο.

Εικ.1 Βάσκο ντα Γκάμα 2 Θαλάσσιος δρόμος προς την Ινδία (1497-1499)

Το 1775, ο Άγγλος γιατρός Lind δήλωσε ότι το σκορβούτο είχε προκαλέσει μεγαλύτερη ζημιά στη βρετανική ναυτική δύναμη από το ναυτικό της Γαλλίας και της Ισπανίας μαζί. Στο τέλος, οι ναυτικοί βρήκαν ένα φάρμακο για αυτή τη «μάστιγα του ανθρώπινου γένους». Οι παλιοί λύκοι της θάλασσας είπαν ότι το σκορβούτο είναι τρομερό μόνο στη θάλασσα, αλλά μόλις το πλοίο προσγειωθεί και αναπληρώσει τις προμήθειες τροφίμων με φρέσκα φρούτα και λαχανικά, το σκορβούτο φεύγει από το πλοίο. Δεν μπορούσαν πραγματικά να εξηγήσουν γιατί συνέβαινε αυτό, αλλά για την περίπτωση που είχαν ένα μπουκάλι χυμό λεμονιού στο ντουλάπι τους. Αυτές οι πληροφορίες ενδιέφεραν τον Αγγλίδα γιατρό Linda και αποφάσισε να πραγματοποιήσει μια συγκριτική μελέτη των αντισκορβουτικών ιδιοτήτων διαφόρων φρούτων και λαχανικών. Εμπειρικά, ο Lind καθιέρωσε την ημερήσια δόση χυμού λεμονιού, που προστατεύει έναν άνθρωπο από το σκορβούτο, αποδείχθηκε ότι ήταν 30 τόνοι, δηλ. δύο κουταλιές της σούπας.

Έχουν γίνει διάφορες υποθέσεις σχετικά με τα αίτια του σκορβούτου. Ο ένοχος αυτής της ασθένειας θεωρήθηκε στην αρχή μια άσχημη μυρωδιά, μετά το χαλασμένο νερό, το καλαμποκάλευρο, ακόμη και ορισμένα παθογόνα από τον κόσμο των μικροβίων που δεν είχαν καθιερωθεί από την επιστήμη. Η εργασία των Νορβηγών επιστημόνων Holst και Fröhlich έφερε σαφήνεια σε αυτό το ζήτημα. Οι επιστήμονες κατέληξαν στο συμπέρασμα ότι το σκορβούτο στα ινδικά χοιρίδια προκαλείται από έναν συγκεκριμένο παράγοντα που σχεδόν απουσιάζει στα δημητριακά, το corned beef, αλλά βρίσκεται σε μεγάλες ποσότητες στα φρέσκα λαχανικά, τα φρούτα και το χυμό λεμονιού. Τα έργα των Holst και Fröhlich δημοσιεύθηκαν το 1912, είχαν μεγάλη επιρροή στη διαμόρφωση της θεωρίας των βιταμινών του Funk και του επέτρεψαν να ταξινομήσει το σκορβούτο ως beriberi. Ξεκίνησε η αναζήτηση τρόπων απομόνωσης της αντισκορβουτικής βιταμίνης, η οποία συνεχίστηκε με ποικίλη επιτυχία μέχρι το 1932. Το 1932, μια βιταμίνη που αποτρέπει το σκορβούτο απομονώθηκε από το χυμό λεμονιού από τους Αμερικανούς ερευνητές S. Glen, καθώς και από τον Ούγγρο βιοχημικό Szent Györgyi (Εικ. 3).

Εικ.3 Albert Szent-Györgyi

Σε πειράματα για ινδικά χοιρίδιαέδειξε ότι το εξουρονικό οξύ προστάτευε τα ζώα από το σκορβούτο. Αλλά μια βαθιά μελέτη της χημικής φύσης του εξουρονικού οξέος έδειξε ότι εξακολουθεί να μην είναι ισομερές γλυκουρονικού οξέος, αλλά είναι μια εντελώς ανεξάρτητη ένωση, σε σχέση με την οποία ο Szent-Györgyi το 1933 του έδωσε το όνομα - ασκορβικό (αντισκορβουτικό) οξύ. Το 1933, δύο επιστήμονες, ο Hirst και ο Euler, καθιέρωσαν ανεξάρτητα τη δομική φόρμουλα του ασκορβικού οξέος.

2 Θέση βιταμίνης C μέσα σύγχρονη ταξινόμησηβιταμίνες

Η σύγχρονη ταξινόμηση των βιταμινών δεν είναι τέλεια. Μπορεί να βασίζεται στις φυσικοχημικές τους ιδιότητες (ιδίως τη διαλυτότητα) και τη χημική φύση του , .

Ανάλογα με τη διαλυτότητα, όλες οι βιταμίνες χωρίζονται σε δύο μεγάλες ομάδες: υδατοδιαλυτές (βιταμίνες ενζύμων) και λιποδιαλυτές (ορμονοβιταμίνες). Αυτό σας επιτρέπει να προσδιορίσετε σε καθεμία από αυτές τις ομάδες τα δικά τους χαρακτηριστικά και να προσδιορίσετε τις εγγενείς μεμονωμένες ιδιότητές τους. Οι υδατοδιαλυτές βιταμίνες συμμετέχουν στη δομή και τη λειτουργία των ενζύμων, οι λιποδιαλυτές βιταμίνες περιλαμβάνονται στη δομή των μεμβρανικών συστημάτων, διασφαλίζοντας τη λειτουργική τους κατάσταση.

Εκτός από αυτές τις δύο κύριες ομάδες βιταμινών, υπάρχει μια ομάδα από διάφορες χημικές ουσίες που συντίθενται μερικώς στον οργανισμό και έχουν βιταμίνες. Για τον άνθρωπο και έναν αριθμό ζώων, αυτές οι ουσίες συνήθως συνδυάζονται σε μια ομάδα - που μοιάζει με βιταμίνες (βλ. Πίνακα 1).

Τραπέζι 1 Γενική ταξινόμησηβιταμίνες και ουσίες που μοιάζουν με βιταμίνες

Λιποδιαλυτές βιταμίνες	Υδατοδιαλυτές βιταμίνες	Ουσίες που μοιάζουν με βιταμίνες
Βιταμίνη Α (ρετινόλη)	Βιταμίνη Β1 (θειαμίνη)	Πανγαμικό οξύ (βιταμίνη Β12)
Προβιταμίνες Α (καροτίνες)	Βιταμίνη Β2 (ριβοφλαβίνη)	Παρααμινοβενζοϊκό οξύ (βιταμίνη Η1)
Βιταμίνη D (καλσιφερόλες)	Βιταμίνη PP (νικοτινικό οξύ)	Οροτικό οξύ (βιταμίνη Β13)
Βιταμίνη Ε (τοκοφερόλες)	Βιταμίνη Β6 (πυριδοξίνη)	Χολίνη (Βιταμίνη Β4)
Βιταμίνη Κ (φυλλοκινόνες)	Βιταμίνη Β12 (κυανοκοβαλαμίνη)	Ινοσιτόλη (βιταμίνη Β8)
	Φολικό οξύ, φυλλασίνη (Βιταμίνη Bc)	Καρνιτίνη (Βιταμίνη W)
	Παντοθενικό οξύ (βιταμίνη Β3)	Πολυακόρεστα λιπαρά οξέα (βιταμίνη F)
	Βιοτίνη (βιταμίνη Η)	S - χλωριούχο σουλφόνιο μεθυλομεθειονίνη (βιταμίνη U)
	Λιποϊκό οξύ, (βιταμίνη Ν)
	Βιταμίνη C (ασκορβικό οξύ)

Η λεγόμενη χημική ταξινόμηση των βιταμινών βασίζεται στη χημική τους φύση. Ωστόσο, οι βιταμίνες είναι μια χημικά συνδυασμένη ομάδα οργανικών ενώσεων, επομένως, από την άποψη της χημικής δομής, δεν μπορούν να χορηγηθούν γενικός ορισμός(βλ. Πίνακα 2).

πίνακας 2 Χημική ταξινόμησηβιταμίνες

Βιταμίνες της σειράς αλειφατικών	Αλεικυκλικές βιταμίνες	Αρωματικές βιταμίνες	Ετεροκυκλικές βιταμίνες
Ακόρεστα λιπαρά οξέα (F)	Βιταμίνες κυκλοεξανίου (iposit)	Αμινο-υποκατεστημένα αρωματικά οξέα (βιταμίνη Η1)	Βιταμίνες χρωμίου (gr.E)
Παράγωγα λακτονών ακόρεστων πολυυδροξυκαρβοξυλικών οξέων (ασκορβικό οξύ)	Βιταμίνες κυκλοεξανίου με ισοπρενοειδή αλυσίδα πολυενίου (ρετινόλες, βιταμίνες γρ. Α)	Παράγωγα ναφθοκινοΐνης (gr. K)	Βιταμίνες φαινολοχρωμάνης (gr.P)
Αμινοαλκοόλες (χολίνη)	Κυκλοεξανοαιθυλενοϋδροστερόλη βιταμίνες γρ.Δ		Πυριδινοκαρβοξυλικό (gr. PP)
Πανγαμικά οξέα (Β15)			Οξυμεθυλένιο-πυριδίνη (gr. B6)
			Πυριμιδινοθειαζόλες (γρ. Β1)
			Πτερικό (γρ. Φολικό οξύ)
			Ισοαλξαζίνη (γρ. Β2)

Έτσι, σύμφωνα με τις δύο ταξινομήσεις που δίνονται, η βιταμίνη C είναι μια υδατοδιαλυτή βιταμίνη που ανήκει στην ομάδα των παραγώγων λακτόνης των ακόρεστων πολυυδροξυκαρβοξυλικών οξέων.

3 Χημική δομή και ιδιότητες της βιταμίνης C

Το ασκορβικό οξύ (C 6 H 8 O 6) έχει τον ακόλουθο χημικό τύπο,,:

Σύμφωνα με τις φυσικές ιδιότητες, είναι μια άχρωμη κρυσταλλική ουσία με ευχάριστη έντονη ξινή γεύση, σημείο τήξης 192ºС. Το ασκορβικό οξύ είναι εύκολα διαλυτό στο νερό, ελάχιστα διαλυτό στην αιθανόλη και σχεδόν αδιάλυτο σε άλλους οργανικούς διαλύτες. Η παρουσία δύο ασύμμετρων ατόμων άνθρακα στην 4η και 5η θέση υποδηλώνει την πιθανότητα<#"605263.files/image006.gif">

Ρύζι. 4. Στάδια οξείδωσης ασκορβικού οξέος

Στο σχ. 4 δείχνει ότι το προϊόν της οξείδωσης του ασκορβικού οξέος είναι το L-δεϋδροασκορβικό οξύ, το οποίο είναι μια αντιστρέψιμα οξειδωμένη μορφή ασκορβικού οξέος και έχει ισχυρή όξινες ιδιότητες, το δεϋδροασκορβικό οξύ τα χάνει μαζί με δύο άτομα υδρογόνου διενόλης. Η απουσία διπλού δεσμού μεταξύ των ατόμων άνθρακα καθιστά το μόριο του αφυδροασκορβικού οξέος μάλλον ασταθές στην υδρόλυση, ειδικά σε αλκαλικά και ακόμη και ασθενώς όξινο περιβάλλον, δακτύλιος λακτόνης με το σχηματισμό του 2,3-δικετο-L-γουλονικού οξέος, το οποίο στη συνέχεια οξειδώνεται για να σπάσει τον ανθρακικό σκελετό του μορίου και να σχηματίσει L-θρεονικά και οξαλικά οξέα. Ούτε το 2,3-δικετο-L-γουλονικό οξύ ούτε τα προϊόντα αποδόμησής του έχουν τις ιδιότητες της βιταμίνης C.

Η μελέτη της διαδικασίας οξείδωσης του ασκορβικού οξέος έδειξε ότι σε υδατικά διαλύματα παρουσία ατμοσφαιρικού οξυγόνου αυτή η διαδικασία δεν συμβαίνει χωρίς καταλύτες-ιόντα χαλκού και αργύρου. Ωστόσο, στο κανονικό νερό βρύσηςΤα ιόντα αυτών των μετάλλων υπάρχουν πάντα, σε κάθε περίπτωση ιόντα χαλκού, σε επαρκείς ποσότητες για καταλυτική δράση.

Το χλώριο διαλυμένο στο νερό της βρύσης έχει επίσης οξειδωτική δράση και οδηγεί στην καταστροφή της βιταμίνης C.

Υπάρχει μια σειρά από ουσίες που προστατεύουν το ασκορβικό οξύ από την οξείδωση. Αυτά περιλαμβάνουν διάφορες ενώσεις θείου και ορισμένα παράγωγα πουρίνης, όπως ξανθίνη, ουρία.

Κατά την αποθήκευση ή την αποξήρανση των φρούτων και των λαχανικών, για μεγαλύτερη διατήρηση της βιταμίνης C, υποβάλλονται σε επεξεργασία με διοξείδιο του θείου. Διεισδύοντας στα κύτταρα και διαλύοντας στον κυτταρικό χυμό, το διοξείδιο του θείου σχηματίζει θειούχο οξύ με νερό, το οποίο αναστέλλει τη δραστηριότητα του ενζύμου (ασκορβική οξειδάση), το οποίο καταλύει την οξείδωση του ασκορβικού οξέος. Η ζάχαρη συμβάλλει επίσης στη μεγαλύτερη διατήρηση της βιταμίνης C.

4 Ο βιολογικός ρόλος της βιταμίνης C

Το ασκορβικό οξύ υπάρχει στους ιστούς όλων των ζώων και των ανώτερων φυτών. Μόνο οι άνθρωποι και ορισμένα άλλα σπονδυλωτά πρέπει να το πάρουν από τα τρόφιμα, αλλά τα περισσότερα ζώα και πιθανώς όλα τα φυτά μπορούν να συνθέσουν αυτήν την ένωση από τη γλυκόζη. Οι μικροοργανισμοί δεν περιέχουν ασκορβικό οξύ και δεν το χρειάζονται. L-ασκορβικό οξύσυντίθεται σε φυτά και σε εκείνα τα ζώα που παρέχουν στους εαυτούς τους αυτή τη βιταμίνη κατά τη διαδικασία μετασχηματισμού: D-γλυκόζη - L-γουλονικό - L-gulolactan - L-ασκορβικό (βλ. Εικ. 5).

Ρύζι. 5. Σύνθεση ασκορβικού οξέος σε ζώα και ανώτερα φυτά

Οι άνθρωποι και άλλα ζώα που δεν μπορούν να συνθέσουν βιταμίνη C στερούνται το ένζυμο οξειδάση της γουλονολακτόνης. Προφανώς, κάποτε όλοι οι οργανισμοί είχαν ένα σύνολο ενζύμων που είναι απαραίτητα για τη σύνθεση του ασκορβικού οξέος, αλλά στη συνέχεια ορισμένα είδη έχασαν αυτή την ικανότητα σύνθεσης ως αποτέλεσμα μιας μετάλλαξης, η οποία, ωστόσο, δεν αποδείχθηκε θανατηφόρα για αυτούς, καθώς η συνήθης τροφή αυτού του είδους ήταν φυτά πλούσια σε βιταμίνη C.

Η βιοχημική λειτουργία της βιταμίνης C είναι ελάχιστα γνωστή. Το ασκορβικό οξύ φαίνεται να παίζει το ρόλο ενός συμπαράγοντα στην ενζυματική αντίδραση υδροξυλίωσης, στην οποία υπολείμματα προλίνης και λυσίνης στο κολλαγόνο συνδετικού ιστούΤα σπονδυλωτά μετατρέπονται σε υπολείμματα 4-υδροξυπρολίνης και 5-υδροξολυσίνης. Τα υπολείμματα υδροξυπρολίνης και υδροξυλυσίνης βρίσκονται μόνο στο κολλαγόνο και δεν βρίσκονται σε καμία άλλη ζωική πρωτεΐνη. Το ασκορβικό οξύ συμμετέχει υποχρεωτικά στο σχηματισμό του κύριου συστατικού του συνδετικού ιστού των ανώτερων ζώων, διεγείρει την επούλωση των πληγών, αλλά δεν είναι ακόμη σαφές εάν αυτή είναι η μόνη και ακόμη και η κύρια λειτουργία του. Σύμφωνα με ορισμένους επιστήμονες, η βιταμίνη C συμμετέχει πολύ ενεργά στις βιοχημικές διεργασίες:

1) Το ασκορβικό οξύ είναι προμηθευτής υδρογόνου για το σχηματισμό πυρηνικού DNA.

) Το ασκορβικό οξύ συμμετέχει στους βιοχημικούς μετασχηματισμούς άλλων βιταμινών. Έχει διαπιστωθεί ότι το ασκορβικό οξύ μειώνει την ανάγκη του ζωικού οργανισμού για βιταμίνες του συμπλέγματος Β.

) Η βιταμίνη C επηρεάζει τη σύνθεση μιας άλλης πολύ σημαντικής πρωτεΐνης, η έλλειψη της οποίας στον οργανισμό οδηγεί σε παραβίαση της ελαστικότητας και της διαπερατότητας των αιμοφόρων αγγείων.

4) Το ασκορβικό οξύ είναι απαραίτητο για το σχηματισμό και το μεταβολισμό της ορμόνης αδρεναλίνης στο μυελό των επινεφριδίων και της νορεπινεφρίνης (πρόδρομος της αδρεναλίνης).

5) Το ασκορβικό οξύ αυξάνει την αντίσταση του οργανισμού σε διάφορα μεταδοτικές ασθένειες, επειδή Η έλλειψη βιταμίνης C οδηγεί σε μείωση της ανοσοβιολογικής αντίστασης του οργανισμού. Στο βιβλίο του Vitamin C and Health, Laureate βραβείο ΝόμπελΟ L. Pauling προτείνει τη λήψη βιταμίνης C σε μεγάλες δόσεις - έως και 10 g την ημέρα για την πρόληψη και τη θεραπεία του κρυολογήματος. Στα πρώτα σημάδια κρυολογήματος, συνιστάται να λαμβάνετε 1-1,5 g ασκορβικού οξέος με τη μορφή δισκίων ή σκόνης, μετά από 4 ώρες την ίδια ποσότητα - και ούτω καθεξής για την πρώτη ημέρα (υπάρχουν ενδείξεις ότι το ασκορβικό οξύ ενεργοποιεί η δράση της ιντερφερόνης, η οποία μας προστατεύει από ιούς). Εάν το αποτέλεσμα είναι εμφανές, τότε η θεραπεία συνεχίζεται την επόμενη ημέρα (1 g βιταμίνης C 4-5 φορές την ημέρα) και στη συνέχεια μειώνεται σταδιακά η δόση στη συνηθισμένη για αρκετές ημέρες. Αλλά αν μετά την πρώτη μέρα δεν βελτιώθηκε, τότε αυτό σημαίνει ότι παθολογική διαδικασίαπήγε πολύ μακριά, τα προστατευτικά εμπόδια "απέτυχαν" και η φυσιολογική ιατρική - η βιταμίνη C είναι ήδη ανίσχυρη εδώ. Σε αυτή την περίπτωση, πάρτε το συνηθισμένο φάρμακακαι βιταμίνες σε κανονικές δόσεις.

6) Έχει διαπιστωθεί ότι η βιταμίνη C έχει επίδραση στη δραστηριότητα των λευκοκυττάρων.

7) Η βιταμίνη C προάγει την καλύτερη απορρόφηση του σιδήρου και ως εκ τούτου ενισχύει το σχηματισμό της αιμοσφαιρίνης και την ωρίμανση των ερυθρών αιμοσφαιρίων.

) Το ασκορβικό οξύ όχι μόνο ενεργοποιεί την άμυνα του οργανισμού, αλλά βοηθά και στην εξουδετέρωση της τοξίνης που απελευθερώνεται από παθογόνους μικροοργανισμούς.

9) Η βιταμίνη C χρησιμοποιείται στην ιατρική στη θεραπεία μιας σειράς ασθενειών, όχι μόνο μολυσματικών, αλλά και στη φυματίωση, στη χειρουργική πρακτική ως μέσο επιτάχυνσης της επούλωσης πληγών, σύντηξης οστών και μετεγχειρητικών ραμμάτων.

1.4.1 Τροφές πηγές βιταμίνης C

Όταν καταναλώνετε τροφές πλούσιες σε πρωτεΐνες και άλλες βιταμίνες, η ανάγκη για βιταμίνη C μειώνεται σημαντικά και το αντίστροφο. Αυξημένη σπατάλη βιταμίνης C παρατηρείται επίσης όταν το σώμα κρυώνει και κατά τη διάρκεια της εφίδρωσης, καθώς μέρος της βιταμίνης C αποβάλλεται μαζί με τον ιδρώτα και τα ούρα.

Εάν ένα άτομο εξαρτάται πλήρως από την πρόσληψη βιταμίνης C από έξω, τότε πολλά ζώα δεν τη χρειάζονται. Και όμως, παρά το γεγονός ότι το σώμα πολλών ζώων είναι σε θέση να παράγει βιταμίνη C, τα ζωικά προϊόντα είναι αρκετά φτωχά σε αυτή τη βιταμίνη. Οι μύες, για παράδειγμα, περιέχουν μόνο 0,9 mg% βιταμίνης C, ενώ τα επινεφρίδια περιέχουν 130-150 mg%. Το αγελαδινό γάλα είναι σημαντικά πιο φτωχό σε βιταμίνη C από το ανθρώπινο. Παστεριωμένο, δηλ. Το γάλα που έχει θερμανθεί στους 80-85°C δεν περιέχει σχεδόν καθόλου βιταμίνη C. Τα φυτά είναι οι πλουσιότερες πηγές βιταμίνης C. Το ασκορβικό οξύ βρίσκεται σε όλα τα πράσινα μέρη των φυτών, αλλά σε ποικίλες ποσότητες. Υπάρχει πολλή βιταμίνη C στα περισσότερα λαχανικά και φρούτα, και μόνο οι σπόροι των φυτών, κατά κανόνα, είναι φτωχοί σε αυτή τη βιταμίνη (βλ. παράρτημα). Οι καρποί του ιπποφαούς, της ακτινιδιάς, της αγριοτριανταφυλλιάς και καρυδιά, τα εσπεριδοειδή, οι ντομάτες, το λάχανο περιέχουν μεγάλες ποσότητες βιταμίνης C.

Οι τριανταφυλλιές αποδείχτηκαν πραγματικά εργοστάσια βιταμίνης C, και όχι μόνο βιταμίνης C. Βρέθηκαν σε αυτά βιταμίνες B 2, P, K και καροτίνη. Οι τριανταφυλλιές είναι ένα πραγματικό πολυβιταμινούχο παρασκεύασμα που δημιουργήθηκε από την ίδια τη φύση. Ακολουθούν μερικά παραδείγματα: η μαύρη σταφίδα (100 mg) περιέχει 200 ​​mg βιταμίνης C, οι τριανταφυλλιές - 1200 mg, οι φράουλες - 60 mg, τα πορτοκάλια - 60 mg.

Η αποθήκευση φρούτων και λαχανικών στο ψυγείο επιβραδύνει τη διαδικασία οξείδωσης και έτσι βοηθά στη διατήρηση της βιταμίνης C περισσότερο.

Η κατάψυξη φυτικών προϊόντων οδηγεί σε παραβίαση της ακεραιότητας των μεμβρανών των φυτικών κυττάρων από κρυστάλλους πάγου και σε πιο ελεύθερη πρόσβαση του οξυγόνου του αέρα στα περιεχόμενα των κυττάρων. Ενώ οι φυτικοί ιστοί βρίσκονται σε παγωμένη κατάσταση, η χαμηλή θερμοκρασία αναστέλλει πολύ τις οξειδωτικές διεργασίες, αλλά όταν οι ιστοί αποψύχονται, ο ρυθμός τους αυξάνεται με την αύξηση της θερμοκρασίας και η βιταμίνη C καταστρέφεται γρήγορα. Εάν κατά τη διάρκεια της απόψυξης σταματήσει η πρόσβαση του οξυγόνου στην κυψέλη, για παράδειγμα, εάν παράγεται σε ατμόσφαιρα αδρανούς αερίου, τότε η περιεκτικότητα σε βιταμίνη C σε αυτό παραμένει στα ίδια επίπεδα με τα κατεψυγμένα τρόφιμα. Γι' αυτό, κατά την προετοιμασία των πρώτων πιάτων, τα κατεψυγμένα λαχανικά πρέπει να τοποθετούνται αμέσως σε βραστό νερό, καθώς περιέχουν σημαντικά λιγότερο διαλυμένο οξυγόνο από το κρύο νερό. Επιπλέον, η υψηλή θερμοκρασία του βραστού νερού ενεργοποιεί τα φυτικά ένζυμα, συμπεριλαμβανομένης της οξειδάσης της ασκορβίνης, η οποία είναι επίσης ένας παράγοντας που συμβάλλει στην καλύτερη διατήρηση της βιταμίνης.

Το πρώτο ξηρό παρασκεύασμα βιταμίνης C ελήφθη από τον A.N. Bessonov από χυμό λάχανου το 1922. Μέσω μάλλον περίπλοκης επεξεργασίας, ο επιστήμονας κατάφερε να αποκτήσει μια ανοιχτόχρωμη κίτρινη σκόνη, η οποία, μαζί με μια μάζα ουσιών έρματος, περιείχε 1% βιταμίνη C. Μια μέθοδος για την απομόνωση της βιταμίνης C, η οποία κατέστησε δυνατή την αύξηση της βιολογικής δραστηριότητας της προκύπτουσας προϊόν περισσότερο από 50 φορές.

4.2 Σημάδια υπο-, υπερ- και μπέρι-μπέρι

Η ανεπάρκεια βιταμινών εμφανίζεται όταν υπάρχει ανεπάρκεια βιταμινών στα τρόφιμα ή εάν οι βιταμίνες που συνοδεύουν την τροφή δεν απορροφώνται από τα έντερα, δεν απορροφώνται ή καταστρέφονται στον οργανισμό. Η ανεπάρκεια βιταμινών μπορεί να εκδηλωθεί με τη μορφή beriberi, υποβιταμίνωσης και λανθάνουσας μορφής. Σύμφωνα με την αβιταμίνωση, κατανοήστε την πλήρη εξάντληση των βιταμινών στο σώμα. με υποβιταμίνωση, σημειώνεται ένας ή άλλος βαθμός μείωσης της παροχής του σώματος με ένα ή περισσότερα (πολυποβιταμίνωση).

Η ανεπάρκεια ασκορβικού οξέος αναπτύσσεται, κατά κανόνα, λόγω ανεπαρκούς πρόσληψης βιταμίνης C από τα τρόφιμα, αλλά μπορεί να εμφανιστεί και ενδογενώς, με διαταραχές απορρόφησης βιταμινών που προκαλούνται από ασθένειες. γαστρεντερικός σωλήνας, ήπαρ και πάγκρεας.

Η πλήρης διακοπή της βιταμίνης C για μεγάλο χρονικό διάστημα προκαλεί σκορβούτο, τα κύρια συμπτώματα του οποίου είναι το μικρό δέρμα και οι μεγάλες κοιλιακές αιμορραγίες (στον υπεζωκότα και κοιλιακή κοιλότητα, αρθρώσεις, κ.λπ.) (βλ. Εικ. 6). Προς την πρώιμα συμπτώματαΤο σκορβούτο αναφέρεται σε αιμορραγίες γύρω από τα τριχοθυλάκια (85% στην περιοχή κάτω άκρα, αιμορραγία ούλων, κερατινοποίηση δέρμακαι τα λοιπά.). Με σκορβούτο, μπορεί να αναπτυχθεί αναιμία, καθώς και παραβίαση της γαστρικής έκκρισης. Η ανεπάρκεια της βιταμίνης C συνοδεύεται από μείωση της περιεκτικότητας σε ασκορβικό οξύ στο αίμα σε 22,7 μmol / l (0,4 mg%) και απότομη μείωση της απέκκρισής του στα ούρα.

Εικ.6. Βλάβη στα ούλα και στο στοματικό βλεννογόνο με σκορβούτο

Στις σύγχρονες συνθήκες, η μαζική ανάπτυξη του σκορβούτου είναι ελάχιστα δυνατή και η εμφάνιση έντονου beriberi είναι δυνατή μόνο με κάποιο είδος εθνικής καταστροφής - έναν εξουθενωτικό πόλεμο που συνοδεύεται από ανεπάρκεια τροφίμων και πείνα. Το σκορβούτο, κατά κανόνα, εμφανίζεται και αναπτύσσεται στο πλαίσιο του γενικού και ιδιαίτερα του πρωτεϊνικού υποσιτισμού.

Επί του παρόντος, η ελλιπής, μερική ανεπάρκεια ασκορβικού οξέος (υποβιταμίνωση C), η οποία δεν έχει έντονα κλινικά συμπτώματα, είναι πιο πιθανή. Οι καταστάσεις υποβιταμίνωσης αναπτύσσονται αργά και μπορούν να προχωρήσουν σε λανθάνουσα μορφή για μεγάλο χρονικό διάστημα.

Η αρχική μορφή ανεπάρκειας ασκορβικού οξέος εκδηλώνεται παράλληλα κοινά συμπτώματα: μειωμένη αποτελεσματικότητα, κόπωση, μειωμένη αντίσταση του οργανισμού στο κρύο, τάση για «κρύες» ασθένειες (ρινική καταρροή, καταρροή του ανώτερου αναπνευστικού, οξείες παθήσεις του αναπνευστικού κ.λπ.).

Η ανεπάρκεια βιταμινών, έχοντας λάβει μια λανθάνουσα μορφή, είναι ένα ευνοϊκό υπόβαθρο για το σχηματισμό και την ανάπτυξη μιας σειράς παθολογικών καταστάσεων - αθηροσκλήρωση, ασθενικές καταστάσεις, υπεροξείδωση, νεύρωση, καταστάσεις άγχους κ.λπ. Ο ρόλος της λανθάνουσας ανεπάρκειας βιταμινών στην ανάπτυξη υπέρβαρων μελετάται.

Η ανεπάρκεια βιταμινών στις σύγχρονες συνθήκες δεν εμφανίζεται μεμονωμένα με τη μορφή ενός ανεξάρτητου, ειδικού, έντονου συμπλέγματος συμπτωμάτων, αλλά κυρίως σε συνδυασμό με οποιαδήποτε άλλη παθολογία, συμβάλλοντας στην ανάπτυξη και την επιπλοκή της, επιδεινώνοντας τη διαδικασία ανάρρωσης. Έτσι, η έλλειψη βιταμινών είναι ένας παράγοντας που περιπλέκει την πορεία στεφανιαία νόσοςκαρδιά και αποκατάσταση μετά από έμφραγμα του μυοκαρδίου. Είναι πιθανό ότι όλοι οι τύποι θεραπείας, ειδικά στους ηλικιωμένους, καθώς και στα υπέρβαρα άτομα, θα πρέπει να ξεκινούν με την εξάλειψη της ανεπάρκειας βιταμινών, χρησιμοποιώντας πολύ αποτελεσματικά συμπλέγματα πολυβιταμινών και συνδυασμένα γηριατρικά φάρμακα για αυτό.

Όλα σήμερα περισσότεροι άνθρωποι, σκεπτόμενοι τη σωστή διατροφή, προσπαθούν να διαφοροποιήσουν τη διατροφή τους χρησιμοποιώντας κάθε είδους σύμπλοκα βιταμινών. Ωστόσο, οι συνέπειες της επίδρασης τέτοιων προσθέτων στο σώμα δεν έχουν μελετηθεί αρκετά και η περίσσεια βιταμινών μπορεί μερικές φορές να είναι πολύ πιο επικίνδυνη από την ανεπαρκή πρόσληψή τους.

Η υπερβιταμίνωση είναι μια αντίδραση σε υπερβολική δόση βιταμινών, που εκδηλώνεται σε διάφορες διαταραχές και δυσλειτουργίες του ανθρώπινου οργανισμού. Υπάρχει μια λανθασμένη άποψη ότι η υπερβολική αφθονία βιταμινών είναι αδύνατη: το σώμα θα πάρει ό,τι χρειάζεται και το υπόλοιπο θα απεκκριθεί στα ούρα. Αυτό δεν είναι αληθινό. Μόνο ορισμένα στοιχεία απεκκρίνονται μόνα τους (υδατοδιαλυτά), αλλά μπορούν επίσης να προκαλέσουν κάποια βλάβη. Χρόνια υπερδοσολογία βιταμίνης C<#"605263.files/image010.gif">

x = ,

όπου Α είναι ο όγκος της βαφής που χρησιμοποιείται για την τιτλοδότηση του εκχυλίσματος, ml. B είναι ο όγκος της βαφής που χρησιμοποιείται για την τιτλοδότηση ελέγχου, ml. T cr/ask - τίτλος βαφής για ασκορβικό οξύ, mg/ml (0,05 g ασκορβικού οξέος αντιστοιχεί σε 1 ml βαφής Tillmans). V έως - ο συνολικός όγκος του εκχυλίσματος, ml. V p - ο όγκος του εκχυλίσματος που λαμβάνεται για τιτλοδότηση, ml. m είναι η μάζα του υπό μελέτη υλικού σε g.

1.2 Ιωδομετρική μέθοδος

Το ασκορβικό οξύ οξειδώνεται εύκολα λόγω της παρουσίας της ομάδας ενδιόλης· επομένως, μπορούν να χρησιμοποιηθούν διάφορες μέθοδοι οξειδοαναγωγής για τον προσδιορισμό του, συμπεριλαμβανομένου ενός τέτοιου σχετικά ασθενούς οξειδωτικού παράγοντα όπως το ιώδιο. Η μέθοδος ιωδομέτρησης σε αυτή την περίπτωση είναι επίσης η απλούστερη και πιο προσιτή κατά την οργάνωση ερευνητικό έργομε μαθητές.

Ο ποσοτικός προσδιορισμός του ασκορβικού οξέος βασίζεται στην οξείδωση του με διάλυμα ιωδίου:

Πρότυπο δυναμικό οξείδωσης ασκορβικού οξέος Ε = -0,71 V

C 6 H 8 O 6 - 2e → C 6 H 6 O 6 + 2H +

Τυπικό δυναμικό μείωσης ιωδίου Ε = 0,53 V

2 + 2e → 2I -

Η διαφορά δυναμικού μεταξύ ασκορβικού οξέος και ιωδίου θα είναι αρκετά μεγάλη EMF = 0,53 - (-0,71) = 1,24 V, επομένως το ιώδιο μπορεί να χρησιμοποιηθεί για την ποσοτικοποίηση της.

Ο ιωδομετρικός προσδιορισμός του ασκορβικού οξέος είναι ένα τυπικό παράδειγμα μεθόδου άμεσης τιτλοδότησης μιας αναλυόμενης ουσίας με ένα πρότυπο διάλυμα ιωδίου σε ιωδιούχο κάλιο.

Η τιτλοδότηση πραγματοποιείται με τη μέθοδο των μεμονωμένων μερίδων, η ουσία της οποίας είναι η εξής. Αρκετές (3-5) περίπου ίσες ποσότητες της αναλυόμενης ουσίας, που λαμβάνονται σε αναλυτική ισορροπία, διαλύονται σε έναν αυθαίρετο ελάχιστο (περίπου 10 ml) όγκο διαλύτη και τιτλοδοτούνται πλήρως.

Αρκετά ζυγισμένα τμήματα του αναλυόμενου υλικού τοποθετούνται σε αριθμημένες κωνικές φιάλες τιτλοδότησης, στις οποίες χύνονται προκαταρκτικά περίπου 10 ml απεσταγμένου νερού. Στη συνέχεια προσθέστε 1-2 ml διαλύματος θειικού οξέος 6Ν και τιτλοποιήστε σε θερμοκρασία δωματίου με διάλυμα ιωδίου 0,1 N σε ιωδιούχο κάλιο παρουσία δείκτη αμύλου μέχρι να εμφανιστεί ένα μπλε χρώμα του διαλύματος.

όπου C e - κανονική συγκέντρωσηδιάλυμα εργασίας, mol/l; V είναι ο όγκος του διαλύματος εργασίας που χρησιμοποιείται για την τιτλοδότηση, ml. M E - ισοδύναμο βάρος ασκορβικού οξέος, g/mol. m είναι το βάρος του δείγματος υλικού δοκιμής, g.

2 Χημική ανάλυση περιεκτικότητας σε βιταμίνη C σύμφωνα με τη μέθοδο Tillmans σε μήλα εγχώριων και εισαγόμενων ποικιλιών

Μία από τις κύριες πηγές βιταμίνης C είναι τα φρέσκα φρούτα και λαχανικά (βλ. παράρτημα). Κατά τη διάρκεια της εργασίας, έγινε μελέτη της ποσοτικής περιεκτικότητας σε ασκορβικό οξύ σε μήλα εγχώριων και εισαγόμενων ποικιλιών. Η επιλογή αυτού του αντικειμένου οφείλεται στη μεγαλύτερη διαθεσιμότητα μήλων για τον Ρώσο καταναλωτή σε σύγκριση με άλλα φρούτα. Η μεθοδολογία για αυτόν τον προσδιορισμό περιγράφεται στην ενότητα 2.1.1. Τα αποτελέσματα της μελέτης δίνονται στον πίνακα. 4 και εικ. 7.

Πίνακας 4 Ποσοτική περιεκτικότητα σε βιταμίνη C (mg/%) σε μήλα διαφόρων ποικιλιών

Ποικιλία μήλου		Τ ζωγραφίζω / ρωτήσω. σε αυτούς			V cr. μια εμπειρία.	V cr. μετρητής.	Vit.C mg/%
				T cr / ρωτήστε σε αυτούς
Αστερίσκος (Ρωσία)
Antonovka (Ρωσία)
Idared (Πολωνία)
Greni (Νότια Αφρική)
Fuji (Ιαπωνία)
Γκαλά (Κίνα)
Jonagold (Βέλγιο)
Braeburn (Νέα Ζηλανδία)
Golden Delicious (ΗΠΑ)
Τζόναθαν (ΗΠΑ)

Εικ.7 Ποσοτική περιεκτικότητα σε βιταμίνη C (mg /%) σε μήλα διαφόρων ποικιλιών

Αναλύοντας τα δεδομένα που ελήφθησαν, μπορεί να δηλωθεί ότι η περιεκτικότητα σε βιταμίνη C στα μήλα των εγχώριων παραγωγών είναι σημαντικά υψηλότερη από ό,τι στα εισαγόμενα.

3 Ιωδομετρικός προσδιορισμός της περιεκτικότητας σε βιταμίνη C

3.1 Ιωδομετρικός προσδιορισμός της περιεκτικότητας σε βιταμίνη C σε σκευάσματα βιταμινών

Η πιο αποτελεσματική μέθοδος για τη διόρθωση της επάρκειας βιταμινών ενός ατόμου είναι η τακτική λήψη προφυλακτικών πολυβιταμινούχων σκευασμάτων (Revit, Hexavit, Undevit κ.λπ.). Τα παρασκευάσματα αυτού του τύπου περιέχουν ένα περισσότερο ή λιγότερο πλήρες σύνολο απαραίτητων βιταμινών σε δόσεις που πλησιάζουν τις φυσιολογικές ανάγκες ή ελαφρώς υπερβαίνουν αυτήν. Η τακτική λήψη τέτοιων φαρμάκων (1 δισκίο ή δισκίο την ημέρα ή κάθε δεύτερη μέρα), χωρίς να δημιουργείται περίσσεια, εγγυάται τη βέλτιστη παροχή βιταμινών στον οργανισμό. Για τη βελτιστοποίηση της παροχής βιταμινών των παιδιών ΠΡΟΣΧΟΛΙΚΗ ΗΛΙΚΙΑμπορούμε να προτείνουμε "Revit" ή "Geksavit", για μαθητές δημοτικού - "Geksavit", για μαθητές γυμνασίου, μαθητές, ενήλικες - "Geksavit" ή "Undevit". Κατά τη διάρκεια της εγκυμοσύνης και της γαλουχίας, συνιστάται η λήψη Gendevit, Undevit ή Glutamevit. Το τελευταίο σκεύασμα, που περιέχει, εκτός από βιταμίνες, χαλκό και σίδηρο, εμποδίζει την ανάπτυξη αναιμίας και μπορεί να συνιστάται για το σκοπό αυτό σε γυναίκες σε αναπαραγωγική ηλικία, καθώς και σε αιμοδότες. Σε μεγάλη ηλικία, συνήθως συνταγογραφείται Undevit ή Decamevit, που περιέχει ευρύ φάσμαΒ. σε δόσεις που υπερβαίνουν φυσιολογική ανάγκηπρακτικά υγιές άτομο 2-10 φορές. Το ίδιο φάρμακο ενδείκνυται για παραβιάσεις της απορρόφησης και της χρήσης βιταμινών, κατά την προετοιμασία για χειρουργικές επεμβάσεις, στη μετεγχειρητική περίοδο, καθώς και για μεγάλο χρονικό διάστημα μετά την έξοδο από το νοσοκομείο.

Για την ανάλυση της ποσοτικής περιεκτικότητας σε βιταμίνη C επιλέχθηκαν τα πιο γνωστά, συχνά χρησιμοποιούμενα και διαδεδομένα βιταμινούχα σκευάσματα μέσου κόστους στην καταναλωτική αγορά του Arzamas. Η μεθοδολογία της έρευνας δίνεται στην παράγραφο 2.1.2. Τα αποτελέσματα φαίνονται στον πίνακα. 5 και εικ. οκτώ.

Πίνακας 5 Ποσοτική περιεκτικότητα σε βιταμίνη C (mg/%) σε διάφορα σκευάσματα βιταμινών

Ερευνητικό φάρμακο		V σκλάβος διάλυμα, ml.	Vit.C mg/%	Μέσο Vit.С, mg/%		Άλλες βιταμίνες που περιλαμβάνονται στις βιταμίνες. φάρμακο
1. Κουφέτα ασκορβικού οξέος, CJSC "Altaivitaminy", Biysk.
2. Ασκορβικό οξύ, JSC "Marbiopharm", Yoshkar-Ola.
3. Ασκορβικό οξύ με γλυκόζη, JSC "Marbiopharm", Yoshkar-Ola.
4. Ασκορβικό οξύ, γεύση - μαύρη σταφίδα, «Marbiopharm», Yoshkar-Ola.					Δεν διευκρινίζεται
5. Ασκορβικό οξύ, φάρμακο φαρμακείου, 2010
6. Ασκορβικό οξύ, φάρμακο φαρμακείου, .2009.
7. Revit, JSC "Marbiopharm", Yoshkar-Ola.
8. Aerovit, OJSC "Pharmstandard - UfaVITA"						A, B1, B2, B5, B6, B9, B12, P
9. Geksavit, OJSC "Pharmstandard - UfaVITA"						Α, Β1, Β2, Β5, Β6

Έτσι, διαπιστώθηκε ότι η μεγαλύτερη ποσότητα βιταμίνης C (mg%) περιέχει το φάρμακο - χάπια ασκορβικού οξέος, Biysk, και μεταξύ των μελετηθέντων πολυβιταμινούχων παρασκευασμάτων - Aerovit, Ufa. Τις περισσότερες φορές, η περιεκτικότητα σε βιταμίνη C που αναγράφεται στη συσκευασία από τον κατασκευαστή δεν αντιστοιχεί στην πραγματική και υπερεκτιμάται.

Στη βιβλιογραφία, το γεγονός επανειλημμένα επισημαίνεται ότι το ασκορβικό οξύ οξειδώνεται εύκολα από το ατμοσφαιρικό οξυγόνο. Από την άποψη αυτή, διερευνήθηκε ένα φρέσκο ​​φαρμακευτικό παρασκεύασμα ασκορβικού οξέος και ένα σκεύασμα ηλικίας ενός έτους. Τα αποτελέσματα φαίνονται στο Σχ.9.

Κουφέτα ασκορβικού οξέος, Biysk;

Ασκορβικό οξύ, Yoshkar-Ola;

Ασκορβικό οξύ με γλυκόζη, Yoshkar-Ola;

Ασκορβικό οξύ, γεύση - φραγκοστάφυλο, Yoshkar-Ola;

Revit, Yoshkar-Ola,

Aerovit, Ufa;

Geksavit, Ufa.

Εικ. 9 Αλλαγή στην περιεκτικότητα σε βιταμίνη C στο φαρμακευτικό παρασκεύασμα ασκορβικού οξέος κατά την αποθήκευση

Κατά την ανάλυση του φαρμακευτικού σκευάσματος ασκορβικού οξέος, αποκαλύφθηκε σημαντική μείωση της περιεκτικότητας σε βιταμίνη C κατά την αποθήκευση, η οποία πιθανότατα οφείλεται στη σταδιακή οξείδωση του από το ατμοσφαιρικό οξυγόνο.

2.3.2 Ιωδομετρικός προσδιορισμός της περιεκτικότητας σε βιταμίνη C στους χυμούς φρούτων

Τα φρέσκα φρούτα και λαχανικά ως πηγές βιταμινών δεν είναι πάντα διαθέσιμα. Ως εκ τούτου, οι χυμοί είναι πολύ δημοφιλείς. Οι φρεσκοστυμμένοι χυμοί είναι οι πιο χρήσιμοι. Περιέχουν όλες τις βιταμίνες και τα μικροστοιχεία, καθώς και φυτικές ίνες και άλλες βιολογικά δραστικές ουσίες που περιέχει επίσης ένα φρέσκο ​​φρούτο ή λαχανικό. Οι χυμοί είναι πιο εύκολο να αφομοιωθούν από το σώμα μας από ένα φρούτο ή λαχανικό. Δυστυχώς, δεν έχουν όλοι την ευκαιρία να πίνουν φρεσκοκομμένους χυμούς. Τότε θα πρέπει να δώσετε προσοχή στους χυμούς από κονσέρβες. Στη διαδικασία της βιομηχανικής επεξεργασίας των χυμών, ορισμένες από τις βιταμίνες, και κυρίως το ασκορβικό οξύ, καταστρέφονται. Αλλά στους περισσότερους χυμούς βιομηχανικής παραγωγής, όλες οι χαμένες βιταμίνες εισάγονται επιπλέον. Αν συνεχίσουμε να μιλάμε για χρήσιμες ουσίες, τότε οι χυμοί περιέχουν και κάλιο και σίδηρο. Περιέχουν επίσης σημαντικές ουσίες όπως π.χ οργανικά οξέα. Όλα αυτά συνθέτουν τα γνωστά οφέλη των χυμών. Επιπλέον, σε ορισμένες περιπτώσεις, ο χυμός είναι μια καλή βοήθεια για την τόνωση της όρεξης. Επιπλέον, είναι αρκετά θρεπτικό, περιέχει πολλούς υδατάνθρακες, κυρίως σάκχαρα από φρούτα και μούρα. Σε χυμούς σχεδιασμένους ειδικά για παιδικές τροφέςΜην προσθέτετε άλλα συντηρητικά εκτός από κιτρικό οξύ. Οι πιο χρήσιμοι χυμοί με πολτό. Περιέχουν περισσότερα θρεπτικά συστατικά.

Από αυτή την άποψη, έχουμε ερευνήσει την περιεκτικότητα σε βιταμίνη C σε ορισμένους φρέσκους και κονσερβοποιημένους χυμούς. Η μεθοδολογία της έρευνας περιγράφεται στην παράγραφο 2.1.2. Τα αποτελέσματα παρουσιάζονται στον πίνακα. 6 και εικ. 10, 11.

Πίνακας 6 Ποσοτική περιεκτικότητα σε βιταμίνη C (mg/%) σε φρέσκους χυμούς και σε κονσέρβες

	Βιτ. C mg/%	Vit.С, που καθορίζεται από τον κατασκευαστή, mg/%	καλύτερο πριν από την ημερομηνία
1.χυμός σταφίδας (φρέσκα-κατεψυγμένα μούρα)
2. χυμός ιπποφαούς (φρέσκα-κατεψυγμένα μούρα)
3. χυμός λεμονιού (φρεσκοστυμμένος)
4. χυμός πορτοκαλιού (φρεσκοστυμμένος)
5. άγριο τριαντάφυλλο (αφέψημα)
6. χυμός "Tonus" (πολύφρου)
7. Χυμός Tonus (μήλο)
8.χυμός J - 7 100% (πολύφρουτα)
9.πολύκαρπος. χυμός "Η οικογένειά μου"
10. νέκταρ ροδάκινου "Η οικογένειά μου"
11. χυμός μήλου"Η οικογένειά μου"
12. χυμός μήλου - νέκταρ
13.χυμός - μήλο νέκταρ - πολύκαρπος.
14.χυμός - νέκταρ μήλο - ροδάκινο

1. χυμός "Tonus" (πολύφρου)

2. χυμός "Tonus" (μήλο)

Χυμός J - 7 100% (πολύ φρούτα)

Πολύκαρπος. χυμός "Η οικογένειά μου"

Νέκταρ ροδάκινου "Η οικογένειά μου"

Χυμός μήλου "Η οικογένειά μου"

χυμός μήλου - νέκταρ

Χυμός - μήλο νέκταρ - πολύκαρπος.

Χυμός - νέκταρ μήλο - ροδάκινο

Αναλύοντας τα δεδομένα που ελήφθησαν, μπορεί να δηλωθεί ότι η περιεκτικότητα σε βιταμίνη C στους φρέσκους χυμούς είναι πολύ υψηλότερη από ό,τι σε κονσέρβες. Το υψηλότερο (mg%) βρέθηκε -από τα μελετηθέντα- στον χυμό σταφίδας. Η χαμηλή περιεκτικότητα σε βιταμίνη C στον ζωμό της τριανταφυλλιάς, σε σύγκριση με τα δεδομένα της βιβλιογραφίας, υποδηλώνει την καταστροφή του κατά τη θερμική επεξεργασία.

συμπέρασμα

Κατά τη διάρκεια της μελέτης μπορούν να εξαχθούν τα ακόλουθα συμπεράσματα:

Η βιταμίνη C είναι μια υδατοδιαλυτή βιταμίνη που ανήκει στην ομάδα των παραγώγων λακτόνης των ακόρεστων πολυυδροξυκαρβοξυλικών οξέων. Από χημική φύση, είναι ένα ασθενές οξύ που οξειδώνεται εύκολα λόγω της παρουσίας μιας ομάδας ενδιόλης.

Το ασκορβικό οξύ είναι απαραίτητο συστατικό στην καθημερινή διατροφή του ανθρώπου, καθώς εκτελεί μια σειρά από αναντικατάστατες βιοχημικές λειτουργίες, αλλά δεν είναι ικανό να συντεθεί από τον ίδιο τον οργανισμό. Η έλλειψή του μπορεί να αναπληρωθεί μέσω μιας ποικιλίας πηγών τροφίμων και σκευασμάτων βιταμινών.

Η ποσοτική ανάλυση (μέθοδος Tillmans) έδειξε ότι η περιεκτικότητα σε βιταμίνη C σε μήλα εγχώριων ποικιλιών κυμαίνεται από 13,5 έως 15,5 mg%, και σε εισαγόμενα - από 1,34 έως 6,5 mg%. Γενικά, η περιεκτικότητα σε βιταμίνη C σε μήλα εγχώριων ποικιλιών είναι μεγαλύτερη.

4. Κατά τον ιωδομετρικό προσδιορισμό της περιεκτικότητας σε ασκορβικό οξύ σε βιταμινούχα σκευάσματα, βρέθηκε ότι η περιεκτικότητα σε βιταμίνη C σε αυτά κυμαίνεται από 22,42 - 0,85 mg% για τα μονοβιταμινούχα σκευάσματα και εντός 12,66 - 6,91 mg% για τα πολυβιταμινούχα σκευάσματα. Κατά την ανάλυση του φαρμακευτικού σκευάσματος ασκορβικού οξέος, αποκαλύφθηκε σημαντική μείωση της περιεκτικότητας σε βιταμίνη C κατά την αποθήκευση, η οποία πιθανότατα οφείλεται στη σταδιακή οξείδωση του από το ατμοσφαιρικό οξυγόνο.

5. Κατά την πορεία του ιωδομετρικού προσδιορισμού στους χυμούς, διαπιστώθηκε ότι η περιεκτικότητα σε ασκορβικό οξύ στους φρεσκοπαρασκευασμένους χυμούς είναι σημαντικά υψηλότερη από ό,τι στους κονσέρβες. Ωστόσο, μπορούν να χρησιμεύσουν και οι χυμοί από κονσέρβα καλή πηγήβιταμίνες στη διατροφή σε συνθήκες έλλειψής τους.

Βιβλιογραφία

1. Αμπράμοβα Ζ.Ι. Ένας οδηγός κλινικής διατροφής για νοσοκόμες και μάγειρες με δίαιτα. - Μ.: Ιατρική, - 1984. - 304 σελ.

Avakumov V.M. Σύγχρονη διδασκαλίασχετικά με τις βιταμίνες. Μόσχα: Χημεία, 1991. - 214 σελ.

3. Aleksentsev V.G. Βιταμίνες και άνθρωπος. - M.: Bustard, 2006.- 156 σελ.

4. Afinogenova S.G. Βιταμίνες. Διδακτικό βοήθημα για φοιτητές της Σχολής Βιολογίας και Χημείας / Σ.Γ. Afinogenova, Ε.Α. Sidorskaya. - Αρζαμάς: ΑΓΠΙ ιμ. Α.Π. Gaidar, 1990.- 65 σελ.

Vanhanen V.D. Υγιεινή τροφίμων. - Μ.: Ιατρική, - 1982.- 345 σελ.

Βιταμίνες και μέθοδοι προσδιορισμού τους. - Gorky, GSU, 1981. - 212 σελ.

7. Lehninger A. Fundamentals of biochemistry. Μ.: Μιρ, 1985.- Τόμ.1-3.

Murray R. Human Biochemistry / R. Murray, D. Grenner, P. Mayes.- M.: 1993. -T. 2. - 414 σελ.

Olgin O. Πειράματα χωρίς εκρήξεις. - Μ.: Χημεία, 1986.- 130 σελ.

10. V.A. Volkov, L.A. Volkov. Προσδιορισμός βιταμίνης C //Χημεία στο σχολείο. - 2002. - Αρ. 6. - S.63-66.

11. Romanovsky V.E. Βιταμίνες και βιταμινοθεραπεία. Σειρά "Ιατρική για σένα" / V.E. Romanovsky., Ε.Α. Sinkova - Rostov n/a. «Phoenix», 2000.- 320 p.

12. Strayer L. Biochemistry. Μ.: Mir, 1984. - V.1-3.

Φιλίποβιτς Γιου.Β. Βασικές αρχές της βιοχημείας. Μ.: Λύκειο, 1985.- 450 σελ.

Φιλίποβιτς Γιου.Β. Εργαστήριο Γενικής Βιοχημείας / Yu.B. Φιλίπποβιτς, Τ.Α. Egorova, G.A. Σεβαστιάνοφ. Μ.: Chemistry, 1982.- 330 p.

Χημεία βιολογικά ενεργών φυσικών ενώσεων / Εκδ. Preobrazhensky N.A., Evstigneeva R.P. - Μ.: Χημεία, 1970. - 320 σελ.

16. Chukhrai E.S. Μόριο, ζωή, οργανισμός. Μ.: Διαφωτισμός, 1991.-276 σελ.

Shulpin G.B. Χημεία για όλους. - Μ.: Γνώση. 1997. - 135 σελ.

Eidelman M.M. Υπερδοσολογίες ασκορβικού οξέος - σε ποιον και πότε // Chemistry and Life.- 1985.- No. 1.- P. 66-69.

Yakovleva N.B. Χημική φύσηαπαραίτητες βιταμίνες για τη ζωή. - Μ.: Διαφωτισμός, 2006. - 120 σελ.

Εφαρμογή

Πίνακας 1. Περιεκτικότητα σε βιταμίνη C στα λαχανικά

Ονομασία προϊόντος	Η ποσότητα του ασκορβικού οξέος
μελιτζάνα
Κονσερβοποιημένα πράσινα μπιζέλια
Φρέσκα πράσινα μπιζέλια
λευκό λάχανο
Ξυνολάχανο
Κουνουπίδι
μπαγιάτικες πατάτες
Φρεσκοκομμένες πατάτες
Φρέσκο ​​κρεμμυδάκι
Γλυκό πράσινο πιπέρι
κόκκινο πιπέρι
Τοματοχυμος
τοματοπολτός
κόκκινες ντομάτες

Πίνακας 2. Η περιεκτικότητα σε βιταμίνη C σε ορισμένα φρούτα και μούρα

Ονομασία προϊόντος	Η ποσότητα του ασκορβικού οξέος
βερίκοκα
πορτοκάλια
Cowberry
Σταφύλι
Φράουλα κήπου
Φραγκοστάφυλλο
μανταρίνια
Κόκκινες σταφίδες
Μαύρη σταφίδα
Αποξηραμένο τριαντάφυλλο
Μήλα, antonovka
Σκανδιναβικά μήλα
Νότια μήλα

Πίνακας 3. Διατήρηση της βιταμίνης C κατά το μαγείρεμα

Όνομα πιάτων	Διατήρηση της βιταμίνης σε σύγκριση με την πρώτη ύλη σε %
Λάχανο βρασμένο με ζωμό (βραστό 1 ώρα)
Shchi που στάθηκε σε μια ζεστή σόμπα στους 70-75 ° για 3 ώρες
Το ίδιο και με την οξίνιση
Shchi που στάθηκε σε μια ζεστή σόμπα στους 70-75 ° για 6 ώρες
Σούπα λάχανο τουρσί (ψήσιμο 1 ώρα)
Λάχανο βραστό
Πατάτες τηγανητές ωμές, ψιλοκομμένες
Οι πατάτες βράζονται για 25-30 λεπτά στη φλούδα τους
Ίδιο, εξαγνισμένο
Πατάτες καθαρισμένες, 24 ώρες σε νερό σε θερμοκρασία δωματίου
Πατάτες πουρέ
Πατατόσουπα
Το ίδιο, στέκεται σε μια ζεστή σόμπα στους 70-75 ° για 3 ώρες
Το ίδιο, παραμονή για 6 ώρες
βραστά καρότα

Εισαγωγή……………………………………………………………………2

1. Γενική επισκόπηση των μεθόδων για τον προσδιορισμό των βιταμινών……………………3

2. Χρωματογραφικές μέθοδοι για τον προσδιορισμό των βιταμινών…………5

3. Ηλεκτροχημικές μέθοδοι για τον προσδιορισμό των βιταμινών…………10

4. Βολταμετρική μέθοδος απογύμνωσης για τον προσδιορισμό

υδατοδιαλυτές βιταμίνες Β 1 Β 2 στα τρόφιμα………..13

Συμπέρασμα…………………………………………………………………………………….

Εισαγωγή

Επί του παρόντος, έχει εμφανιστεί στην αγορά ένας τεράστιος αριθμός ενισχυμένων προϊόντων διατροφής για ζωοτροφές για ανθρώπους και ζώα, τα οποία είναι ξηρά μείγματα πολλαπλών συστατικών. Η γκάμα τέτοιων προϊόντων παρουσιάζεται αρκετά ευρέως. Αυτά είναι, πρώτα απ 'όλα, βιολογικά ενεργά συμπληρώματα διατροφής, προμίγματα, σύνθετες ζωοτροφές για ζώα και πτηνά, πολυβιταμινούχα σκευάσματα. Το κριτήριο για την ποιότητα τέτοιων προϊόντων μπορεί να είναι η ανάλυσή τους για την περιεκτικότητα σε βιταμίνες και, ιδιαίτερα, ζωτικής σημασίας όπως οι υδατοδιαλυτές και λιποδιαλυτές βιταμίνες, η ποσότητα των οποίων ρυθμίζεται κανονιστικά έγγραφακαι τα πρότυπα υγιεινής ποιότητας.

Για τον προσδιορισμό των βιταμινών χρησιμοποιούνται διάφορες μέθοδοι. Οι ευρέως χρησιμοποιούμενες οπτικές μέθοδοι ανάλυσης είναι επίπονες, χρονοβόρες και απαιτούν ακριβά αντιδραστήρια· η χρήση χρωματογραφικών μεθόδων περιπλέκεται από τη χρήση ακριβού εξοπλισμού. Κάθε χρόνο η ποικιλία επεκτείνεται και η παραγωγή προϊόντων διατροφής αυξάνεται, η συνταγή για παιδικές τροφές βελτιώνεται. Αυτό, με τη σειρά του, δημιουργεί αυξημένες απαιτήσεις για τον ποιοτικό έλεγχο των προϊόντων και τη βελτίωση των μεθόδων προσδιορισμού των βιταμινών. βιοϊατρικές απαιτήσεις και υγειονομικά πρότυπαΗ ποιότητα των πρώτων υλών και των προϊόντων διατροφής χαρακτηρίζει τη θρεπτική αξία των περισσότερων τύπων και ομάδων παιδικών τροφών για διάφορους σκοπούς.

1. Γενική επισκόπηση μεθόδων προσδιορισμού βιταμινών

Σχεδόν όλες οι βιταμίνες οξειδώνονται εύκολα, ισομερίζονται και καταστρέφονται υπό την επίδραση της υψηλής θερμοκρασίας, του φωτός, του ατμοσφαιρικού οξυγόνου, της υγρασίας και άλλων παραγόντων.

Από τις υπάρχουσες μεθόδους για τον προσδιορισμό της βιταμίνης C (ασκορβικό οξύ), η πιο ευρέως χρησιμοποιούμενη μέθοδος είναι η οπτική και ποτενσιομετρική τιτλοδότηση με διάλυμα 2,6-διχλωροφαινολινοφαινόλης σύμφωνα με το GOST 24556-81, με βάση τις αναγωγικές ιδιότητες του ασκορβικού οξέος και την ικανότητά του. για μείωση 2,6-DCPIP. Το σκούρο μπλε χρώμα αυτού του δείκτη γίνεται άχρωμο όταν προστίθεται ασκορβικό οξύ. Η προετοιμασία ενός εκχυλίσματος του προϊόντος δοκιμής είναι σημαντική. Το καλύτερο εκχυλιστικό είναι ένα διάλυμα 6% μεταφωσφορικού οξέος, το οποίο απενεργοποιεί την ασκορβική οξειδάση και καθιζάνει πρωτεΐνες.

Η καροτίνη σε φυτικές πρώτες ύλες, συμπυκνώματα και αναψυκτικά ελέγχεται με τη φυσικοχημική μέθοδο σύμφωνα με το GOST 8756.22-80. Η μέθοδος βασίζεται στον φωτομετρικό προσδιορισμό του κλάσματος μάζας της καροτίνης σε διάλυμα που λαμβάνεται κατά τη διαδικασία εκχύλισης από προϊόντα με οργανικό διαλύτη. Το διάλυμα καθαρίζεται προκαταρκτικά από τις συνοδευτικές χρωστικές ουσίες χρησιμοποιώντας χρωματογραφία στήλης. Η καροτίνη διαλύεται εύκολα σε οργανικούς διαλύτες (αιθέρας, βενζίνη κ.λπ.) και τους δίνει ένα κίτρινο χρώμα. Για τον ποσοτικό προσδιορισμό της καροτίνης χρησιμοποιείται χρωματογραφία προσρόφησης σε στήλες με οξείδιο αργιλίου και οξείδιο μαγνησίου. Ένας τέτοιος προσδιορισμός χρωστικών σε μια στήλη εξαρτάται από τη δραστηριότητα του προσροφητικού, την ποσότητα των χρωστικών και την παρουσία άλλων συστατικών στο μείγμα που πρόκειται να διαχωριστεί. Ένα ξηρό μείγμα οξειδίου του αλουμινίου διατηρεί την καροτίνη, ενώ ένα υγρό μείγμα επιτρέπει σε άλλες χρωστικές να περάσουν στο διάλυμα.

Η θειαμίνη βρίσκεται κυρίως σε δεσμευμένη κατάσταση με τη μορφή διφωσφορικού εστέρα - κοκαρβοξυλάσης, η οποία είναι η ενεργή ομάδα ενός αριθμού ενζύμων. Με τη βοήθεια της όξινης υδρόλυσης και υπό την επίδραση ενζύμων, η θειαμίνη απελευθερώνεται από τη δεσμευμένη κατάσταση. Αυτή η μέθοδος καθορίζει την ποσότητα της θειαμίνης. Για τον υπολογισμό της περιεκτικότητας σε βιταμίνη Β1, χρησιμοποιείται μια φθοριομετρική μέθοδος, η οποία χρησιμοποιείται για τον προσδιορισμό της θειαμίνης στα τρόφιμα. Βασίζεται στην ικανότητα της θειαμίνης να σχηματίζει θειοχρωμα σε αλκαλικό μέσο με σιδηροκυανιούχο ασβέστιο, το οποίο δίνει έντονο φθορισμό στη βουτυλική αλκοόλη. Η ένταση της διαδικασίας ελέγχεται στο φθορόμετρο EF-ZM.

Σε τρόφιμα και ποτά, η ριβοφλαβίνη υπάρχει σε δεσμευμένη κατάσταση, δηλαδή με τη μορφή εστέρων φωσφόρου που σχετίζονται με μια πρωτεΐνη. Για να προσδιοριστεί η ποσότητα της ριβοφλαβίνης στα προϊόντα, είναι απαραίτητο να απελευθερωθεί από την δεσμευμένη της κατάσταση με όξινη υδρόλυση και επεξεργασία με ενζυμικά παρασκευάσματα. Η βιταμίνη Β1 στα αναψυκτικά υπολογίζεται χρησιμοποιώντας μια χημική μέθοδο για τον προσδιορισμό της ποσότητας των εύκολα υδρολυόμενων και στενά συνδεδεμένων μορφών ριβοφλαβίνης στους ιστούς. Η μέθοδος βασίζεται στην ικανότητα της ριβοφλαβίνης να φθορίζει πριν και μετά την αναγωγή της με υποθειώδες νάτριο. Προσδιορισμός της συνολικής περιεκτικότητας σε φαινολικές ενώσεις. Για αυτό, χρησιμοποιείται η χρωματομετρική μέθοδος Folin-Denis, η οποία βασίζεται στον σχηματισμό μπλε συμπλεγμάτων κατά την αναγωγή του βολφραμικού οξέος υπό τη δράση πολυφαινολών με ένα αντιδραστήριο σε αλκαλικό μέσο. Οι φαινολικές ενώσεις προσδιορίζονται με χλωρογενικό οξύ με φωτομετρία φλόγας σε ένα όργανο EKF-2.

2. Χρωματογραφικές μέθοδοι για τον προσδιορισμό των βιταμινών

Πρόσφατα, η μέθοδος της υγρής χρωματογραφίας υψηλής απόδοσης αναπτύσσεται ραγδαία στο εξωτερικό. Αυτό οφείλεται, πρώτα απ' όλα, στην εμφάνιση υγρών χρωματογραφημάτων ακριβείας και στη βελτίωση των τεχνικών ανάλυσης. Η ευρεία χρήση της μεθόδου HPLC στον προσδιορισμό των βιταμινών αντικατοπτρίστηκε και στον αριθμό των δημοσιεύσεων. Μέχρι σήμερα, περισσότερες από τις μισές δημοσιευμένες εργασίες για την ανάλυση τόσο των υδατοδιαλυτών βιταμινών όσο και των λιποδιαλυτών βιταμινών είναι αφιερωμένες στη χρήση αυτής της μεθόδου.Διάφοροι τύποι χρωματογραφίας έχουν γίνει ευρέως διαδεδομένοι στον προσδιορισμό των βιταμινών.

Για τον καθαρισμό της τοκοφερόλης από ακαθαρσίες, χρησιμοποιείται χρωματογραφία λεπτής στιβάδας. Σε συνδυασμό με φασματοφωτομετρικές και φθορισμομετρικές μεθόδους, η βιταμίνη Ε προσδιορίζεται επίσης ποσοτικά με αυτή τη μέθοδο. Κατά τον διαχωρισμό χρησιμοποιούνται πλάκες με silufol, kieselgel

Η ανάλυση των ισομερών τοκοφερόλης στο ελαιόλαδο πραγματοποιείται με χρωματογραφία αερίου-υγρού. Οι μέθοδοι ανάλυσης GC και GLC απαιτούν την παρασκευή πτητικών παραγώγων, κάτι που είναι εξαιρετικά δύσκολο στην ανάλυση των λιποδιαλυτών βιταμινών. Για το λόγο αυτό, αυτές οι μέθοδοι προσδιορισμού δεν χρησιμοποιούνται ευρέως. Ο προσδιορισμός της βιταμίνης Ε σε προϊόντα διατροφής, φαρμακευτικά προϊόντα και βιολογικά αντικείμενα πραγματοποιείται με βαθμιδωτούς και ισοκρατικούς τρόπους, τόσο σε συνθήκες κανονικής φάσης όσο και σε συνθήκες αντίστροφης φάσης. Ως προσροφητικά χρησιμοποιούνται silica gel (SG), γη διατόμων, silasorb, ODS-Hypersil και άλλοι φορείς. Για συνεχή παρακολούθηση της σύνθεσης του εκλούσματος σε υγρή χρωματογραφία κατά την ανάλυση βιταμινών και αύξηση της ευαισθησίας του προσδιορισμού, UV (A, = 292 nm), φασματοφωτομετρικό (X = 295 nm), φθορισμού (X, = 280/325 nm ), ηλεκτροχημικοί, PMR και φασματοσκοπικοί ανιχνευτές μάζας.

Οι περισσότεροι ερευνητές προτιμούν να χρησιμοποιούν χρωματογραφία προσρόφησης για να διαχωρίσουν μείγματα και των οκτώ ισομερών των τοκοφερολών και των οξικών τους. Σε αυτές τις περιπτώσεις, η κινητή φάση είναι συνήθως υδρογονάνθρακες που περιέχουν μικρές ποσότητες οποιουδήποτε απλού αιθέρα. Οι αναφερόμενες μέθοδοι για τον προσδιορισμό της βιταμίνης Ε, κατά κανόνα, δεν προβλέπουν προκαταρκτική σαπωνοποίηση των δειγμάτων, γεγονός που μειώνει σημαντικά τον χρόνο ανάλυσης.

Ο διαχωρισμός με ταυτόχρονο ποσοτικό προσδιορισμό της περιεκτικότητας σε λιποδιαλυτές βιταμίνες (A, D, E, K) στην κοινή παρουσία τους σε πολυβιταμινούχα σκευάσματα πραγματοποιείται τόσο σε άμεση όσο και σε αντίστροφη φάση. Σε αυτή την περίπτωση, οι περισσότεροι ερευνητές προτιμούν να χρησιμοποιούν την έκδοση αντίστροφης φάσης της HPLC. Η μέθοδος HPLC σάς επιτρέπει να αναλύετε τις υδατοδιαλυτές βιταμίνες Β1 και Β2 ταυτόχρονα και χωριστά. Για τον διαχωρισμό των βιταμινών, χρησιμοποιούνται εκδόσεις HPLC αντίστροφης φάσης, ζεύγους ιόντων και ιοντοανταλλαγής. Εφαρμόστε και ισοκρατικούς και βαθμωτούς τρόπους χρωματογραφίας. Ο προκαταρκτικός διαχωρισμός των αναλυτών από τη μήτρα πραγματοποιείται με ενζυματική και όξινη υδρόλυση του δείγματος.

Πλεονεκτήματα της μεθόδου υγρής χρωματογραφίας:

Ορισμός πολλαπλών εξαρτημάτων ταυτόχρονα

Εξάλειψη της επιρροής των παρεμβαλλόμενων συστατικών

Το σύμπλεγμα μπορεί να αναδιαμορφωθεί γρήγορα για να πραγματοποιήσει άλλες αναλύσεις.

Σύνθεση και χαρακτηριστικά εξοπλισμού και λογισμικού για υγρό χρωματογράφο "Chromos ZhKh-301":

Τραπέζι 1

Πλεονεκτήματα του χρωματογράφου "Chromos ZhKh-301":

Η υψηλή σταθερότητα και η ακρίβεια της διατήρησης του ρυθμού ροής του υγρού έκλουσης εξασφαλίζεται από το σχεδιασμό αντλιών υψηλής πίεσης.

Εύκολη πρόσβαση στις κολώνες παρέχεται από τη σχεδίαση του οργάνου.

Η αποτελεσματικότητα του διαχωρισμού εξασφαλίζεται με τη χρήση χρωματογραφικών στηλών υψηλής απόδοσης.

Ένα ευρύ γραμμικό εύρος του σήματος μέτρησης των ανιχνευτών χωρίς αλλαγή του ορίου μέτρησης, το οποίο καθιστά δυνατή τη μέτρηση κορυφών τόσο υψηλών όσο και χαμηλών συγκεντρώσεων με υψηλή ακρίβεια.

Ανάλυση χρωματογράφων υδατοδιαλυτών βιταμινών:

1 ασκορβικό οξύ (C),
2 νικοτινικό οξύ (νιασίνη),
3 πυριδοξίνη (Β6),
4 θειαμίνη (Β1),
5 νικοτιναμίδη (Β3),
6 φολικό οξύ(Μ),
7 κυανοκοβαλαμίνη (Β12),
8 ριβοφλαβίνη (Β2).

Εμπειρία 1.Ποσοτικός προσδιορισμός της βιταμίνης C.

Η αρχή της μεθόδου. Η μέθοδος βασίζεται στην ικανότητα της βιταμίνης C να μειώνει την 2,6-διχλωροφαινολινδοφαινόλη, η οποία έχει κόκκινο χρώμα σε όξινο περιβάλλον και γίνεται άχρωμη κατά την αναγωγή. σε αλκαλικό περιβάλλον, το χρώμα είναι μπλε. Για την προστασία της βιταμίνης C από την καταστροφή, το διάλυμα δοκιμής τιτλοδοτείται σε όξινο μέσο με αλκαλικό διάλυμα 2,6-διχλωροφαινολινοφαινόλης μέχρι να εμφανιστεί ένα ροζ χρώμα.

Για να υπολογίσετε την περιεκτικότητα σε ασκορβικό οξύ σε προϊόντα όπως το λάχανο, οι πατάτες, οι βελόνες, το άγριο τριαντάφυλλο κ.λπ., χρησιμοποιήστε τον τύπο:

όπου Χ- την περιεκτικότητα σε ασκορβικό οξύ σε χιλιοστόγραμμα ανά 100 g του προϊόντος. 0,088 - η περιεκτικότητα σε ασκορβικό οξύ, mg. ΑΛΛΑ– αποτέλεσμα ογκομέτρησης με διάλυμα 2,6-διχλωροφαινολινοφαινόλης 0,001 N, ml. Β -όγκος εκχυλίσματος που λαμβάνεται για τιτλοδότηση, ml. AT -την ποσότητα του προϊόντος που λαμβάνεται για ανάλυση, g. σολείναι η συνολική ποσότητα εκχυλίσματος, ml. 100 - μετατροπή ανά 100 g προϊόντος.

Συμπέρασμα: καταγράψτε τα αποτελέσματα του πειράματος και τα υπολογισμένα δεδομένα.

Εμπειρία 1.1. Προσδιορισμός της περιεκτικότητας σε βιταμίνη C στο λάχανο.

Η σειρά της εργασίας.

Ζυγίζουμε 1 g λάχανου, αλέθουμε σε γουδί με 2 ml διαλύματος υδροχλωρικού οξέος 10% (HCl - Υδροχλωρικό οξύ, υδροχλωρικό οξύ, υδροχλωρικό οξύ), προσθέτουμε 8 ml νερό και φιλτράρουμε. Μετρήστε 2 ml του διηθήματος για τιτλοδότηση, προσθέστε 10 σταγόνες διαλύματος υδροχλωρικού οξέος 10% και τιτλοποιήστε με 2,6-διχλωροφαινολινοφαινόλη μέχρι να παραμείνει ένα ροζ χρώμα για 30 δευτερόλεπτα. αρχή της μεθόδουαντιδράσεις. Υπολογίστε την περιεκτικότητα σε ασκορβικό οξύ σε 100 g λάχανου σύμφωνα με τον παραπάνω τύπο. 100 g λάχανου περιέχει ασκορβικό οξύ 25-60 mg, 100 g αγριοτριανταφυλλιάς 500-1500 mg και οι βελόνες 200-400 mg.

Εμπειρία 1.2. Προσδιορισμός της περιεκτικότητας σε βιταμίνη C στις πατάτες.

Η σειρά της εργασίας.

Ζυγίζουμε 5 g πατάτες, αλέθουμε σε γουδί με 20 σταγόνες διαλύματος υδροχλωρικού οξέος 10% (για να μην σκουρύνουν οι πατάτες). Σταδιακά προστίθεται απεσταγμένο νερό - 15 ml. Η προκύπτουσα μάζα χύνεται σε ένα ποτήρι, το γουδί ξεπλένεται με νερό, χύνεται πάνω από μια γυάλινη ράβδο σε ένα ποτήρι ζέσεως και τιτλοδοτείται με 0,001 N. με διάλυμα 2,6-διχλωροφαινολινοφαινόλης σε ροζ χρώμα, με βάση αυτό αρχή της μεθόδουαντιδράσεις. 100 g πατάτας περιέχει βιταμίνη C 1-5 mg.

Συμπέρασμα: καταγράψτε τα αποτελέσματα του πειράματος.

Εμπειρία 1.3. Προσδιορισμός της περιεκτικότητας σε βιταμίνη C στα ούρα.

Ο προσδιορισμός της περιεκτικότητας σε βιταμίνη C στα ούρα δίνει μια ιδέα για τα αποθέματα αυτής της βιταμίνης στο σώμα, καθώς υπάρχει αντιστοιχία μεταξύ της συγκέντρωσης βιταμίνης C στο αίμα και της ποσότητας αυτής της βιταμίνης που εκκρίνεται στα ούρα. Ωστόσο, με την υποβιταμίνωση C, η περιεκτικότητα σε ασκορβικό οξύ στα ούρα δεν μειώνεται πάντα. Συχνά είναι φυσιολογικό, παρά τη μεγάλη έλλειψη αυτής της βιταμίνης σε ιστούς και όργανα.

Σε υγιείς ανθρώπους, η εισαγωγή per os 100 mg βιταμίνης C οδηγεί γρήγορα σε αύξηση της συγκέντρωσής της στο αίμα και στα ούρα. Στην υποβιταμίνωση C, οι ιστοί έχουν έλλειψη βιταμίνης λήψη βιταμίνηςΟ C και η συγκέντρωσή του στα ούρα δεν αυξάνεται. Τα ούρα ενός υγιούς ατόμου περιέχουν 20-30 mg βιταμίνης C ή 113,55-170,33 μmol/ημέρα. Στα παιδιά, το επίπεδο αυτής της βιταμίνης μειώνεται με το σκορβούτο, καθώς και με οξείες και χρόνιες μολυσματικές ασθένειες.